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目的了解HBV感染的不同血清学指标组合的HBV-DNA阳性情况。方法用荧光定量聚合酶链反应和酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测1531份乙型肝炎患者和健康体检者血清的HBV-DNA和HBV血清标志物(HBV-M)。结果1组(HBsAg、HBeAg、抗HBc阳性)、2组(HBsAg、抗HBe、抗HBc阳性)、3组HBsAg阳性的患者HBV-DNA的阳性率分别为99.5%、57.1%、15.4%,其拷贝数分别为1.14×108/ml,1.43×106/ml,6.64×104/ml ...
王建东, 赵凤桐, 崔吉, 夏薇
doaj
目的利用荧光定量PCR检测健康育龄妇女阴道中的主要乳酸杆菌,并比较不同季节阴道乳酸杆菌分离率及数量的差异。方法分别在春夏季、秋冬季采集健康妇女阴道分泌物标本97例(春夏季63例、秋冬季34例),应用SYBR GreenI荧光定量PCR方法测定标本中5种乳酸杆菌16SrRNA基因拷贝数量并比较两组间的差异。结果健康妇女阴道乳酸杆菌的分离率达到96.9%,其中卷曲乳酸杆菌分离率66.0%、惰性乳酸杆菌45.4%。健康妇女阴道乳酸杆菌数量(Log10 copies/ml)为6.21±1.28 ...
彭国丽, 吕治, 苏建荣
doaj
长链非编码RNA XIST海绵miR-34通过Wnt/β-catenin信号通路促进结肠癌进展的机制
目的探讨长链非编码RNA XIST海绵miR-34促进结肠癌进展的机制;方法以人类结肠癌组织和相应的非肿瘤组织为研究对象,对人结肠癌细胞系(SW480,HCT116与HT29)和正常结肠上皮细胞系NCM460进行培养和转染,分别对细胞增殖能力、菌落形成能力、细胞迁移能力进行测定,利用qRT-PCR对mRNA表达量进行测定;荧光素酶报告分析实验检测荧光素酶活性;通过Western blotting分析对细胞捏蛋白表达量进行测定;利用动物实验进行皮下异种移植,测定肿瘤重量。结果 ...
洪森, 李世权, 刘涛, 康振华
doaj
Evaluation of Therapeutic Efficacy and Disease Activity in Early Syphilis Based on Real-time Quantitative PCR [PDF]
背景:至今,梅毒活动性和疗效评价依然困难,缺乏梅毒疗效评判标准,临床上通常采用血清非特异性抗体滴度和/或滴度四倍下降作为参考指标。然而,有关梅毒患者在梅毒螺旋体(Treponemapallidum,T.pallidum)自然感染过程中非特异性抗体变化仍然不清。本研究建立T.pallidum感染早期梅毒兔模型,监测自然感染和抗生素治疗过程中血清RapidPlasmaReagin(RPR)滴度和皮损中核酸载量变化,以及不同脏器中梅毒螺旋体核酸的分布,并进一步采用脏器标本接种新西兰兔观察感染率和疗效 ...
朱晓桢
core
荧光定量PCR检测大肠癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA的意义
目的探讨荧光定量PCR技术检测大肠癌患者外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA的临床意义。方法采用荧光定量PCR技术,检测大肠癌患者76例,健康志愿者30例外周血CK19mRNA、CK20mRNA和CEAmRNA水平。结果76例大肠癌患者外周血CK19mRNA的水平为5 962.5±19 926.1 copies/ml,其中38例阳性,阳性率为50.0%;CK20mRNA的水平为6 244.3±15 113.1 copies/ml,其中28例阳性,阳性率为36.8 ...
李招云 +3 more
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Research of Pfu polymerase improvement for Real-time fluorescent quantitative PCR [PDF]
自从1988年Saiki等将耐热性的Taq聚合酶引入PCR反应后,极大地推动了PCR技术的推广,也带动了实时荧光定量PCR(qPCR)技术的兴起,分子生物学发展日新月异。随着技术的推广与应用,人们也逐渐发现了Taq聚合酶自身存在的缺点,其保真性差不适合高保真的PCR,复杂样本扩增能力差需要对样本进行处理以及体系的优化等等。而B族的Pfu聚合酶具有高保真性、高行进性和强耐干扰能力,但是不具有5’-3’外切活性且强3’-5’外切活性会水解游离探针影响荧光增益信号检测而不能用于qPCR ...
陆龙飞
core
目的建立大鼠左颈总动脉与左侧颈外静脉吻合分流性肺动脉高压模型。方法成年雄性Wistar大鼠随机分为三组:吻合组(A组,n=15),结扎组(B组,n=15),正常组(C组,n=15)。饲养3月后测定血流动力学指标,右心室/左心室+室间隔质量比,肺组织切片病理变化,ELISA方法测定血浆ET-1浓度,荧光定量PCR测定肺组织表达内皮素-1mRNA的变化。结果与B,C两组相比,A组:右心室收缩压力明显升高,血清内皮素-1水平升高,荧光定量PCR结果显示A组内皮素-1mRNA的相对表达量是B组的2.601倍 ...
赵科研 +4 more
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The Mechanism Study of OVOL2 in Regulation of Epithelial-mesenchymal Transition of Colorectal Carcinoma [PDF]
实验背景及研究目的:ovo基因编码一组在进化上从果蝇、线虫、斑马鱼到哺乳动物保守的蛋白家族,包括OVOL1、OVOL2及OVOL3,该蛋白家族是含有4个C2H2锌指结构的转录因子。OVOL3只在胚胎早期表达,目前几乎没有相关研究。尽管现在已有许多关于OVOL1、OVOL2在组织发育方面的研究,但它们在肿瘤发生发展过程中的作用还是完全未知。在这篇文章中,我们致力于发现OVOL2与结直肠癌上皮-间质转化过程之间的关系,深入探究其内在分子机理。 实验方法:划痕 ...
陈晨
core
目的探讨荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)时核酸提取体系中加入样本量的不同和不同反应体系对检测结果的影响。方法选取乙肝检测患者DNA定量结果为低拷贝数(10-103copies/ml)和高拷贝数(105-107copies/ml)样本各10例,分别按2种核酸提取体系及2种反应体系分为4组进行HBV-DNA荧光定量PCR检测。结果 10例低拷贝数样本减少反应体系后只有3例检出有反应,由于反应体系的减小造成结果存在明显差异 ...
郭楠 +4 more
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Aldose Reductase Defeciency Significantly Ameliorates Development of AngII-induced Hypertension in C57BL/6 mice [PDF]
背景醛糖还原酶(Aldosereductase,AR),作为山梨醇代谢通路(thepolyolpathway,PP)的限速酶,它的异常激活是导致糖尿病并发症的危险因素。先前的动物实验表明AR的抑制剂唑泊司他(zopolrestat)能显著预防糖尿病的并发症,而肾素-血管紧张素系统(therenin-angiotensinsystem/angiotensinII,RAS/AngII)控制水盐和血压平衡。但是,AR/PP与RAS/AngII之间是否存在相互作用并不清楚。在本论文中 ...
王光辉
core

