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【目的】获得可递呈抗低分化和未分化癌细胞单克隆抗体(BAC5 单抗)抗原表位的M13噬菌体克隆系。【方法】以 BAC5 单抗为靶抗体, 对由M13噬菌体构建的随机12 肽文库进行生物淘洗。用抗体竞争方法从阳性克隆中选出与BAC5 单抗结 合率较高的克隆系。通过ELISA 方法检测BAC5 单抗对上述克隆的选择性识别。【结果】经过3 轮淘洗, 获得的阳性克隆率为 77 %(35/ 45)。来自C2、C17 和C29 号克隆的噬菌体对外加BAC5 单抗的结合率分别为71.6 %、49.4 %和64.0%
肖锡宾 +5 more
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自从克隆羊“多莉”诞生之后,克隆一词便成为了传媒追逐的热点,那么究竟什么是克隆呢?克隆一词源于英文“clone”的中文译音,意为无性繁殖,即通过非有性的过程复制个体,不通过性细胞结合而繁殖的过程。植物的克隆现象很常见,植物块茎的自然繁殖、扦插、压条和嫁接都属于无性繁殖,均属于植物的克隆行为。动物克隆则不同 ...
孙忻, 王丽
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克隆浅释于永利作者单位:130021长春,白求恩医科大学免疫学教研室关于克隆羊的报道在全世界引起了轩然大波,一时间“克隆”成了一个十分风行的词。本文将从医学的角度对克隆做一简要的解释。克隆(clone)一词来源于希腊文(Klon),指从一个个体经无性...
于永利
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再生障碍性贫血儿童TCR Vβ亚家族T细胞克隆性增殖及其与HLA—DRB1*15的关系
【目的】探讨再生障碍性贫血(再障)儿童TCR Vβ24个亚家族T细胞克隆性及其与HLA—DRB1*15的关系。【方法】再障儿童17例(SAA14例,MAA3例),采用RT—PCR和基因扫描分析外周血或骨髓TCR Vβ24个亚家族基因的表达和克隆性,SSP—PCR检测HLA—DR。【结果】再障儿童外周血T细胞仅表达4—22个Vβ亚家族,而正常儿童外周血T细胞几乎表达所有Vβ亚家族。12例(包括初诊SAA4例,CR4例,复发1例和MAA3例)再障儿童存在不同程度T细胞克隆性增殖,但个体间差异较大 ...
黄永兰 +4 more
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目的: 制备从尖吻蝮蛇蛇毒中分离的纤溶因子的单克隆抗体, 为克隆基因提供特异性的探针。方法: 将纤溶因 子免疫 Balb/C 小鼠,取脾细胞与 SP 2/0 骨髓瘤细胞融合, 筛选稳定分泌抗体的细胞株。采用血纤维蛋白平板法,观察单克隆 抗体能否抑制纤溶因子的纤溶作用。结果: 获得 2 株稳定分泌单克隆抗体的细胞株。 Western 印迹显示该单克隆抗体能特异 地与纤溶因子结合,与其它蛋白无交叉反应, 此外,这 2株单克隆抗体具有抑制纤溶因子溶解人血纤维蛋白的作用。结论: 这 2 ...
邱鹏新 黎明涛 苏兴文 陈家树 颜光美
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目的制备针对超嗜热古菌组蛋白HPhA的单克隆抗体并进行鉴定。方法以重组纯化蛋白HPhA为抗原,用聚乙二醇(PEG)法制备杂交瘤细胞,ELISA检测杂交瘤细胞分泌抗体的效价和类型,Western blotting分析抗体的特异性。结果获得3株稳定分泌抗HPhA蛋白的单克隆抗体(MAb),3株单克隆抗体1A12、3C11、3B4分别属于IgG1、IgM和IgG2b亚类。ELISA和Western blotting结果显示,单克隆抗体3B4能特异性结合HPhA及PEA-HPhA重组蛋白 ...
张玲, 郑艳军, 朱平, 张国利
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【目的】扩增日本血吸虫26 ku 谷胱甘肽硫-转移酶(Sj26GST)基因片段, 构建其重组原核载体, 以研制SjGST 重 组克隆。【方法】根据已知基因序列设计一对引物, 运用RT-PCR 技术扩增Sj26GST 目的基因cDNA 片段, 将其克隆到pBluescript( KS)质粒中, 并经酶切、PCR 和测序鉴定。【结果】获得GS T-pBluescript(KS)重组克隆。【结论】本实验获得Sj26GST 重 组克隆, 为进一步研制基因工程蛋白疫苗作准备。
李 焱 +7 more
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目的构建人紧密连接蛋白claudin-6的cDNA真核表达载体。方法应用RT-PCR、T-A克隆、限制性内切酶切及亚克隆等技术将claudin-6基因全长克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结果酶切鉴定、PCR扩增以及序列分析表明已经将claudin-6基因全长序列克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)质粒中。结论获得了人claudin-6基因的全长cDNA片段,构建了claudin-6原核克隆载体和真核表达载体。实验中发现,中国人claudin-6基因的461位点碱基为A ...
吴琼 +7 more
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多发性骨髓瘤(MM)是一种浆细胞克隆增殖性的恶性疾病,其特点是骨髓中浆细胞克隆性增殖,抑制正常多克隆B淋巴细胞生长,并分泌大量异常单克隆免疫球蛋白(M蛋白),导致异常球蛋白增加,正常球蛋白合成减少[1]。临床表现常常为高球蛋白血症以及由于大量免疫球蛋白(M蛋白)分泌所引起的一系列临床表现。目前,临床主要通过血清蛋白电泳或免疫固定电泳来评估分析M蛋白[2],从而帮助确诊MM。血清蛋白电泳具有结果准确 ...
余胜, 郑磊, 张鹏
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目的制备纯化的抗人膀胱癌单克隆抗体BDI-1。方法给Balb/c小鼠腹腔注射BDI-1杂交瘤细胞,收集的腹水过Protein G-agaros亲和层析柱即得到人膀胱癌BDI-1单克隆抗体。采用ELISA法、间接免疫荧光法、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法和点印迹法鉴定单克隆抗体。结果每毫升腹水可以得到1-1.5mg的高效价(106)的纯化抗体。结论该方法可以扩增高效价的单克隆抗体.
潘雪娜 +3 more
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