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High-efficienct Construction of HBV-replicative Stable Cell Lines Based on ALL-IN-ONE Sleeping Beauty Transposon System [PDF]

open access: yes, 2016
乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)感染是全球范围内的重要公共卫生问题。HBV为嗜肝病毒,只能在肝细胞中增殖,目前HBV复制与抑制相关的研究大多采用HBV质粒瞬时转染Huh7或HepG2细胞的方法,但在进行药物筛查、病毒制备等需要稳定均一的实验条件时,稳定整合细胞株是更好的选择。HepG2.2.15和HepAD38是当前用于HBV研究的最常用的两株细胞株,其构建策略为随机整合方式,且这两株细胞株均为GenotypeD型。有研究表明,不同基因型乙型肝炎病毒有不同的地理分布特征,在复制 ...
吴勇
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Establishment and application of neutralizing models against Hepatitis E virus [PDF]

open access: yes, 2017
戊型肝炎(HepatitisE,HE)是由戊型肝炎病毒(HepatitisEvirus,HEV)所引起的病毒性肝炎。近年来,HEV已逐渐成为全球范围内引发急性病毒性肝炎的主要原因之一。孕妇与老年人是主要高危人群,戊型肝炎病例的病死率约为0.2~4%,孕妇感染HEV的病死率可高达10~25%。HEV是单股正链RNA病毒,基因组全长7.2kb,包含3个开放阅读框(OpenReadingFrame,ORF),其中ORF2负责编码戊型肝炎病毒唯一的衣壳蛋白,共包含660个氨基酸 ...
蔡薇
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Studies of melanopsin in the mudskipper Boleophthalmus pectinirostris [PDF]

open access: yes, 2017
大弹涂鱼(Boleophthalmuspectinirostris)是生活于潮间带淤泥滩涂的一种两栖鱼类。课题组前期研究表明,雌性大弹涂鱼生殖群体在繁殖季节出现半月周期的产卵现象,血清中的性类固醇激素、褪黑素、间脑中的褪黑素受体亚型基因mtnr1a1.4和卵巢中的褪黑素受体亚型基因mtnr1a1.7也具有明显的半月周期变化节律,并且半月周期峰值出现的时间与产卵时间基本一致。为了进一步了解大弹涂鱼黑视蛋白与褪黑素以及半月周期产卵习性的关系,本文采用分子生物学等方法克隆了大弹涂鱼四种黑视蛋白基因亚型 ...
杨明姝
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Quantitative proteomic study of cell cycle of Prorocentrum donghaiense during the blooming period [PDF]

open access: yes, 2016
东海原甲藻(Prorocentrumdonghaiense)是中国近海主要有害藻华种,几乎每年都会引发大规模的有害藻华,对海洋生态系统、海洋生物资源和水产养殖造成了严重威胁,并且影响公众健康。尽管目前对东海原甲藻藻华形成的海洋学和生态学机制开展了大量研究,但对现场藻华形成过程中东海原甲藻细胞生长调控的分子机制知之甚少。 本论文以现场东海原甲藻藻华为研究对象,运用基于质谱的定量蛋白质组学技术—iTRAQ(isobarictagsforrelativeandabsolutequantitation)技术 ...
刘九玲
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乙肝病毒PCR产物的鉴定及单项抗HBc阳性血清的HBV基因扩增

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1994
本文报道HBV基因扩增产物的限制性酶切分析和寡核苷酸探针杂交鉴定、应用血清HBVDNA的PCR扩增产物制备基因探针和单项抗HBc阳性血清的HBV基因扩增。PCR用adr、adw、ayw3种亚型HBV的C基因区共有序列为内外两对引物分单次或套式扩增,产物为66abp或428bp,两者序列中段共含-BgIⅡ酶切点并与一寡核苷酸探针同源。428bp产物被用以缺口平移标记32P探针作斑点和转印杂交检测。结合分子杂交的PCR结果从单项抗HBc阳性的8/42例慢性肝炎和2/12例无症状受测者血清中检出HBVDNA ...
doaj  

EB病毒DNA酶基因特异性结合蛋白的检测

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997
摘 要 PCR法扩增出EB病毒DN A酶全基因之后,用[γ-32 P] ATP进行5’ 末端标记,然后利用凝胶迁移 分析法( gel mobi lit y shi f t as say)来检测与该基因结合的蛋白质。结果表明在Raji细胞核和细胞浆中均有EB病 毒DN A酶基因非特异性和特异性结合蛋白,在人乳清中也有与该基因结合的蛋白质。
doaj  

原发型肝癌的HBV感染及肝内的HBVDNA

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1990
应用32P标记的3.2kb克隆HBVDNA探针对36例原发型肝癌患者的血清和肝组织作HBVDNA斑点杂交,结果:血清、肝癌组织、癌近邻肝组织和癌远邻肝组织的阳性率分别为56%、91%88%和80%,皆高于国内外一些同类研究,说明其HBV感染率比一般认为的还要常见,尽管肝内良恶组织的HBV DNA阳性率未见显著差别。此外,尚对HBV6项血清标记作了检测,结果HBsAg和PHSA·Re的阳性率均较高,分别为83%和75%,说明多数病例的HBV感染仍然处于病毒活动复制阶段。由于血清HBsAb阳性者,肝内HBV
doaj  

建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1992
建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术。人工合成adr、adw和ayw三个业型HBV的两个共有序列NC1和NC2作为引物扩增一长428bp且含一BglⅡ酶切点的HBV C基因片段。含FD酶的反应体系在水浴93℃30秒、55℃60秒、72℃90秒依序循环30周期,当克隆HBV DNA模板最小加量为10 fg时,产物作琼脂糖凝胶电泳经溴化乙锭染色在紫外线下观察仍可见428 bp位置的阳性荧光带。阳性产物经BgⅠⅡ酶切后分为125 bp和303 bp的两个特异片段。同一条件下的阴性对照则出现阴性结果 ...
doaj  

石蜡分隔的热启动PCR技术扩增血清HBV-DNA

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1995
将聚合酶链反应(PCR)成份分两组。先加一组含dNTPs、引物和MgCl2,并加1粒组织切片用石蜡凝固为盖层。再加另一组反应液含待扩增模板、TaqDNA聚合酶和KCl,以与第一组反应液分隔。PCR循环时高温可使中隔蜡层融化,两组反应液相混,蜡油上浮作为防蒸发屏障。由此避免室温混合加样和预置导致引物聚体形成和错导非特异扩增,提高PCR特异性和灵敏性。作者应用这一技术检测53例单项抗HBc阳性血清,检出HBVDNA13例,检测69例HBsAg阳性和抗HBe阳性血清,检出HBVDNA61例 ...
doaj  

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