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目的观察肝衰竭大鼠血清诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的作用,探讨大鼠骨髓间充质干细胞分离培养、体外扩增及其向肝细胞分化的体外培养条件和方法。方法从股骨胫骨分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,体外扩增培养、鉴定,并采用肝衰竭大鼠血清血清诱导培养,分别在诱导培养0、7、14、24、28天时留取细胞,观察细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标记物(AFP、Alb、CK-18)、用PAS进行糖原染色实验,以验证诱导分化结果。结果诱导后5天间充质干细胞表现为肝细胞样,随着诱导培养时间的延长 ...
孙庆国 +3 more
doaj
据2015年国际糖尿病联盟报道,全球已确诊的糖尿病患者约有4.15亿,而中国糖尿病患者已超过1亿[1],约占全球糖尿病患者的1/4,因而,严重威胁着我国人民的健康[2]。根据发病机制不同,糖尿病可分为1型、2型糖尿病以及妊娠期糖尿病。1型糖尿病是由于免疫系统攻击自身的胰岛β-细胞,导致其数量减少,致使胰岛素合成减少而引起的糖代谢紊乱性疾病[3];而中、晚期2型福建省自然科学基金项目 ...
张圣梅 +3 more
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骨髓间充质干细胞对慢性特发性血小板减少性紫癜患者T细胞T-bet和GATA-3表达的影响
目的探讨正常人骨髓间充质干细胞体外对慢性免疫性血小板减少症患者T细胞T-bet、GATA-3以及下游细胞因子IFN-Y和IL-4表达的影响。方法采用Ficoll分离和直接贴壁、传代培养扩增骨髓间充质干细胞,用Ficoll法和尼龙棉柱法获取慢性免疫性血小板减少症患者外周血的T淋巴细胞;以5×104个/孔的MSCs作为基底层细胞,经植物血凝素(PHA)刺激后,与正常人骨髓间充质细胞共培养4天,收集T淋巴细胞和培养上清,采用RTPCR法检测T细胞中T-bet和GATA mRNA的表达水平,用酶联免疫吸附法 ...
姜铧 +5 more
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Periostin confers multipotent stem cell-like properties to human mammary epithelial cells and breast cancer cells [PDF]
Periostin(POSTN)是一种细胞外基质蛋白,在很多恶性肿瘤组织中高表达,并与肿瘤侵袭转移密切相关。但是POSTN的促肿瘤转移能力与间充质干细胞的多能干细胞特性之间的关系并不清楚。我们研究发现POSTN能够赋予人乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞干细胞特性,并且具有间质样的特征。同时,POSTN在骨髓来源MSCs及其分化形成的脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞中高表达,并且人乳腺上皮细胞和乳腺癌细胞在过表达POSTN蛋白或经重组POSTN蛋白处理之后,能够像MSCs一样向多个方向进行分化。在动物体内试验中 ...
王晓伟
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目的观察不同龄小鼠骨髓间充质干细胞在体外分离、培养、扩增的过程,并对其生物学特性进行初步比较分析,为下一步实验提供依据。方法选取出生1周、8周、16周的健康昆明小鼠,分成新生、青年、成年三组,采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,进行细胞形态学和贴壁率观察,绘制生长曲线。结果各组细胞约在9-12天80%-90%长满培养瓶底,融合成单层,传代后的骨髓间充质干细胞形态更加单一,为排列更加有序的成纤维细胞样细胞。贴壁率的观察和生长曲线显示,在相同的培养条件下,新生小鼠细胞增殖最快,细胞可扩增能力最强 ...
杨光 +4 more
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目的将全长外源多药耐药基因转入间充质干细胞使其外源基因得以表达。方法从胎盘组织中分离培养间充质干细胞,构建携带全长外源多药耐药基因的逆转录病毒,将此逆转录病毒转染间充质干细胞,绿色荧光显微镜检测外源基因的表达,western blot检测MDR1基因表达产物。结果绿色荧光显微镜可观测到转染后间充质干细胞有绿色荧光蛋白的表达,western blot检测到全长多药耐药基因编码的p-糖蛋白的表达。结论mdr1逆转录病毒载体可有效转染人胎盘源MSC,转染的外源基因可充分表达。
王博蔚 +3 more
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Effect of bone marrow mesenchymal stem cells on nude mice xenograft tumor of renal cell carcinoma [PDF]
目的:研究骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSC)对A498肾癌裸鼠移植瘤的影响。方法:培养肾癌A498细胞和人MSC,用CM-Dil标记MSC并对标记后MSC细胞的活性和增殖能力进行比较,构建A498肾癌裸鼠皮下移植瘤模型,实验裸鼠共36只,当裸鼠移植瘤长径达0.5~0.8cm,将其随机分为2组:一组注射CM-Dil标记的MSC(MSC组),另一组注射生理盐水(NS对照组),其中,每组各有6只用于观察生存期。从接种肿瘤的第1天起,隔天观察裸鼠饮食、排便 ...
张振奇
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目的探讨胎鼠皮肤间充质干细胞的体外增殖特性。方法取昆明小鼠胎鼠皮肤体外培养胎鼠皮肤间充质干细胞,MTT法检测所培养细胞对表皮生长因子(EGF)、角朊细胞生长因子(KGF)和碱性或纤维细胞生长因子(bFGF)的反应,观察其在体外培养条件下的增殖与生长特征。结果胎鼠皮肤间充质干细胞具有很强的增殖活性,传代培养潜伏期为24-48 h,对数增殖期为3-5 d,然后进入平台期。经过15代连续培养的细胞其增殖能力未见明显改变。应用MTT法检测发现,培养的细胞对bFGF具有良好的反应性,并在1.0μg.L ...
杨婧 +4 more
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Studies of Differentiation of Mesenchymal Stem Cells into Hepatic Stellate Cells [PDF]
背景和目的 研究表明,肝星状细胞(HSCs)在激活后有极强的细胞免疫抑制功能,将自体的HSCs与同种异体胰岛细胞共同移植后,由于其有效的免疫抑制作用和分泌细胞外基质在被移植物外产生包膜的生物学特性,对胰岛移植细胞的长期存活具有重要的作用。因此,HSCs在保护胰岛细胞移植上有着极高的临床应用价值。但由于HSCs获取困难,从而阻碍了其在临床上的应用。骨髓间充质干细胞(BMSCs)具有取材容易、体外增殖能力强、可分化为不同类型成熟细胞并用于多种疾病治疗等特点,使我们找到了HSCs在临床应用上的途径。为证实假设,
张琼
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The fabrication of cell culture chip and Pilot study of Mesenchymal Stem Cells differentiation on-chip [PDF]
微全分析系统(MiniuatriezdTotalAnalysisSystems,简称μTAS)作为一门多学科交叉的研究领域,越来越受到重视,作为其中之一的微流控芯片,由于具有传统细胞培养无可比拟的优势,成为近年来快速发展的热门方向。 本论文初步建立了芯片的设计制作工艺和温度压力控制方法及进样技术。成功制作了玻璃-玻璃、玻璃-PDMS不同材料的芯片并测试了各种芯片的性能。制作成功的芯片对各种细胞有很好的保留作用,有利于细胞的固定和培养。作为芯片应用的初步研究,本文选择兔骨髓间充质干细胞作为研究对象 ...
李玲巧
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