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为获取大量高纯度的枯斑三生烟SKP1蛋白以便研究其功能和性质,以pMD18-SKP1质粒为模板,PCR扩增枯斑三生烟的SKP1基因的cDNA编码区,经酶切后构建表达载体pET23b—SKP1,转人大肠杆菌BL21(DE3)进行诱导表达,并考察不同的IPTG诱导终浓度、表达时间和表达温度对目的蛋白His—SKP1表达量的影响。SDS-PAGE分析结果表明:最佳表达条件为不加诱导剂的情况下,37 ...
杜昱光 +3 more
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目的探讨水通道蛋白AQP1-AQP9,AQP11及AQP12在多种肿瘤细胞系中的表达并探讨其意义。方法利用RT-PCR方法对小鼠乳腺癌细胞系4T1、mmt和lewis肺癌细胞系(LLC)表达水通道情况进行初步分析。结果4T1细胞表达AQP5、AQP7及AQP11,AQP5只有少量表达,后两者表达水平较高;在lewis肺癌(LLC)中有AQP7,AQP8及AQP11表达,其中AQP7和AQP11表达较高;在mmt细胞中AQP3、AQP4、AQP7及AQP11均被检出有表达,AQP7表达程度较高 ...
宗敏茹 +8 more
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非洲爪蟾Type II 和Type III 干扰素基因的克隆和表达分析
干扰素(interferon, IFN)作为重要的抗病毒免疫因子,自1957年首次报道以来,在哺乳类免疫反应中的作用得到阐明。哺乳类中的IFN主要分为三种类型:type I IFN(IFN-α/β)、type II IFN(IFN-γ)和type III IFN(IFN-λ)。近年来,低等脊椎动物如鱼类中的IFN的相关报道逐渐增多。两栖类作为水生脊椎动物向陆生脊椎动物、变温动物向恒温动物进化的过渡类群,在进化生物学上具有十分重要的意义。然而关于两栖类的IFN及其相关基因还知之甚少。因此 ...
齐志涛
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以β-淀粉样蛋白为靶的单价及二价真核表达载体的构建和表达 [PDF]
【目的】构建以β-淀粉样蛋白为靶单价及二价真核表达载体pcDNA3.1-Aβ1-42、pcDNA3.1-AB42x,并在真核细胞中表达目的蛋白。【方法】PCR法扩增编码B一淀粉样蛋白的目的基因,利用基因克隆技术构建单价及二价真核表达载体;应用酶切及测序鉴定真核表达载体构建成功后,用Western blot和细胞免疫组化染色检测其在真核细胞中的表达。【结果】相应的双酶酶切能够获得插入的目的基因片段(分别为137bp和269bp),测序未发现突变;Western blot结果可见两条约为4ku和8ku的条带,
袁群芳 +6 more
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目的探讨P53、VEGF在胃癌组织中的表达与胃癌生物学行为之间的相关性的关系。方法利用免疫组化S-P法对43例胃癌组织及30例癌旁正常组织中的P53、VEGF表达与微血管数目(MVC)进行研究。结果VEGF的表达与肿瘤细胞的分化程度及临床病理分期密切相关 ...
马波, 赵吉生, 丁大勇
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克隆了鳜T细胞表面受体CD4分子的cDNA序列并对其在组织/器官的表达进行了分析。鳜CD4分子的cDNA序列全长为2 356 bp,编码469个氨基酸。该CD4分子由4个免疫球蛋白样结构域(V1-C1-V2-C2)构成的胞外区、一个跨膜区和一个包含保守的CXC基序的胞内区组成。系统进化分析表明,鳜CD4分子与同属于鲈形目的鲈CD4分子聚为一支,与鲈的相似性最高(57%),与鲤的相似性较低(34%)。序列比对分析显示,CD4分子胞外区存在多个保守性位点,如:C1结构域中的WTC基序、V2和C2结构域中的N-
聂品, 郭政
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为探讨鱼类抗菌肽基因的生物学功能,研究应用RACE方法克隆获得了日本鳗鲡(Anguilla japonica)肝脏表达抗菌肽2基因(Liver-Expressed Antimicrobial Peptide 2,LEAP-2),即AJLEAP-2的cDNA序列,全长为450 bp,开放阅读框编码89个氨基酸。其成熟肽含有LEAP-2保守基序"C-X5-C-X4-C-X4-C"。AJLEAP-2基因组结构与其他脊椎动物LEAP-2相同,都包含有三个外显子。利用荧光定量PCR检测了AJLEAP ...
聂品 +5 more
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目的探讨IKKɑ调控表皮角朊细胞的增殖和分化及与p63的关系。方法原代分离培养野生型(wildtype,WT)和Ikkɑ基因敲除小鼠(Ikkα-/-)的表皮角朊细胞(WT-KTC及Ikkα-/-KTC),Western blot检测Ikkα-/-中p63的表达。含0.5mM Ca2+培养基刺激分化后,免疫荧光染色观察分化标记物Zonula occludens-1(ZO-1)及增殖标记物BrdU的表达。制备沉默p63表达的慢病毒并感染Ikkα-/-KTC,观察其增殖及分化能力的变化。结果在正常培养条件下 ...
沈燕君 +4 more
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斑马鱼nr1d4a和nr1d4b基因的表达及其对不同环境刺激的响应
研究获得了斑马鱼 nr1d4a 和 nr1d4b 基因的 cDNA,进行了序列比对和系统进化分析,并采用实时定量RT-PCR (qPCR)方法研究了其表达模式及对不同环境刺激的转录反应。研究发现,斑马鱼nr1d4a和nr1d4b是由基因复制产生的旁系同源基因,具有高度保守的DNA结合结构域和配体结合结构域。斑马鱼nr1d4a和nr1d4b的表达模式具有明显的差别。nr1d4a在胚胎发育早期的表达量很低,72 hpf时开始显著升高;而nr1d4b具有较高水平的母源性表达,6 hpf时的表达量明显降低 ...
崔宗斌 +4 more
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Nursing education on emotion expression of relatives of schizophrenia patients
[目的]探讨精神分裂症病人家属的情感表达与精神分裂症复发的关系。[方法]采用5min讲话样本、家属态度量表、家庭环境量表、Magama评判标准,对60例病人家属进行情感表达测定并进行分组护理教育。[结果] 45 .0 %的家属属于高情感表达批评型,3 6.7%的家属属于高情感表达过分投入型,18.3 %的家属表达了温暖、关怀和爱;病人家属的情感表达的方式与精神分裂症的复发有关;护理教育后家属的情感表达改善。[结论]进行家庭护理教育尤其是情感表达教育可降低病人住院日。
张立新, 李学安, 任浩
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