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SIK2 shRNA重组腺病毒载体构建及其在3T3-L1脂肪细胞的表达
目的构建特异性小鼠盐诱导基因(Salt induced kinase2,SIK2)的shRNA腺病毒载体,干扰脂肪细胞中SIK2的表达。方法设计3对靶向SIK2的shRNA,插入穿梭质粒pENTR/U6载体,转染3T3-L1脂肪细胞,通过Real-timePCR方法筛选最佳沉默SIK2效果的穿梭质粒,经腺病毒同源重组后,重组小鼠SIK2shRNA腺病毒载体经脂质体转染HEK293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2-shRNA,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3 ...
杜静 +5 more
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Study on the mechanism of FBXW7 protects against insulin resistance via regulating FetuinA protein level [PDF]
目的:FBXW7属于SCF类泛素连接酶E3,可调控脂质代谢关键转录因子和胰岛功能相关蛋白的泛素化降解。FetuinA是一类参与机体糖脂代谢调控的重要肝脏因子,与胰岛素抵抗发生密切相关,但在肥胖状态下肝脏中蛋白水平异常升高机制不得而知。本研究拟探究FBXW7在肥胖状态下对FetuinA蛋白水平调节机制,有助于进一步完善肥胖致胰岛素抵抗机制。 方法:本课题结合高脂饮食诱导的HFD肥胖小鼠模型和正常饮食诱导的ob/ob小鼠肥胖模型,检测小鼠糖脂代谢相关指标,采用Real-timePCR和ELISA ...
刘祺
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流行性腮腺炎(简称腮腺炎)是由腮腺炎病毒(Mumps Virus,MuV)感染引起的急性呼吸道传染病,经空气飞沫传播,全年均可发病,以冬春季高发,人类是该病毒的惟一宿主,好发于儿童和青少年,传染性仅次于麻疹和水痘,是一种在全球流行的急性传染病,临床以腮腺非化脓性肿胀、疼痛伴发热为主要症状。2004-2006年我国的腮腺炎爆发占公共卫生事件的20%左右[1,2 ...
李宏宇 +4 more
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Research on several important genes and genetically engineered vaccines of Koi herpesvirus [PDF]
高密度集约化养殖成为当下主要的水产养殖方式,带来较大收益的同时也导致鱼类病毒的更大范围的流行。传统使用化学消毒剂以及抗生素的鱼病防治策略引发了一系列严峻问题。鱼用疫苗作为一种经济高效的水产养殖防治措施渐渐引起大家的关注与重视。鲤鱼是我国的主要食用鱼种,在我国得到大范围的养殖,创造了巨大的经济效益。锦鲤是一种观赏用的花色鲤鱼,体色漂亮,色彩鲜艳,是淡水养殖观赏鱼中的精品,被称为水中宝石。1998年由以色列开始暴发的锦鲤疱疹病毒病给食用鲤鱼和观赏锦鲤的养殖造成了极大的危害 ...
庞纪明
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Oncolytic virus and cancer therapy [PDF]
溶瘤病毒是目前恶性肿瘤治疗领域中较有前景的新型基因治疗药物,其通过选择性杀伤肿瘤细胞和诱导机体产生特异的抗肿瘤免疫两种途径来实现肿瘤靶向治疗的目的,从而达到较好的抗肿瘤效果。现对溶瘤病毒的溶瘤机制、临床研究、联合治疗和当前挑战及未来展望等方面进行综述。Oncolytic virus are therapeutically promising anticancer viruses that selectively kill cancer cells and induce host anti-tumor ...
夏宁邵, 潘海娇, 陈琴, 黄承浩
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miRNA-17~92 Inhibits Colorectal Cancer Progression by Targeting Angiogenesis [PDF]
miRNA中的miR-17~92簇在包括结直肠癌(Colorectalcancer,CRC)等人类癌症中广泛表达。已有的研究表明miR-17~92在某些肿瘤模型中可促进肿瘤发生和癌组织血管生成。然而,其在CRC发生和进展中的作用仍然未知。在本研究中,我们意外发现,在用氧化偶氮甲烷(AOM)和右旋糖酐硫酸钠(DSS)诱导的CRC动物模型中,大肠、小肠上皮细胞过表达miR-17~92的转基因小鼠可见肿瘤体积变小、肿瘤血管减少。进一步研究发现,miR-17 ...
潘金水
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重构腺相关病毒转导 PDX- 1 对 C2C12 分化为胰岛素分泌细胞的作用
【目的】重构含有 PDX- 1 的腺相关病毒载体 , 将 PDX- 1 转导入 C2C12 细胞 , 观察胰岛素分泌量的改变。【方法】应用 PCR 方法将 PDX- 1 从 pZL1 质粒中克隆出来, 安装到Stratagene 公司的腺相关病毒(AAV Helper- Free System)表达系统中 , 转染 HEK293 细胞 , 培养 72 h, 提取病毒悬液 , 转导 PDX- 1 进入 C2C12 细胞中, 检测细胞培养液中的胰岛素含量。【结果】①用 X- gal 染色系统检测 ...
陈黎红
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The effect and mechanism of IL-1 R II / IL-1 RAcp in Autoimmune Myocarditis [PDF]
【目的】白介素-1(IL-1)是一种T淋巴细胞激活因子,大量研究报道,在心肌炎急性期表达量明显升高。白介素1受体II型(IL-1RII)可以招募白介素1受体辅助蛋白(IL-1RAcp),从而拮抗IL-1β的作用。本课题目的为评估IL-1RII和IL-1RAcp的重组质粒对大鼠自身免疫性心肌炎(EAM)的作用,并进一步探讨其机制,为心肌炎的临床治疗提供理论基础。 【方法】首先在临床实验中,我们选取厦门市心血管病医院诊断明确的心肌炎住院患者28例,应用bio ...
宋颖
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目的研究重组腺病毒载体感染小鼠神经瘤细胞(N2a)的感染效率及重组腺病毒介导的人鞘氨醇激酶-1(sphingosine kinase-1,SPK1)基因在N2a细胞表达特性。方法用流式细胞仪检测感染效率,用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白的表达;用Western blot方法检测SPK1蛋白的表达。结果 N2a细胞的感染效率和绿色荧光蛋白表达量在一定范围内随着病毒感染复数(Multiplicity of infection,MOI)的增加而增高,MOI为100时感染效率达峰值为(99.57±0.133)%
杨阳 +6 more
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The establishment of Elispot-based neutralization assay for HCMV and its application in epidemiological study [PDF]
人巨细胞病毒(humancytomegalovirus,HCMV)的感染在全球普遍存在。HCMV感染一般以潜伏状态存在,当机体免疫力低下时,则易发生再激发感染,引起严重甚至威胁生命的感染性疾病。在自然感染过程中,HCMV可感染包括淋巴细胞,上皮细胞以及内皮细胞在内的多种类型的细胞。HCMV体外培养体系的宿主细胞主要是上皮细胞及成纤维细胞。传统的基于细胞病变的TCID50以及空斑形成减少实验检测样本中和滴度的方法,存在周期长,操作繁杂,主观因素影响大的缺点,不适合大样本量的临床研究 ...
赵利利
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