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用cDMDs探针,从人X染色体噬菌体文库中筛选并作DNA印迹杂交鉴定出含有抗肌萎缩蛋白基因51号外显子的克隆。经限制酶切图谱分析,确定KpnⅠ和HindⅡ为亚克隆位点,从而获得了与抗肌萎缩蛋白基因51号外显子相连的50和51号内含子亚克隆,为该区段的核苷酸顺序分析打下了基础。
doaj
目的制备抗绿脓杆菌单克隆抗体,观察其对绿脓杆菌感染的烧伤小鼠及正常小鼠的保护作用。方法应用NS-1细胞和经绿脓杆菌免疫后的BALB/C小鼠脾细胞制备杂交瘤细胞株,收集其分泌的抗体,观察其对绿脓杆菌感染的Ⅲ°烧伤小鼠及正常小鼠的免疫保护作用。结果该单克隆抗体可预防绿脓杆菌感染。结论我们的研究结果为抗绿脓杆菌单克隆抗体在临床上应用的可行性提供了实验室基础。
温剑平 +3 more
doaj
Research on Mechanisms of Urinary Bladder Mesenchymal Stem Cells Promote Cell Growth and Migration of Urothelial Carcinoma Cells Line 5637 [PDF]
目的:初步研究膀胱间充质干细胞促进膀胱癌生长及迁移的机制。方法:1.体外分离、培养并鉴定膀胱间充质干细胞;2.在体外实验中,以WST-1测定膀胱间充质干细胞培养上清液对于膀胱癌细胞生长的影响,并以划痕实验测定膀胱间充质干细胞培养上清液对于膀胱癌细胞迁移能力的影响;3.在动物模型中测定膀胱间充质干细胞对于膀胱癌细胞生长和迁移能力的影响;4.以WESTERN-BLOT检测相关信号通路关键蛋白表达的变化以研究膀胱间充质干细胞促进膀胱癌生长及迁移的机制:结果:1.膀胱间充质干细胞表达CD105 ...
佟智超
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Applying TALEN and CRISPR/Cas9 Technique to Knock out the PD1 Gene in Human Primary T Lymphocytes [PDF]
过继性细胞免疫治疗(adoptivecellularimmunotherapy)是将患者自体免疫细胞在体外处理,然后筛选并大量扩增具有高度特异性的肿瘤杀伤性免疫效应细胞,再回输到患者体内杀灭肿瘤的一种治疗方法,过继性T细胞治疗是一种很有前景的癌症治疗方法。体内T细胞在进行免疫应答时,T细胞活化需要双重信号的协同作用,分别是抗原呈递信号和协同刺激信号。协同刺激分子通过为淋巴细胞提供正性或负性的调控信号参与机体的免疫调控。肿瘤细胞会利用体内免疫调节过程,表达或分泌的一些分子,对T细胞进行负向调控 ...
李剑
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摘 要:【目的】 利用Brugada综合征患者尿液细胞构建诱导性多能干细胞系(iPSC)?【方法】 通过携带有OCT4?SOX2?KLF4和C-MYC四个转录因子的逆转录病毒感染人尿液细胞,将其诱导成人胚胎干细胞(ESC)样的克隆?根据人胚胎干细胞的特性对获得的克隆进行以下鉴定:克隆形态?碱性磷酸酶(AP)活性?多能性基因的表达?核型及体内外分化能力等?【结果】诱导获得的iPSC克隆在细胞形态?多能性基因的表达与人胚胎干细胞相似?此外iPSC克隆体外悬浮培养形成拟胚体(EB) 并能够分化成3个胚层 ...
doaj
深圳市妇女宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16型E6、E7致癌基因的序列分析
目的检测深圳市宫颈癌患者癌组织中HPV16型E6、E7致癌基因的序列。方法采用PCR技术扩增1例在深圳生活17年宫颈癌HPV16型阳性患者组织中HPV16E6、E7基因,对其进行克隆、构建重组质粒并进行核酸限制性内切酶鉴定及DNA测序分析。结果成功地克隆了HPV16E6、E7基因,测序分析表明克隆的HPV16E6、E7基因与GenBank收录的德国标准株相比完全一致。结论深圳市妇女宫颈癌组织中HPV16型E6、E7致癌基因的序列与德国标准株相同。
关嵩青, 林莉, 叶菲
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Serological and Molecular Characterizations of Hepatitis B Virus Infection among Tibetan Population in Tibet Nyingchi of China [PDF]
背景:乙型肝炎病毒(HepatitisBvirus,HBV)感染可以引起肝脏损害,并可以持续慢性感染,HBV长期慢性感染会造成肝硬化、原发性肝癌等失代偿性终末期肝病,从而导致死亡,是我国乃至全球最重要的公共卫生问题之一。西藏自治区地处我国西北部,早期研究认为其属于HBV高流行地区,但目前对该地区HBV流行病学以及分子特征研究较少。为了解西藏自治区慢性乙型肝炎等重要传染病的流行情况和HBV的分子流行病学现状及特征,本研究于2012年通过血清流行病学调查 ...
方琳琳
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固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)对小鼠Ⅰ型葡萄糖载体(mGLUT1)的表达调节
目的探讨SREBP1c对mGLUT1表达的影响。方法采用分子克隆技术,将SREBP1c和mGLUT1cDNA分别克隆到表达载体pSVsport和pGL3b上。SREBP1c与mGLUT1克隆载体同时或单独转染NIH3T3细胞,然后应用荧光素酶活性测定法、RTPCR及Northernblot等方法测定SREBP1c对mGLUT1的启动子活性调节及mRNA表达的影响。结果实验结果表明,SREBP1c可激活mGLUT1启动子的活性,并且可增加内源性mGLUT1的mRNA表达水平 ...
李天洙 +6 more
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【目的】研究大鼠急性局灶性脑缺血时缺血组织与非缺血组织中基因表达的差异,克隆出与脑缺血相关的基因。【方法】应用荧光差异显示PCR(FDDPCR)从同一例大鼠大脑皮层缺血组织和非缺血组织中筛选出有表达差异的基因片段,经反向Northernblot杂交,将杂交阳性的片段且经RT-PCR反复验证,选取差异明显的片段进行克隆测序;经生物信息学分析处理,选取同源性低的EST片段R6,利用cDNA5’端快速扩增PCR(5’RACE法)进行基因全长的克隆。【结果】利用5’RACE法成功地克隆EST片段R6至编码区 ...
臧林泉
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【目的】构建人瘦素基因 cDNA 克隆, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚合酶链反应扩增人瘦素基因 cDNA , 获得片段( 640 bp)连接至 pUC19 载体, 并转化大肠杆菌 DH5α。以末端终止法进行序列测定。【结果】所克隆的人瘦素 cDNA 含全长的人瘦素基因编码区,仅 287 位的腺苷酸被鸟苷酸代替, 导致 96 位编码谷氨酰胺的密码子 CAA 改变为编码精氨酸的 CGA, 其意义尚待阐明。【结论】以逆转录聚合酶链反应方法成功地构建了人瘦素基因 cDNA 克隆。
徐明彤, 钟光恕, 傅祖植
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