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Zhejiang Daxue xuebao. Lixue ban, 2005 探讨来自脐血的贴壁细胞的特征及其对脐血造血干/祖细胞体外扩增的支持作用.利用流式细胞术对脐血中培养出的贴壁细胞进行了鉴定，同时观察其形态学特征，并由此建立细胞饲养层；在饲养层基础上建立共培养体系，分别体外扩增单个核细胞和CD34+细胞，观察饲养层对体外扩增的影响，并检测扩增后细胞的GEMM-CFC形成潜能.结果表明，脐血贴壁细胞呈纤维状，其CD14阳性细胞仅3.8%，而CD13、CD166、CD29阳性细胞分别为51.8%、35.6%、16.5%；与仅用外源细胞因子的非共培养体系相比 ...
WANGLi-juan(王丽娟) +7 more
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Zhejiang Daxue xuebao. Lixue ban, 2005 研究用分阶段共培养法进行体外扩增的脐血造血干/祖细胞对NOD/SCID小鼠重建造血功能的作用，探讨新扩增技术体系对将来临床移植的可行性.分离脐血单个核细胞，分别用rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF组合（非共培养组合）和rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF+人骨髓间充质干细胞组合（共培养组合）进行脐血造血干/祖细胞的体外扩增，并对扩增细胞进行流式细胞术和细胞集落形成能力分析.在移植实验中，将经致死剂量射线照射后的NOD/SCID小鼠随机分为3组，每组10只.A组：每只移植8.5 ...
WANGJin-fu(王金福) +3 more
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Zhejiang Daxue xuebao. Lixue ban, 2003 脐带血造血干细胞的异体移植对高剂量化疗的患者恢复造血功能是一种有效的细胞学疗法.脐带血造血干细胞的体外扩增能提高有效植入的造血干/祖细胞的数量.将扩增10 d的造血干/祖细胞移植给高剂量化疗的成人患者,患者平均约在移植后的第26天(第15~45天)达到了嗜中性粒细胞的植入.为了加快有核细胞数量的扩增和嗜中性粒细胞的成熟,在以骨髓间充质干细胞为培养基质细胞层,采取阶段扩增方法培养单个核细胞和分选的CD34+细胞,并与无骨髓间充质干细胞的培养体系进行对照.从冻存的脐带血中分离的单个核细胞和CD34 ...
WANGJin-fu(王金福) +3 more
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含脐血MSCs 体系扩增后的脐血重建 NOD/SCID小鼠造血的研究
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【目的】探讨含人脐血(umbilical cord blood，UCB)来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)联合造血生长因子(hematopoietic growth factors，HGFs)体系扩增后的脐血造血细胞在NOD／SCID小鼠体内植入及重建小鼠造血的能力。【方法】①用含女性胎儿脐血MSCs(UCBMSCs)及HGFs组合的无血清扩增体系体外扩增男性新生儿UCB CD34~+细胞。②收获扩增第6天的UCB细胞，经尾静脉移植给亚致死量照射后的雌性NOD ...
周敦华 +8 more
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人体外周血CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞体外扩增的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2017 目的探讨人体外周血CD3+CD4-CD8-双阴性T细胞（DNT细胞）在体外进行分离和扩增的方法。方法取健康的成人外周血20ml,应用Rosettesep抗体吸附法去除CD4+T细胞和CD8+T细胞;再将DNT细胞放入anti-CD3mAb包被的培养板中,并加入rhIL-2、rhIL-4,共同培养,第10天和第14天计数细胞扩增倍数及记录扩增曲线;利用Easysep免疫磁珠法纯化,采用流式细胞仪检测其纯度。结果经分选、纯化后的DNT细胞,纯度可达94%以上;体外培养第10天和第14天 ...
王新梅, 王雪野, 韩梅, 肖中平
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表达降钙素基因相关肽的单纯疱疹病毒Ⅰ型扩增子载体免疫效果观察
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探讨重组pUPO-Δγ134.5-CGRP扩增子对免疫系统的作用。方法用重组扩增子感染BALB/C小鼠,分离血清及淋巴细胞,流式细胞仪法、免疫组化法、LDH法、分别检测外周血CD4、CD8分类、TCR、NK细胞、CTL细胞以及LAK细胞活性杀伤活性。结果重组扩增子明显增强了机体的免疫力。结论该重组扩增子具有增强机体免疫力的作用。
吴军 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的构建Tet-on调控的人HOXB4慢病毒载体,为体外扩增造血干细胞并保持其干细胞特性提供实验材料基础。方法应用PCR技术从质粒TAT-HA-HOXB4-Full中扩增编码人HOXB4的cDNA,用限制性内切酶EcoRI分别酶切HOXB4基因片段和带有Tet-on开关的可调控慢病毒载体,经T4DNA连接酶连接获得慢病毒载体Teto-Fuw-hHOXB4。对构建的HOXB4慢病毒载体进行酶切片段凝胶电泳及DNA测序分析。结果酶切片段电泳分析和DNA测序分析证明Tet ...
李秀英 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的建立一种分离纯化,培养扩增人骨髓MSCs的方法,并探讨体外诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。方法密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,分离纯化人骨髓间充质干细胞,并用马血清诱导分化为脂肪细胞。结果MSCs原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈梭形,细胞传代稳定,在体外连续传代培养9代,未发生形态学改变,无衰老征象;传代培养MSCs（P3）在20%马血清的L-DMEM培养液中分化为脂肪细胞。结论骨髓MSCs体外增殖和传代能力强,通过离体培养可使体内环境下低丰度的MSCs实现数量扩增 ...
王莹, 罗速
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的对孕中期羊水标本进行体外分离、培养、扩增,研究孕中期羊水来源干细胞（AFC）的生长特性、细胞表面标记。方法采用贴壁法体外分离孕中期羊水来源干细胞,绘制细胞生长曲线;流式细胞仪检测细胞表面标记。结果原代培养细胞生长潜伏期4-6d,对数增殖期7-13d,生长平台期14-18d;传代培养细胞生长潜伏期1-2d,对数增长期3-6d,生长平台期7-10d。AFCs均一表达CD44,不表达CD45。结论从人孕中期羊水中成功分离具有干细胞性质的细胞群,在体外可迅速扩增。
常颖 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2000 【目的】对Hela 细胞端粒酶进行活性重组并探讨其重组特异性。【方法】以RT-PCR 法从纯化的人端粒酶复合 体中扩增人类端粒酶RNA(hTR)基因片段, 将其克隆至含有SP6 启动子的pGEM3f +质粒中, 构建hTR 的体外转录体系以获 得体外合成的hTR。与端粒酶蛋白组分进行活性重组。四膜虫端粒酶RNA 及16S rRNA 作为重组反应对照组, 以探测其重 组特异性。【结果】经RT-PCR 扩增出450 bp 片段;体外转录重组载体经酶切图谱和PCR 扩增鉴定构建成功;体外转录的 ...
周俊宜, 罗超权
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