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慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1993
研究45例慢性乙型肝炎患者的HCV重叠感染。病例均为后发抗HCV阳性的慢性HBsAg携带者,无先抗HCV阳性而后HBsAg阳性的个案,这可能反映HBV和HCV两种病毒感染的先后次序、不同传播方式及HBV对HCV易感性的增进作用。用RT-PCR检出30/45例血浆HCV RNA阳性,不仅确证HCV重叠感染诊断,还证实HCV复制及传染性。23/30例HCVRNA阳性者有输血史,提示输血是其获得HCV重叠感染的主要途迳。用PCR检出25/45例血清HBV DNA阳性,其中抗HBe阳性者的HBV ...
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死胎肾脏组织中HBVDNA的表达的临床和病理研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2002
目的 观察死胎肾脏组织中HBVDNA表达的情况 ,探讨通过产妇传播到死胎肾脏组织中的HBV是否存在复制。方法 采集 40例乙型肝炎产妇产下的死胎 ,常规尸检 ,取肾脏组织。采用原位分子杂交法 ,检测其中的HBVD NA ;回访产妇产前静脉血HBV的检测结果。结果 死胎肾脏组织中HBVDNA的检出率为 2 6/ 4 0 (65 .0 % )例。产妇产前静脉血HBV呈高、低和无复制状态时 ,肾脏组织中HBVDNA的检出率分别为 1 4 / 1 6(88.0 % )例、2 / 4 (50 .0 % )例、1 ...
沈玲   +5 more
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HBVDNA与HCVRNA同步扩增技术的建立与应用

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1996
同一份血清中的HBVDNA与HCVRNA经热变性直接法一步裂解,先用针对HCV特异的外引物将HCVRNA逆转录为cDNA,然后采用HBV,HCV各自特异的2套引物进行PCR同步扩增。结果按预定大小,PCR产物出现2条带。分别为428bp,144bp。将产物转移至尼龙膜上,经α-32PdCTP标记HCV探针及地高辛素标记HBV探针进行重复杂交,证明144bp为HCV所特有,428bp为HBV特有。用该方法对30份单独检测证实HBV,HCV核酸均阳性血清测验,其结果完全吻合、该二联技术可明显缩短检测时间 ...
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应用嵌套式PCR法检测结核杆菌DNA

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1995
应用嵌套式聚合酶链反应(nestedPCR)法检测结核菌DNA,所用内、外两对寡核苷酸引物衍生于37.7u(38kDa)蛋白抗原b的编码(Pab)DNA序列。对6种抗酸分枝杆菌和10种非分枝杆菌DNA进行扩增,经琼脂糖凝胶电泳和溴化乙锭染色证实,只有人型结核杆菌、牛型结核杆菌和卡介苗(BCG)出现322bp特异扩增带,而其他菌种未见此种扩增。第1步和第2步PCR分别检测到的最低限量为10pg和10fg的靶DNA。采用此法检测72份临床标本,结果显示:该技术具有特异性强、敏感性高、快速简便的优点 ...
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Nested PCR检测HBV DNA技术的建立与应用

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1992
本研究建立一种Nested PCR技术检测HBV DNA,即采用内外两对引物分别进行连续两次扩增,使检测极限由一次PCR的10-2Pg提高到10-5Pg;经32P标记寡核苷酸探针作Southern转移杂交以及BgIⅡ作酶切分析证实两次扩增均为特异性扩增。通过抗-HBe阳性、单项抗一HBc阳性和单项抗-HBs阳性三种血清的HBV DNA的检测,表明该方法确能检出标准PCR所不能检出的极低水平的HBV感染,对提高乙型肝炎的诊断水平及更准确地评价药物疗效有重要意义。
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乙肝病毒PCR产物的鉴定及单项抗HBc阳性血清的HBV基因扩增

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994
本文报道HBV基因扩增产物的限制性酶切分析和寡核苷酸探针杂交鉴定、应用血清HBVDNA的PCR扩增产物制备基因探针和单项抗HBc阳性血清的HBV基因扩增。PCR用adr、adw、ayw3种亚型HBV的C基因区共有序列为内外两对引物分单次或套式扩增,产物为66abp或428bp,两者序列中段共含-BgIⅡ酶切点并与一寡核苷酸探针同源。428bp产物被用以缺口平移标记32P探针作斑点和转印杂交检测。结合分子杂交的PCR结果从单项抗HBc阳性的8/42例慢性肝炎和2/12例无症状受测者血清中检出HBVDNA ...
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EB病毒DNA酶基因特异性结合蛋白的检测

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997
摘 要 PCR法扩增出EB病毒DN A酶全基因之后,用[γ-32 P] ATP进行5’ 末端标记,然后利用凝胶迁移 分析法( gel mobi lit y shi f t as say)来检测与该基因结合的蛋白质。结果表明在Raji细胞核和细胞浆中均有EB病 毒DN A酶基因非特异性和特异性结合蛋白,在人乳清中也有与该基因结合的蛋白质。
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原发型肝癌的HBV感染及肝内的HBVDNA

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1990
应用32P标记的3.2kb克隆HBVDNA探针对36例原发型肝癌患者的血清和肝组织作HBVDNA斑点杂交,结果:血清、肝癌组织、癌近邻肝组织和癌远邻肝组织的阳性率分别为56%、91%88%和80%,皆高于国内外一些同类研究,说明其HBV感染率比一般认为的还要常见,尽管肝内良恶组织的HBV DNA阳性率未见显著差别。此外,尚对HBV6项血清标记作了检测,结果HBsAg和PHSA·Re的阳性率均较高,分别为83%和75%,说明多数病例的HBV感染仍然处于病毒活动复制阶段。由于血清HBsAb阳性者,肝内HBV
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建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1992
建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术。人工合成adr、adw和ayw三个业型HBV的两个共有序列NC1和NC2作为引物扩增一长428bp且含一BglⅡ酶切点的HBV C基因片段。含FD酶的反应体系在水浴93℃30秒、55℃60秒、72℃90秒依序循环30周期,当克隆HBV DNA模板最小加量为10 fg时,产物作琼脂糖凝胶电泳经溴化乙锭染色在紫外线下观察仍可见428 bp位置的阳性荧光带。阳性产物经BgⅠⅡ酶切后分为125 bp和303 bp的两个特异片段。同一条件下的阴性对照则出现阴性结果 ...
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