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目的探究自合成铕螯合剂对甲胎蛋白单克隆抗体的标记方法。方法经EDC和NHS活化的铕螯合剂偶联甲胎蛋白单克隆抗体,通过透析收集标记抗体,检测荧光强度和免疫活性,计算回收率和标记率。结果标记抗体荧光强度高,免疫活性无明显变化,回收率为94%,标记率为15。结论自合成的铕螯合剂可用于甲胎蛋白单克隆抗体的标记,标记效果理想,可进一步建立均相时间分辨荧光免疫分析方法。
孙延文 +5 more
doaj
【目的】研究大鼠急性局灶性脑缺血时缺血组织与非缺血组织中基因表达的差异,克隆出与脑缺血相关的基因。【方法】应用荧光差异显示PCR(FDDPCR)从同一例大鼠大脑皮层缺血组织和非缺血组织中筛选出有表达差异的基因片段,经反向Northernblot杂交,将杂交阳性的片段且经RT-PCR反复验证,选取差异明显的片段进行克隆测序;经生物信息学分析处理,选取同源性低的EST片段R6,利用cDNA5’端快速扩增PCR(5’RACE法)进行基因全长的克隆。【结果】利用5’RACE法成功地克隆EST片段R6至编码区 ...
臧林泉
doaj
目的构建人白细胞介素-15(interleukin 15,IL-15)原核表达克隆并在大肠杆菌中表达。方法从经脂多糖刺激的外周血单核细胞中提出mRNA,RT-PCR扩增出IL-15成熟肽前体蛋白基因,构建原核表达克隆(PGEX-4T-2/IL-15)。IPTG诱导表达目的蛋白,SDS-PAGE电泳分析蛋白图谱。Western blot鉴定表达蛋白。结果经酶切和测序分析,表明成功构建了pGEX-4T-2/IL-15原核表达克隆;经IPTG诱导,转化的大肠杆菌表达出相对分子质量(Mr)为42 ...
董学东, 朱元祺, 姜岩
doaj
目的获得与人前列腺癌细胞系PC3M细胞特异结合的短肽,作为人前列腺癌靶向治疗的先导化合物。方法以PC3M细胞为靶细胞,正常人前列腺细胞为吸附细胞对噬菌体7肽库进行差减筛选,用细胞ELISA、免疫荧光细胞化学染色鉴定阳性噬菌体克隆并测序。结果经三轮筛选,从随机挑选的10个噬菌体克隆中得到8个能特异性与PC3M细胞结合,而不与正常人前列腺细胞结合的阳性克隆。其氨基酸序列有一定同源性。结论得到多个序列不同的特异性结合PC3M细胞的噬菌体克隆。本实验获得的短肽具有一定的肿瘤亲合力和特异性 ...
夏阳 +4 more
doaj
[Prokaryotic expression of a recombinant protein of adeno-associated virus capsid conserved regions and preparation of its polyclonal antibody]. [PDF]
Li S +8 more
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[Indolent γδT-cell clone in Felty syndrome: a case report and literature review]. [PDF]
Wang C, Fu MW, An G, Huang WY, Yang LJ.
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【目的】 FAM3A (family with sequence similarity 3, member A)为新近发现的细胞因子FAM3的家族成员之一,本研究检测FAM3A的相互作用蛋白? 【方法】 克隆FAM3A并连接到pGB载体,转化酵母Y190宿主菌,加入含主要信号传导细胞因子人cDNA文库,按标准程序进行酵母双杂交,以X-Gal显色评估活性?提取扩增阳性克隆,连接pACT2载体,测序?检索基因库确定阳性克隆基因?克隆阳性基因并与FAM3A质粒共转染酵母进一步确定相互作用?
doaj
[The state of the art: diagnosis and therapeutic interventions of clonal hematopoiesis of indeterminate potential and clonal cytopenias of undetermined significance]. [PDF]
Xiao ZJ.
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[IgM- κ and IgM- λ biclonal POEMS syndrome combined with essential thrombocythemia: a case report]. [PDF]
Wang J, Wu F, Zhai ZM.
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[High-throughput sequencing in identifying somatic hypermutation in immunoglobulin heavy chain variable regions with complex clonal backgrounds]. [PDF]
Gao MG +5 more
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