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摘 要: 【目的】 探讨miRNA-21转录调控因子AP-1、STAT3、NFI1、CBP、EBP、TGF-β、BMP-6、GFI1的结构特征及其与miRNA-21转录结合位点。【方法】 利用生物信息学工具分析miRNA-21转录调控因子的理化性质、三级结构、跨膜区、信号肽、亚细胞定位及预测与miRNA-21转录结合位点。【结果】 等电点分析表明STAT3等电点小于7.0,其余7个转录调控因子等电点大于7.0;脂溶指数分析显示,EBP脂溶指数大于100,为亲水性蛋白 ...
doaj
【目的】构建携 HBx 基因的逆转录病毒载体, 为研究 HBx 基因与肝癌生物学行为间的关系提供基础。【方法】采 用 PCR 技术从 HBV 全基因组中扩增 HBx 基因; 将 HBx 基因亚克隆至质粒 pLNSX, 构建质粒 pLNSHBx,磷酸钙-DNA 共沉淀 法将重组体导入包装细胞系 PA317, 检测培养上清病毒滴度。【结果】应用 PCR 技术成功地从 HBV 基因组中克隆出全长 HBx 基因, 并经序列分析证实; 建立了产病毒细胞株 PA317/HBx,检测其培养上清病毒滴度为 8.
闵 军, 刘彦文, 陈积圣
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Spatial transcriptome analysis of long non-coding RNAs reveals tissue specificity and functional roles in cancer. [PDF]
Xu K +10 more
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利用CD23cDNA全基因克隆pUCD976,分别以限制性内切酶EcoRI和XbaI酶切该重组质粒DNA,回收1.0kb的CD23cDNA全基因、HindⅢ酶切后回收3’端607bp的结合区段基因以及EcoRⅠ和HindⅡ酶切回收5’端403bp的调控区段基因。将各回收片段先以Klenow酶补平后,插入已补平的pZIP逆转录病毒载体BamHⅠ单切点,利用地高辛素标记的CD23cDNA全基因探针,以斑点核酸杂交筛选逆转录病毒重组体,结合用限制性内切酶BamHI和/或BglⅡ酶切鉴定插入方向,最终获得正 ...
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卵巢子宫内膜异位囊肿患者免疫调节细胞Th17/Treg 失衡的 临床研究
摘要:【目的】探讨卵巢子宫内膜异位囊肿患者体内是否存在Th17/Treg 失衡的现象。【方法】采用病例对照研究方 法,实验组为腹腔镜术后病理确诊的卵巢子宫内膜异位囊肿患者(40例),对照组为同期因单纯输卵管因素不孕行(宫)腹腔 镜联合诊治术患者(40例)。分别收集两组患者的外周血、腹腔液、在位及异位内膜组织。流式细胞术检测外周血中Th17 和Treg占CD4+T细胞比例;ELISA分别检测两组患者血清及腹腔液中Th17分泌的IL-17、IL-22和Treg分泌的IL-10、TGF-β 浓度;Q ...
杨娟 +5 more
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目的包装携带人T细胞转录因子T-bet基因的重组腺病毒,为研究T-bet在人鼻黏膜中作用的分子机制奠定基础。方法采用RT-PCR方法从健康人PBMC中扩增出转录因子T-bet的cDNA序列,构建重组穿梭载体pDC316-T-bet;采用阳离子脂质体介导将重组穿梭载体pDC316 T-bet与pBHGloxΔE1,3C re质粒共转染293细胞,包装出携带T-bet基因的重组腺病毒rAdT-bet,空斑纯化,PCR鉴定阳性rAdT-bet。结果以空斑纯化后的rAdT-bet为模板 ...
孙克巍 +4 more
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[Identification of Peripheral Blood GZMK + CD8 + T Cells As Biomarkers of Alzheimer's Disease Based on Single-Cell Transcriptome]. [PDF]
Duan T, Chu J, Hu F.
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【目的】探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子(CFTR)对内脏脂肪组织前脂肪细胞增殖和分化的调控作用。【方法】分别采用CFTR基因敲除小鼠(CFTRKO)4、8周龄及同周龄野生型对照鼠,分离内脏脂肪组织前脂肪细胞,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测增殖分化转录因子表达变化。采用地塞米松-异丁基甲基黄嘌呤-胰岛素(DMI)诱导3T3-L1细胞建立前脂肪细胞分化模型,采用免疫印迹(Western blot)技术检测CFTR及分化因子蛋白表达变化;并进一步转染CFTR沉默及过表达病毒,采用免疫印迹 ...
晋晨晨 +3 more
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随着近年来高通量测序技术的发展,其在生物学研究领域的应用也越来越广泛,并逐渐成为生物学研究的重要方法和工具。基于高通量测序的 RNA-seq技术为揭示野生动物转录组信息提供了更为准确、便捷的方法。本文论述了RNA-seq技术的发展历史和技术特点,并结合野生动物转录组研究中所面临的问题探讨了RNA-seq技术的具体应用和发展方向,以期为野生动物的研究提供方法指导。
肖 慧 吴 尽 赵敏蝶 丁 新 刘学东
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[Progress of scRNA-seq technology in nasopharyngeal carcinoma research]. [PDF]
Zheng B, Jin G.
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