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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 制备人TRAIL配体胞外区基因工程蛋白。方法 应用RT PCR技术从激活的人外周血淋巴细胞总RNA中扩增TRAIL配体胞外区cDNA ,克隆入PCR2 .1 载体 ,测序验证后用基因重组法构建了TRAIL配体胞外区和组氨酸盒的原核表达质粒pQE hTRAIL。将重组质粒转入大肠杆菌M15中表达 ,经 1mmol LIPTG在 37℃条件下诱导 4h ,亲和层析柱纯化。用SDS -PAGE电泳和Westernblot鉴定表达产物。结果 所表达融合蛋白为人TRAIL配体胞外区分子 ,分子量 30kD ...
路丽明 +8 more
doaj
Research advance in genetic diagnosis of monogenic inherited diseases [PDF]
, 2016 单基因遗传病(简称单基因病)种类、分型繁多,常规诊断难以确诊,而基因诊断技术在遗传病特别是单基因病的确诊、分型等方面都发挥着不可或缺的作用。近一、二十年来,基因诊断技术进展迅猛,各种检测方法层出不穷。本文重点围绕基因诊断技术的最新进展进行综述,以期对临床诊断和预防工作提供一些有益的启示。Monogenic diseases are caused by inheritance of single mutated gene, but the type of the diseases are ...
梁宇静, 郭东炜, 郭奕斌
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野生动物学报新型遗传标记微单倍型，凭借高稳定性、无“stutter”峰干扰、高多态性、短扩增片段和SNP位点需求量少等显著优势逐渐受到法医物证学、种群遗传学等领域研究人员的关注，并在亲缘关系分析与亲子鉴定方面得到较好应用。本文逐一综述了微单倍型的发展、命名规则与筛选标准等，回顾了微单倍型数据获取、分析与检测的研究进展，首次对微卫星、SNP和微单倍型3种遗传标记进行了全面比较，并介绍了微单倍型遗传标记在动物学领域的应用潜力及面临的挑战与机遇，期冀为相关研究提供参考。
谢大鑫, 许蔚, 沈富军, 张修月
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【目的】研制登革病毒E蛋白特异性单克隆抗体,鉴定其各种生物学特性。【方法】用纯化的Pichiapastoris酵母表达的DEN2重组E蛋白作为抗原,免疫Balb/c小鼠,采用传统的细胞融合、有限稀释法克隆化杂交瘤细胞,制备稳定分泌McAbs的细胞株。采用硫酸铵沉淀法纯化腹水中的McAbs,用ELISA、IFA、WesternBlot和空斑减数中和实验等鉴定McAbs的各种生物学活性。【结果】用ELISA、IFA检测证实5株杂交瘤细胞产生的McAbs与DEN2重组E蛋白和DEN全病毒均有较高的亲和力 ...
曾祥凤
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建人B型钠尿肽（Human B-type Natriurtic Peptide,BNP）原核表达载体并诱导其表达、纯化及鉴定。方法根据已报道的人BNP基因序列,采用RT-PCR技术从人心肌组织中获得B型钠尿肽cDNA序列。将所得的PCR产物插入克隆载体pGEM-T-easy中,得重组质粒,经酶切、PCR及测序鉴定正确后,将酶切目的片段插入原核表达载体pGEX-6P-1中并转化大肠杆菌E.coliBL21,通过IPTG诱导表达出带有GST-BNP的融合蛋白。经Glutathione ...
许淑芬 +5 more
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Development of Real-time PCR Genotyping [PDF]
, 2004 本论文围绕实时PCR基因分型的探针基因分型和引物基因分型两个关键技术展开了研究，研究工作主要包括新型荧光双链置换探针实时PCR基因分型技术的研究，以及新型硫代磷酸化修饰的引物结合高保真DNA聚合酶的等位基因特异扩增的基因分型技术的研究。 第一部分，提出了新型荧光双链置换探针实时PCR基因分型的新技术，以β-地中海贫血中国地区常见的5种突变为研究对象，建立了新型荧光双链置换探针实时PCR基因分型的检测体系，系统考察了新型荧光双链置换探针检测的灵敏度和特异性、以及影响探针灵敏度和特异性的关键因素 ...
程金平
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可溶性TAT PTD-Ngb融合蛋白的原核表达、鉴定与纯化及其对皮质神经元的跨膜转导
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】构建含蛋白转导域（protein transduction domain,PTD）与脑红蛋白（neuroglobin,Ngb）融合基因的表达质粒,原核表达可溶性TATPTD-Ngb,并鉴定、纯化,检测TATPTD-Ngb对皮质神经元的跨膜转导功能。【方法】提取SD大鼠脑组织总RNA,通过RT-PCR法构建编码TATPTD-Ngb的融合基因,克隆入pET28b原核表达载体,转化入大肠杆菌BL21（DE3）pLysS,诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE、Western-blot分析及可溶性鉴定 ...
周国钰 +6 more
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Analysis on Structure and Influence Factors for Residents’ Trust Based on the Perspective of Social Quality Theory — Based on the Investigation of Shenzhen [PDF]
, 2012 随着中国经济的迅速发展及社会的快速转型，信任缺失现象大量出现，而户籍制度的存在造成城市内部的社会分割，对信任造成了一定负面影响，信任问题已成为中国的重大社会问题。目前，国内外学者对信任问题研究较多，但更多关注的是信任本身，包括其概念、人际信任的构成及其影响机制等，且这些研究以对信任的现状做描述性分析为主，大多将被调查者的个体特征或社区等作为信任的影响因素进行分析，缺乏更多社会质量因素的深度解释。因此，本研究以社会质量理论为基础，通过量化研究对比分析了深圳市不同户籍居民的信任构成及其影响因素 ...
熊欢
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Genome-Wide Detection of Tissue-Specific Genes & Database Construction [PDF]
, 2010 组织特异表达基因（Tissue-SpecificGene）是指在某一种或少数几种组织或细胞中特异表达的基因。研究组织特异表达基因有助于我们更好地理解组织和基因的关系，有助于我们找到疾病的发病原因，同时有助于我们发现新的组织特异的药物靶点。 目前已出现不少研究组织特异表达基因的方法，包括传统的实验方法、高通量实验方法以及生物信息学方法。在使用生物信息学方法研究组织特异表达基因领域，虽然已经有了组织特异表达基因的数据库，例如GEO，ArrayExpress，TiGER，BODYMAP ...
肖生建
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Studies on complete mitochondrial genome and population genetics of Larimichthys polyactis (Bleeker 1877) [PDF]
, 2009 小黄鱼Larimichthyspolyactis（Bleeker1877）为广泛分布于渤海、黄海和东海的暖温性底层鱼类，是中、韩、日三国的重要的海洋渔业经济种类。由于过度捕捞和渔业生态环境污染，小黄鱼的资源受到严重破坏，种群结构趋向简单。本研究以渤海、黄海和东海的小黄鱼为研究对象，采用线粒体DNA（MitochondrialDNA，mtDNA）序列分析和微卫星DNA标记对其线粒体基因组全序列和群体遗传学进行了研究，阐明小黄鱼的起源与进化、系统地理格局、群体遗传结构和种群组成 ...
吴仁协
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