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【目的】 探讨慢性丙型肝炎(CHC)与糖尿病(DM)的关系及其相关因素?【方法】 对200例CHC并DM患者(CHC+DM组)与242例CHC不合并DM患者(CHC组)的谷丙转氨酶(ALT)?谷草转氨酶(AST)?γ-谷氨酰转肽酶(GGT)?总胆红素(TB)?空腹血糖?空腹胰岛素?血甘油三酯及血清丙型肝炎病毒(HCV)RNA等相关指标进行检测?分析,比较两组之间各指标的差异,并将CHC+DM组分为携带者?轻度?中度?重度及不同年龄段进行对照比较,探讨CHC易发生DM的相关因素?【结果】 ①CHC ...
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摘 要 以HCV NS3区单克隆抗体、LSAB法检测了116 例各类肝病肝组织(其中肝细胞癌52 例,肝炎 后肝硬化16 例,慢性肝炎40 例,体质性黄疸8 例)及6 份正常肝组织(作为对照)中HCV 抗原的表达状况,结 果表明, HCV 抗原在肝细胞癌、肝炎后肝硬化及慢性肝炎中检出率分别为13. 5% ( 7 /52)、12. 5% ( 2 /16)、10% ( 4 /40) ,而在体质性黄疸及正常肝组织中未检出HCV抗原。HCV抗原可见于癌细胞或癌周肝细胞的胞浆或胞 核中,实验结果支持HCV
张立伐 彭文伟 姚集鲁
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以台湾株丙型肝炎病毒的非结构区基因序列(HCV-T3)设计内外五条呈巢式排列的引物,结合AGPC核酸一步抽提法,寡聚核苷酸探针5′末端标记法和Southern电泳转移杂交法,建立简捷特异检测HCV-RNA的逆转录一多聚酶链反应(RT-PCR)技术。应用这一技术对121例非甲非乙型肝炎患者和45例抗HCV阳性的慢性乙型肝炎患者进行了血浆HCV-RNA检测,结果阳性率分别为66.1%(80/121)和66.7%(30/45)。本文对这一技术的方法学、HCV-RNA与抗HCV的关系 ...
doaj
【目的】构建包含丙型肝炎病毒(HCV)C 区、E2 区及NS3 区的嵌合重组载体。【方法】设计合成3 对寡核苷酸引 物, 用PCR 法从HCV 重组质粒pHCVc 、pBE2 和pGMXNS3-5 中特异扩增出编码HCV C 区、E2 区和NS3 区抗原的部分基因 片段(501、603 和900 bp), 分别用Hin dⅢ 、BamH Ⅰ 、EcoRⅠ 和Xho Ⅰ 酶切后, 逐个定向连接到质粒pcDNA3 中, 转化宿主菌 XL1-Blue , 分别用上述内切酶酶切及DNA 测序鉴定重组质粒。【
张海红 +5 more
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【目的】构建丙型肝炎病毒(HCV)包膜蛋白E2基因的重组原核表达质粒,并获得E2蛋白的高效表达。【方法】通过RT-PCR法从HCV RNA阳性的血清标本中扩增出HCVE2区基因595bp,PCR产物分别经BamHⅠ和Hind Ⅲ双酶切后连接到经同样酶切的原核表达载体PET22b(+)上,转化大肠杆菌DH5α菌株,获得阳性重组质粒PETB,阳性质粒转化BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物经SDS-PAGE和Westemblot鉴定。【结果】成功地克隆了HCVE2区基因,构建了其原核表达质粒 ...
代志琰 +6 more
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丙型肝炎病毒基因高变区(E1,E2/NS1)的分子克隆及基因型鉴定
对广东省一个患者血清中的丙型肝炎病毒(HCV)基因高变区进行分子克隆及基因型鉴定。采用微粒吸附法提取HCVRNA,随机引物逆转录后进行聚合酶链反应(PCR)。所用引物位于E1,E2/NS1区,扩增产物806bp,产物提纯后定向插入pBV220质粒载体,重组体转染DH5α菌株,筛选菌落经增殖后碱变性法提取质粒,再通过PCR及酶切法鉴定阳性克隆。我们还用酶切法对此株克隆的基因型作了初步鉴定,证明属于1组Ⅱ型。
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PCR 循环测序法检测 Kras 和 HCV 5′ 非 编 码 区 基 因 变 异
目的: 建立一种简单、快速、可靠的 DNA 序列分析方法,并利用此方法分析 K-ras基因和HCV 5′非编码区基因的变 异情况。方法: PCR 循环测序法是将 PCR 扩增与核酸序列分析相结合的一种研究方法。根据此技术原理,建立了以 PCR 扩增 引物为测序引物, 利用 Taq DNA 聚合酶、荧光标记的 2′ , 3′ -双脱氧核苷三磷酸( ddNTP)直接进行 PCR 扩增产物序列分析的方 法。应用该方法对人肺癌组织中的 K-ras癌基因和丙型肝炎病毒 5′ 非编码区(HCV 5′ -NTR ...
任秀容 欧文晖 李全贞 周新宇 何蕴韶
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目的探究慢性丙型肝炎患者经DAAs治疗后肾脏功能的变化。方法纳入自2017年1月至2021年12月于中山大学附属第三医院门诊就诊的经DAAs治疗的123例慢丙肝患者,分别收集治疗前、治疗期间、治疗结束后的血清肌酐值,通过MDRD公式估计eGFR,以评估患者完成直接抗病毒药物治疗后肾脏功能的变化。结果本研究纳入了123例患者,67.5%(n=83)为男性患者,平均年龄为(50±11)岁,中位随访时间为24周,26.8%(n=33)基线时存在肝硬化,10.6%(n=13)合并有糖尿病,11.4% (n=14)
李梦月, 李舣婷, 张英, 林潮双
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【目的】研究丙型肝炎病毒核心蛋白(HCV-C)对肝门部胆管癌细胞(QBC939)细胞凋亡及细胞周期的影响。【方法】将包含HCV-C基因的真核表达质粒pcDNAHCV-C和空载体,利用脂质体介导将其转染QBC939,经G418筛选获得稳定转染HCV-C的QBC939细胞(QBC939HCV-C+),RT-PCR和免疫荧光法检测HCV-C蛋白表达,MTT法检测QBC939HCV-C+细胞、空白质粒转染QBC939(QBC939pcDNA)细胞和未转染QBC939细胞生长增生率;流式细胞术(FACS ...
李志花
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采用低浓度2-巯基乙醇作为裂解剂,配合高热变性处理血清等标本中丙型肝炎病毒核酸(HCVRNA)模板,将裂解上清直接逆转录,使HCVRNA转变为cDNA,再行套式多聚酶链反应(PCR)扩增.58份抗-HCV阳性血清标本中,可检出32份(55.2%)HCVRNA,虽与常规的酸胍酚抽提方法所检出相当(即30份被检出HCVRNA阳性,51.7%),由于这种直接法省去了用酚及氯仿抽提和醇类沉淀等步骤,具有明显的实用价值。
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