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【目的】研究成人骨髓间质干细胞(MSC)基本生物学特性。【方法】采用Ficoll-Paque 淋巴细胞分离液分离成人 MSC , 体外扩增, 比较不同培养基和血清含量对MSC 生长的影响, 流式细胞仪检测MSC 表面抗原表达。【结果】成人骨髓间 质干细胞在体外扩增原代可获得(5 ~ 6)×105 个细胞, 15 代可获得(3~ 4)×1012个细胞, 随着传代次数的增加, 细胞的增殖能 力下降。L-DMEM 培养基有利于细胞的培养扩增。细胞流式细胞仪检测结果显示CD29、CD44 、CD59 ...
张丽蓉, 李 艳
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目的观察肝衰竭大鼠血清诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的作用,探讨大鼠骨髓间充质干细胞分离培养、体外扩增及其向肝细胞分化的体外培养条件和方法。方法从股骨胫骨分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,体外扩增培养、鉴定,并采用肝衰竭大鼠血清血清诱导培养,分别在诱导培养0、7、14、24、28天时留取细胞,观察细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标记物(AFP、Alb、CK-18)、用PAS进行糖原染色实验,以验证诱导分化结果。结果诱导后5天间充质干细胞表现为肝细胞样,随着诱导培养时间的延长 ...
孙庆国 +3 more
doaj
【目的】探讨5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)向心肌细胞分化的最佳条件和体外分化的过程。【方法】体外培养Sprague-Dawley(SD)大鼠的MSCs,传代至P3、P6或P12;用5-氮胞苷诱导,比较不同诱导浓度组、不同诱导时间组和不同体重动物组MSCs的分化率,观察诱导后细胞分化过程中形态学的变化,并且用cardiactroponinⅠ、desmin和α-sarcomeric actin抗体鉴定分化的心肌样细胞。【结果 ...
谢富康, 冯英, 张志
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IGF-1通过ERK-MNK信号通路诱导骨髓间充质干细胞VEGF表达的实验研究
目的探讨ERK-MNK信号通路是否参与IGF-1对骨髓间充质干细胞VEGF表达的诱导。方法免疫印迹方法检测IGF诱导的骨髓间充质干细胞内HIF-1α、p-MNK等信号蛋白的表达变化和VEGF表达的变化,给予MNK抑制剂CGP 57380和HIF-1α抑制剂YC-1后再检测含外源性IGF-1的骨髓质间充质细胞中VEGF的表达水平。结果外源性IGF诱导后,HIF-1α、p-MNK等相关信号蛋白表达上调,分别阻断MNK和HIF后,VEGF的表达趋于正常。结论 IGF-1通过调节ERK ...
刘柏含 +4 more
doaj
间充质干细胞具有多向分化功能,在体外培养时仍可保持其增殖和分化的能力,可以作为组织工程的一种较为理想的细胞来源。细胞与胞外环境之间以及细胞与细胞之间的相互作用对细胞增殖和分化具有重要影响。对干细胞的研究大多集中于生化因素的影响,而且一般是在静态的常规细胞培养容器中进行。在本研究中,尝试在骨髓间充质干细胞的培养过程中,施加不同的力学环境 ...
龙勉, 陶祖莱, 后晓南, 孙树津
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系统性红斑狼疮患者骨髓基质细胞对造血干(祖)细胞的作用 [PDF]
【目的】探讨系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓基质细胞上清液对造血干(祖)细胞的作用及其机制。【方法】半固体集落培养法观察28例活动期SLE骨髓基质细胞生长及其上清液对正常细胞、自身骨髓干/祖细胞的抑制作用;检测SLE其骨髓基质细胞上清液中TNF-α、IFN-γ的水平;RT-PCR法检测骨髓基质细胞IFN-γmR-NA的表达。【结果】①29%活动期SLE患者骨髓基质细胞的集落数较正常人明显减少 ...
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骨髓间充质干细胞对慢性特发性血小板减少性紫癜患者T细胞T-bet和GATA-3表达的影响
目的探讨正常人骨髓间充质干细胞体外对慢性免疫性血小板减少症患者T细胞T-bet、GATA-3以及下游细胞因子IFN-Y和IL-4表达的影响。方法采用Ficoll分离和直接贴壁、传代培养扩增骨髓间充质干细胞,用Ficoll法和尼龙棉柱法获取慢性免疫性血小板减少症患者外周血的T淋巴细胞;以5×104个/孔的MSCs作为基底层细胞,经植物血凝素(PHA)刺激后,与正常人骨髓间充质细胞共培养4天,收集T淋巴细胞和培养上清,采用RTPCR法检测T细胞中T-bet和GATA mRNA的表达水平,用酶联免疫吸附法 ...
姜铧 +5 more
doaj
目的观察不同龄小鼠骨髓间充质干细胞在体外分离、培养、扩增的过程,并对其生物学特性进行初步比较分析,为下一步实验提供依据。方法选取出生1周、8周、16周的健康昆明小鼠,分成新生、青年、成年三组,采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,进行细胞形态学和贴壁率观察,绘制生长曲线。结果各组细胞约在9-12天80%-90%长满培养瓶底,融合成单层,传代后的骨髓间充质干细胞形态更加单一,为排列更加有序的成纤维细胞样细胞。贴壁率的观察和生长曲线显示,在相同的培养条件下,新生小鼠细胞增殖最快,细胞可扩增能力最强 ...
杨光 +4 more
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研究用分阶段共培养法进行体外扩增的脐血造血干/祖细胞对NOD/SCID小鼠重建造血功能的作用,探讨新扩增技术体系对将来临床移植的可行性.分离脐血单个核细胞,分别用rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF组合(非共培养组合)和rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF+人骨髓间充质干细胞组合(共培养组合)进行脐血造血干/祖细胞的体外扩增,并对扩增细胞进行流式细胞术和细胞集落形成能力分析.在移植实验中,将经致死剂量射线照射后的NOD/SCID小鼠随机分为3组,每组10只.A组:每只移植8.5 ...
WANGJin-fu(王金福) +3 more
doaj +1 more source
目的利用微模式化基底研究基底几何微结构对骨髓间充质干细胞增殖、分化及迁移过程的影响。方法设计制作微模式化基底,用以控制细胞的铺展形态和面积。比较不同模式控制下大鼠骨髓间充质干细胞的增殖、分化和迁移数据。结果细胞铺展宽度狭小可抑制骨髓间充质干细胞的增殖,细胞铺展形状可以调节其向成骨细胞分化的进程,细胞铺展面积受限时迁移增强,其增殖迁移行为减弱与成骨细胞诱导因子地塞米松的作用有关。结论细胞铺展的几何形状和面积是骨髓间充质干细胞增殖 ...
龙勉, 李振涵, 孙树津
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