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背景:人脂肪间充质干细胞在不同的条件下被成功诱导分化为成骨细胞、软骨细胞、骨骼肌细胞、肝脏细胞等中胚层细胞,同时也可以向其他胚层分化,证明脂肪间充质干细胞是多分化潜能干细胞。目的:探讨人脂肪间充质干细胞的分离、鉴定方法。方法:整形外科吸脂术获得腹部皮下脂肪,0.075%Ⅰ型胶原酶消化,贴壁培养获得人脂肪间充质干细胞,绘制细胞增殖曲线,进行流式细胞、细胞周期、免疫荧光等检测,并验证其是否具有多功能分化潜能。结果与结论:获得形态较均一的长梭形的人脂肪间充质干细胞,细胞增殖良好,有明显的指数生长期 ...
尹震宇 +5 more
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目的在人骨髓间充质干细胞内大量稳定的表达人白血病抑制因子(human Leukemia Inhibitory Factor,hLIF)。方法应用RT-PCR方法从人蜕膜组织中扩增出白血病抑制因子,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上。利用脂质体进行基因骨髓间充质干细胞的转染。利用G418进行基因的稳定表达筛选。通过RT-PCR和Western blot方法进行基因表达的检测。结果成功扩增出人白血病抑制因子基因,成功构建hLIF-pcDNA3.1真核表达载体。转染LIF-pcDNA3 ...
杨春辉, 杜珍武, 杨光, 尹维田
doaj
背景:当前分离培养骨髓间充质干细胞方法的有多种,但在外科手术中进行获取的方法仍然较少,而外科分离所得细胞对于相应疾病的具有揭示原因和提供研究线索的价值。目的:在骨科手术中以直接贴壁差速贴壁分离培养纯化与鉴定骨髓间充质干细胞。方法:在骨科关节置换等大手术中吸取少量人骨髓血,采用直接贴壁法分离骨髓间充质干细胞,在贴壁后36~48h行洗盘处理,并通过长期体外培养,特定培养基自身的筛选作用对细胞进行筛选,当细胞生长达到足量时进行鉴定。结果与结论 ...
夏春 +6 more
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目的探索加压运动对羊骨髓间充质干细胞增值、分化的影响。方法将60只波尔山羊随机分成实验组和对照组,实验组每周进行2次加压运动,对照组非加压下运动,6个月后获取羊骨髓,然后采用percoll密度梯度离心法分离并吸取上中层界面间以单个核细胞为主的白色云雾层进行培养,观察细胞形态和增殖速率;两组细胞均用5-氮杂胞苷诱导其定向分化为心肌样细胞,对诱导后的细胞进行免疫荧光检测细胞上心肌特异性抗原a-actin表达情况。结果从骨髓中分离出的白色云雾层中的细胞能贴壁、能传代且生长状态良好。此外,经过5 ...
杨玉辉 +5 more
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The Cytokines Secreted from Bone Marrow Mesenchymal Stem cell Attenuate Alloimmune Responses through the Mechanism of RAP1/ NF-κB signaling pathway [PDF]
目的:间充质干细胞因其拥有的免疫抑制能力和低抗原表达的特性使其在移植免疫领域拥有较强的研究和应用价值。NF-κB信号通路与间充质干细胞的免疫调节特性相关并且Rap1蛋白是NF-κB信号通路中的重要调控蛋白,因此Rap1基因敲除会对NF-κB信号通路的活化产生影响。我们通过Rap1基因敲除小鼠骨髓间充质干细胞与其同种同系野生型小鼠间充质干细胞的比较,研究Rap1/NF-κB信号通路在干细胞移植免疫排斥反应中的作用机制。 实验方法与结果 ...
丁越
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目的观察骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后血管内皮生长因子基因和蛋白表达的影响。方法以贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质千细胞。压迫法制作大鼠脊髓压迫损伤模型。假手术组仅咬除T8-10棘突和椎板,不损伤脊髓。模型制作后DMEM组、骨髓间充质干细胞组分别进行DMEM与骨髓间充质干细胞损伤区周围局部4点注射。结果假手术组脊髓组织中仅见微量血管内皮生长因子表达。骨髓间充质干细胞组在细胞移植后1,3,5 d,血管内皮生长因子mRNA表达趋势与DMEM组相同,但表达水平均明显高于相应时间点的DMEM ...
景元海 +9 more
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A novel biodegradable vancomycin-eluting nanofiber-loaded deproteinized bone scaffold for the treatment of infected bone defect [PDF]
目的:1.利用静电纺丝技术制备可局部缓释万古霉素的新型载万古霉素纳米纤维膜脱蛋白松质骨支架,验证抗生素缓释效果、抑菌效果以及细胞相容性。2.通过植入兔感染性骨缺损模型,观察载万古霉素纳米纤维膜脱蛋白松质骨支架对感染性骨缺损的修复效果。 方法:1.将万古霉素和聚乳酸乙醇酸溶解于六氟异丙醇配制电纺液,利用静电纺丝工艺纺出载万古霉素纳米纤维复合于牛脱蛋白松质骨支架表面。然后通过扫描电镜观察新型载万古霉素纳米纤维膜脱蛋白松质骨支架和牛脱蛋白松质骨支架的表面特征、高效液相色谱法检测新型抗生素缓释支架药物释放速率 ...
高建廷
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Preparation of a nano- and micro-fibrous decellularized scaffold seeded with autologous mesenchymal stem cells for inguinal hernia repair [PDF]
疝气,是人体组织或腹内脏器离开原来正常部位通过人体间隙、腹壁上的缺损或薄弱位置,转移到其他部位。目前,临床上主要通过外科手术和人工补片来修补疝气,每年大约有50万人接受疝修补手术。大部分腹股沟疝能通过人使用工合成补片达到修复目的。腹股沟疝无张力修补术中应用不可降解聚合物补片以增强腹股沟腹壁薄弱区,虽然显著降低了传统腹股沟疝手术的复发率,但不可降解补片易使患者出现慢性疼痛、补片感染和精索损伤等并发症。基于前期研究,我们以羊主动脉为原材料,通过物理或化学的方法有效去除细胞、活性蛋白成分 ...
张银龙
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目的检测胎牛血清白蛋白(Fetal bovine serum albumin,BSA)在脐带源间充质干细胞溶液的含量以代表异源蛋白在脐带源间充质干细胞溶液中的残留情况的适用性,并通过改进培养条件和增加清洗次数以进一步减少BSA等异源蛋白在脐带源间充质干细胞溶液内的残留。方法运用定量ELISA方法检测了脐带源间充质干细胞溶液中BSA的含量,并探讨改进培养方式与增加清洗次数等方法对干细胞溶液中残留的BSA含量的影响。结果对细胞清洗次数的增加能够有效减少BSA等异源蛋白的残留 ...
宛莹, 聂德志, 贲亮, 黄若洋
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Immunoloregulation of mesenchymal stem cell and induce immune tolerance on allo-islet graft [PDF]
目的:探讨骨髓间充质干细胞的免疫活性对T细胞的影响,和对共移植胰岛免疫耐受的促进作用。 实验方法:1、体外分离、培养、扩增、鉴定小鼠骨髓间充质干细胞,骨髓间充质干细胞分别刺激单向体淋巴细胞或混合双向淋巴细胞反应,观察淋巴细胞增殖情况。观察骨髓间充质干细胞经IFN-γ作用后,免疫分子表达与对调节性T细胞的影响。2、构建高效、稳定的小鼠胰岛分离纯化方法和胰岛移植模型。3、采用胰岛细胞移植的小鼠模型,将骨髓间充质干细胞与异种供体的胰岛细胞混合后共同移植。动物分为两组:A组:单纯胰岛细胞移植组;B组 ...
仲伦
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