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重组质粒二级结构对丙型肝炎病毒E2蛋白基因表达的影响 [PDF]
将含HCV/E2基因的重组质粒 pUC18/HCV -E2的BamHI酶切基因片段和NcoⅠ +HindⅢ酶切基因片段分别克隆到原核表达载体pRSETHis中 ,构建两株重组HCV/E2重组表达质粒 pRSET·C/E2和 pRSET·A/E2。在诱导表达中 pRSET·A/E2的外源基因获得了高效表达 ,而 pRSET·C ...
周旭, 夏宁邵, 李益民
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丙型病毒性肝炎(Hepatitis C)是由丙型肝炎病毒(Hepatitis C virus,HCV)感染引起的肝脏病毒性炎症性疾病,也被称为非甲非乙型肝炎。HCV感染以高度慢性化为特征,常引起肝脏慢性炎症性坏死,大部分感染者可出现肝纤维化,继而发展为肝硬化,甚至进一步发展为肝细胞癌[1]。据估计,全球有1.3-1.7亿人感染HCV,我国属于丙肝的中、高流行区,感染人数居各国之首,约0.3亿[2 ...
孟宪春 +4 more
doaj
【目的】构建丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白E2基因的重组原核表达质粒,并获得E2蛋白的高效表达。【方法】通过RT-PCR法从HCV RNA阳性的血清标本中扩增出HCVE2区基因595bp,PCR产物分别经BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切后连接到经同样酶切的原核表达载体PET22b(+)上,转化大肠杆菌DH5α菌株,获得阳性重组质粒PETB,阳性质粒转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Westemblot鉴定。【结果】成功地克隆了HCVE2区基因,构建了其原核表达质粒 ...
代志琰 +6 more
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从1989年克隆HCV病毒以来[1],目前全球约有1.8亿人感染HCV,其中,20%-30%发生肝硬化和肝衰竭,2%-5%发生肝细胞癌(HCC)[2]。我国约有1000万HCV感染者,相关HCC年死亡率为23.5/10万人。丙肝病毒(HCV)是造成慢性肝炎、肝硬化及肝癌的重要原因之一。对丙型肝炎治疗的研究不断进展 ...
白金锡, 白贞子, 郑艳
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Preparation of Hepatitis C Virus Linear Immunoblot Assay [PDF]
丙型肝炎病毒(HepatitisCvirus,HCV)是一种包膜RNA病毒,可引起急、慢性病毒性肝炎,并常导致慢性进行性肝病,肝硬化,甚至肝癌,目前尚没有丙肝疫苗面世。中国有近4千万HCV感染者,是HCV流行较严重的国家之一。 HCV主要经过血液传播,HCV已成为血筛的必检项目之一。酶联免疫吸附试验(HCVELISA)检测抗-HCV抗体是目前血筛的主要手段,发展至今,已具有很高的灵敏度和特异性,但对于一些检测为阳性值偏低的血液,容易误判而造成血液浪费,该类血一般需要使用免疫印迹或者核酸检测进行确证 ...
林劲
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【目的】确定丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5B 以及肝母细胞瘤株HepG2 胞浆提取物中的宿主蛋白与 HCV 负链RNA 3′末端的特异性结合作用。【方法】用蛋白-核酸紫外交联试验分别检测NS5B 以及HepG2 胞浆提取物中的宿 主蛋白与HCV 负链RNA 3′末端的结合作用, 用非同源RNA 和非同源蛋白作为竞争物分析这种结合的特异性。【结果】 NS5B 以及宿主细胞内一约45 ku 的蛋白质(简称P45)均可与HCV 负链RNA 3′末端特异性结合。【结论】NS5B 和P45 是 ...
王 巍 +4 more
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Efficacy of direct-acting antiviral agents combined regimens for hepatitis C virus with different genotypes in Dehong Prefecture, Yunnan Province from 2022 to 2024 [PDF]
ObjectiveTo investigate the therapeutic effects of direct-acting antiviral agents (DAAs) combined regimens for hepatitis C virus (HCV) patients in Dehong Prefecture, Yunnan Province from 2022 to 2024, to analyze the characteristics of treatment failure ...
CAO Yanfen +10 more
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丙型肝炎患者血清自身抗体和AST/ALT在诊断丙肝后肝硬化中的临床意义
丙型病毒性肝炎(HCV)是临床上常见的肝脏疾病,能引起肝脏的纤维化使肝脏发生肝硬化和癌变,导致患者的死亡,严重危害患者的生命健康[1]。目前研究认为,丙型肝炎病毒感染和患者的自身免疫机能有密切关系,丙型肝炎病毒感染可通过分子模拟现象引起自身反应性CD8+T细胞激活,诱导自身免疫[2]。天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)是临床上检测肝功能的常用指标,当肝细胞受损时可使细胞膜的通透性增加 ...
张洪美, 袁美莲
doaj
Genotyping of Hepatitis C Virus with Probes Melting Curve Analysis [PDF]
病毒基因型是丙型肝炎抗病毒治疗方案选择的重要依据,常见的分型方法有测序分析、反向线性杂交、实时荧光PCR等,不同的方法设计各有优势和不足,本文建立了一个荧光PCR结合熔解曲线分析的丙型肝炎病毒(HepatitisCvirus,HCV)分型体系,用以区分中国大陆较常见的HCV1a、1b、2a、3a、3b、6a亚型。实验方法如下:一、制备6个内含HCVRNA核心区核酸序列的病毒样颗粒(HCV假病毒),分别作为6个HCV亚型的替代物/阳性质控品;二、设计通用引物扩增出HCV基因组的核心区 ...
谢晓婷
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据世界卫生组织统计,全球丙型肝炎病毒(HCV)的感染率约为3%,估计约1.8亿人感染了HCV,每年新发丙型肝炎病例约3.5万例。丙型肝炎呈全球性流行,可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化,部分患者可发展为肝硬化甚至肝细胞癌(HCC ...
丁旭 +7 more
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