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目的 探讨小儿病毒感染与微卫星DNA的关系。方法 取经咽拭子病毒分离证实为呼吸道合胞病毒或腺病毒感染的患儿血提取DNA ,用聚合酶连反应对基因座D5S818进行扩增 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离DNA片段 ,成象系统分析D5S818基因片段长度多态性 ;并分析D5S818基因片段长度多态性与病毒感染临床表现的相关性。结果 发现病毒感染后D5S818基因座等位基因频率与正常对照组有明显差异 ,平均AGAT重复数 ,观察组较对照组略高 ,A GAT重复数
孙利炜 +6 more
doaj
从1~2cm人发干中提取基因组DNA,以募核苷酸ya、y4_为引物,经过聚合酶链反应,扩增Y染色体特异的片段(446bP)。根据有无该片段的存在来确定发干的性别。这种方法取材方便,灵敏度高、易于推广。本文还报道了科用本方法检测某案例中5根发干的性别,为侦破工作提供了线索。
doaj
【目的】对转基因植物表达质粒pROP1 中含SBR 基因P1 片段(184 ~ 1946 bp)进行序列测定和分析。【方法】从 E .coli DH5α中提取质粒pROP1, 用PCR 测序试剂盒和DNA 自动测序仪检测P1 片段的序列, 并与GenBank 上的变形链球菌 表面蛋白基因序列比较, 检测其准确性。【结果】测定了P1 片段5′端616 个碱基序列和3′端466 个碱基序列, 其准确性达 98 %。【结论】PCR 扩增的P1 片段5′端和3′端的DNA 序列与变形链球菌表面蛋白pac ...
蒋少云, 凌均
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目的探讨分析疑难ABO血型标本与其等位基因的检测,为临床遇到的疑难ABO血型标本提供可靠的血型鉴定方法。方法选取2013年8月到2014年8月期间在笔者就职医院各科室送检的临床病人血液样本9例,首先按照常规血型检测技术进行ABO血型血清学试验,确定ABO正反定型,再采用盐酸胍/蛋白酶K裂解提取法对ETDA抗凝处理后的静脉外周血进行DNA提取,再使用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对9例血样进行ABO血型基因分型检测。结果 9例临床病人血清学表型为:AxB 2例、AB亚1例、A亚B亚1例 ...
王莹
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目的调查北方汉族人群人类血小板抗原(HPA)的基因频率及分布规律。建立一支HPA-1a,-2a,-4a,-5a,-6a阴性及已知HPA抗原的献血者队伍。方法随机抽取172名长春地区固定无偿血小板捐献者静脉血3ml,枸橼酸钠抗凝;采用TIANGEN试剂盒提取DNA。基因定量仪测定DNA的浓度和纯度。采用PCR-SSP方法进行试验。最后进行统计学分析。结果各表现型的频率分别是:HPA-1aa 0.988,HPA-1ab 0.012,HPA-2aa 0.833,HPA-2ab 0.159,HPA-2bb 0 ...
于江虹, 杨帆, 焦立新, 刘铁梅
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从两例萄糖一6一磷酸脱氢酶变异型——台湾客家型[Gd(-)Taiwan-Hakka]患者基因组DNA中,回收经EcORⅠ完全酶解的3~5 kb片段,与载体λgt10插入重组,用SMR10单菌种系统制备包装提取物,对重组的λgt10进行体外包装,构建成两个基因组基因文库。用32P中标记的G6 PDcDNA成功地从文库中初选出12个阳性克隆,挑选其中4个阳性克隆再次杂交予以证实,提取其中2个克隆DNA,经限制酸酶切电泳及斑点杂交鉴定,分离到该变异型基因的插入片段,并将其克隆到M13 mP19噬菌体,完成Gd(
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pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体的构建及在C6细胞中的表达
目的构建pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体并在C6细胞中进行表达。方法从小鼠脑胶质细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA,设计引物,调取目的片段,与pcDNA3.1-flag载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB平板筛选菌落,提取质粒。重组质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经过酶切鉴定及测序后,阳离子脂质体法转染C6细胞并经免疫细胞化学染色及蛋白印迹检测重组体的表达。结果重构质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经限制性核酸内切酶EcoRⅠ ...
王海东 +5 more
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【目的】 建立一种比较稳定可靠的无创性获取胎儿遗传物质的方法65377;【方法】 从孕妇外周血血浆中提取胎儿游离DNA,以Y染色体上的SRY区域为靶序列进行扩增,扩增产物经DNA测序进行确认,由此来确定我们获得的胎儿DNA65377;【结果】 我们利用获取胎儿游离DNA的方法对16例孕妇进行检测,10例获得了成功,除1例未随访到结果之外,其他9例的随访结果和我们实验判断结果一致65377;【结论】 我们初步建立的这种获得胎儿游离DNA的方法具有可靠性 ...
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90年代初,由美国Affymetrix公司的Fodor博士提出并开始基因芯片技术的研究。至今,DNA芯片技术在医学各个 领域中已显示出巨大的发展潜力并取得一定成功,他以一次性检查上万个基因活动的优势相继在人类肿瘤疾病的研究、艾 滋病的研究、细菌感染患者的研究、遗传病的研究等临床医学各个领域中取得了巨大突破,并且成形的己用于临床诊断的 DNA芯片已在1997年后相继问世并投入商业化生产。此技术对患者的发病机制,临床诊断,患者的预后及监控患者在用药 方面的临床反应,制定患者的治疗方案中发挥了极大的作用 ...
侯化
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