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人骨髓MSC分离培养及诱导分化为脂肪细胞的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的建立一种分离纯化,培养扩增人骨髓MSCs的方法,并探讨体外诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。方法密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,分离纯化人骨髓间充质干细胞,并用马血清诱导分化为脂肪细胞。结果MSCs原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈梭形,细胞传代稳定,在体外连续传代培养9代,未发生形态学改变,无衰老征象;传代培养MSCs(P3)在20%马血清的L-DMEM培养液中分化为脂肪细胞。结论骨髓MSCs体外增殖和传代能力强,通过离体培养可使体内环境下低丰度的MSCs实现数量扩增 ...
王莹, 罗速
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小鼠骨髓间充质干细胞的分离、培养、纯化及鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的探讨分离、培养、纯化和鉴定小鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)方法,观察MSCs体外生长特征。方法取小鼠胫骨和股骨,取出骨髓细胞,用1.073g/ml的Percoll分离液梯度离心,培养皿培养、换液除去非贴壁细胞,获得MSCs,通过传代对MSCs进行纯化和扩增培养。进行形态学观察,测定生长曲线,用流式细胞仪检测P3代MSCs细胞周期及表面抗原。结果 新分离的MSCs呈小圆形,形态规整。培养传代后,细胞大小均匀,形态较一致,多为梭形。P1、P2 ...
赵继学, 王广义, 张海玉, 伏鑫
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前列腺素E2对肝细胞生长因子生成的促进作用研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2005
目的通过小鼠乳腺癌细胞分泌的前列腺素E2(ProstglandinE2,PGE2)与人成纤维细胞生成的肝细胞生长因子(Hepatocytegrowthfactor,HGF)之间关系的研究,进一步了解肿瘤细胞的浸润、转移与基质细胞间的关系。方法采用分子筛与反相高效液相色谱分离出小鼠乳腺癌细胞条件培养基中刺激人成纤维细胞分泌HGF的有效成份,并对其进行鉴定。另外在培养小鼠乳腺癌细胞的同时加入细胞环氧化酶抑制剂消炎痛,收集条件培养液,观察其对人成纤维细胞生成HGF的影响 ...
尹家俊   +4 more
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体外诱导人骨髓间充质干细胞向造血细胞分化的研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的探讨体外诱导人骨髓间充质干细胞(hMSC)向造血细胞分化的可行性及分化条件。方法首先建立hMSC的分离培养扩增体系,制备小鼠胎肝基质细胞条件培养液(FLSC-CM),将hMSC接种在分别含FLSC-CM和IL-6、SCF组合的培养体系中,通过形态学、直接免疫荧光染色检测法、粒-单/巨噬系集落形成细胞培养(CFU-GM)对分化细胞进行鉴定。结果hMSC经FLSC-CM诱导培养9天后,产生较多的悬浮细胞,悬浮细胞瑞士染色后形态类似于单核或小淋巴细胞,表达人CD34和人CD45表面抗原 ...
陈晓   +5 more
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不同浓度葡萄糖对大鼠腹膜间皮细胞表达p21WAF1 的影响

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000
【目的】观察不同浓度的葡萄糖对大鼠腹膜间皮细胞p21WAF1 表达的影响。【方法】大鼠腹膜间皮细胞在含糖 13.8 g/L 和38.6 g/ L 的无血清培养基培养24 h 后, 用流式细胞仪分析细胞周期分布, 用RT-PCR法测定p21WAF1 的表达水平。 【结果】经含糖13.8 g/L 和38.6 g/L 培养基培养24 h 后腹膜间皮细胞大多出现细胞肥大和停滞于细胞周期的G1 期, 以38.6 g/ L 组明显。高浓度葡萄糖刺激p21WAF1 mRNA 表达, 38.6 g/ L ...
杨琼琼   +6 more
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犬上颌窦底黏膜骨原细胞的培养和成骨性能的研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2013
【目的】 研究犬上颌窦底黏膜骨原细胞的成骨性能?【方法】 取Beagle犬上颌窦底黏膜,显微镜下观察其组织学形态?分离培养犬上颌窦底黏膜骨原细胞?流式细胞术检测一代细胞的表面抗原CD44?CD146和CD34?一代细胞经成骨诱导培养用于研究其体外成骨性能?诱导3 d?7 d和12 d时分别检测其碱性磷酸酶活性,对照组细胞用基础培养基培养?诱导16 d时,进行BMP-2免疫组化染色,对照组细胞经基础培养基培养?Western blot检测诱导0 d?7 d和16 d时BMP-2的表达?诱导28 d时 ...
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成人视网膜前体细胞的体外分离培养和鉴定

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006
【目的】对成人视网膜前体细胞进行体外分离、培养和鉴定。【方法】成人眼球 12 只,“机械分离联合酶消化法”分离出睫状上皮层的色素性细胞, 10 ng/mL 碱性成纤维细胞生长因子(bFGF) +10 ng/mL 表皮生长因子(EGF) 的无血清 DMEM/F12 培养液中培养, 并从三方面鉴定其神经干细胞特性: A. 免疫荧光染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白 Nestin 的表达 ; B. 自我更新能力 : 原代神经球消化传代后 , 继续培养观察新神经球的形成; C. 多向分化潜能: 原代细胞培养
唐仕波, 林少芬
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不含佛波酯和霍乱毒素条件下体外培养小儿正常表皮黑素细胞的实验研究

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2011
【目的】 研究探索不含佛波酯霍乱毒素条件下小儿正常表皮黑素细胞培养与扩增技术,鉴定黑素细胞合成黑素与产生表面抗原的功能,为开展小儿白癜风以及先天性表皮色素减退等疾病的细胞移植治疗提供可靠的实验依据【方法】获取15例正常儿童的皮肤组织,分离提取黑素细胞, 应用M2培养基并添加bFGF进行黑素细胞培养与增殖, 采用DOPA染色法黑素细胞表面抗原(MART-1)荧光特异性抗体结合实验鉴定体外培养黑素细胞的细胞纯度合成黑素与表达细胞表面抗原的生物学功能【结果】 15例健康儿童自体黑素细胞培养成功率为100 ...
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成肌细胞培养的重复肌块法

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002
【目的】改进体外成肌细胞培养方法。【方法】取20 只小鼠分4 组, 取股骨肌用肌块法进行成肌细胞原代培养, 并重复利用肌块6 次。对培养的成肌细胞进行生长状态观察及免疫的组化鉴定。【结果】重复6 次使用肌块培养的成肌细胞 生长、分化良好;一次差速贴壁纯化后, 经免疫组化方法鉴定, 96 %以上的细胞呈肌细胞特异抗体阳性反应。【结论 ...
陈松林   +3 more
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