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目的制备抗载脂蛋白apoB鸡卵黄抗体(IgY),并观察鸡蛋黄中抗体的产量、纯度及稳定性。方法用载脂蛋白apoB免疫本地良种产蛋鸡,通过水溶法提取蛋黄中抗体IgY,Bradford法测定抗体含量,SDS-PAGE电泳检测抗体纯度,Western blot免疫印迹法测定抗体的特异性,ELISA检测热处理后的抗体活性。结果经提纯的抗体含量为7.5 mg/ml,抗体纯度达到90%,Western blot免疫印迹法证明该抗体具有高度的特异性,70℃以下稳定性良好 ...
尤昕 +5 more
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目的建立检测抗环瓜氨酸肽(CCP)抗体的斑点免疫印迹试验,探讨其在类风湿关节炎(RA)疾病诊断中的价值。方法通过方阵滴定法选择斑点免疫印迹试验检测抗CCP抗体的最佳实验条件,并用该法检测RA、其他疾病及健康人血清,同时与自行建立的ELISA法及欧蒙试剂抗CCP抗体检测结果作对比分析。结果斑点免疫印迹试验检测抗CCP抗体对RA的诊断敏感性为52%,特异性为94%,并具有较好的方法学稳定性和特异性。在48例被诊断为RA患者中有25例抗CCP抗体阳性,显著高于其他疾病组和正常对照组 ...
虞伟 +5 more
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ANA、抗ENA抗体法联合检测214例自身免疫性疾病的结果分析
自身免疫性疾病(autoimmune diseases,AID)患者的血清中存在多种特异性或相关性自身抗体[1],本试验采用间接免疫荧光法(IIF)和免疫印迹法(IBT)对AID患者血清中的抗核抗体(ANA)和抗ENA多肽抗体谱进行检测,结果报道如下 ...
吴风
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目的本研究探讨P-15肽能否有效激活、促进软骨细胞向增殖分化。方法在不同的培养基培养鼠间充质干细胞(mesenchymal20stem20cells,MSCs),培养细胞采用阿辛蓝染色和碱性磷酸酶染色,并行碱性磷酸酶定量;免疫组织化学及蛋白免疫印迹检测软骨形成特异性标记。结果20(1)与对照组相比,P-15肽组呈现大量的碱性磷酸酶阳性细胞,蛋白聚糖的合成明显增加;(2)免疫组织化学检测提示P-15肽组collagen20X(COLX)、Runt ...
张郡 +7 more
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目的探讨HSPD1蛋白在肾癌及癌旁正常肾皮质组织的表达及其意义。方法应用二维色谱-质谱联用技术分析18例肾癌患者肿瘤标本,筛选出肾癌组织及癌旁正常肾皮质组织差异表达的HSPD1蛋白,并用免疫印迹验证其准确性。结果质谱鉴定后显示,HSPD1蛋白在肾癌组织中的表达水平低于癌旁正常肾皮质组织,免疫印迹证实其准确性。结论低表达的HSPD1可能与肾癌的发生发展有关。
印璞 +5 more
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抗核抗体(antinuclear antibody,ANA)是以是非特异性自身抗体的总称,分布于人体的各种体液中,如血清、组织液、尿液、胸水等[1],用于自身免疫性疾病的诊断、鉴别、疗效的评价、预后等环节有十余年,自身免疫性疾病是一种病理性的免疫应答,表现为自身组织器官等功能障碍[2]。对于ANA的检测,有条带酶联免疫分析法、免疫扩散、免疫印迹法、悬浮微阵列及抗原芯片多种方法[3,4 ...
易萍
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目的研究CSRP1(cysteine and glycine rich protein 1)蛋白在大肠癌组织中的表达情况,并探究其临床意义。方法 CSRP1蛋白的差异表达情况应用色谱及质谱联用技术分析筛选,初筛实验的准确性验证选用免疫印迹试验。结果分析质谱鉴定相关结果显示,CSRP1蛋白在大肠癌组织中的表达明显低于其在正常组织中的表达,免疫印迹试验结果与质谱分析结果吻合,确保了其准确性。结论 CSRP1蛋白在大肠癌组织中下调表达,其表达情况与肿瘤的发展、调节有密切的关系。
石宇 +4 more
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目的 构建人VEGF16 5腺病毒表达载体 ,探讨应用血管内皮生长因子 (VEGF)基因治疗脑梗死的可行性。方法 采用分子克隆技术 ,以质粒hVEGF16 5·SR为模板 ,扩增hVEGF16 5成熟cDNA。经穿梭质粒PShuttle克隆到腺病毒质粒上 ,构成Adeno VEGF16 5腺病毒重组质粒 ,经酶切及测序鉴定正确后 ,包装成为重组Adeno VEGF16 5腺病毒 ,并进行电镜观察及滴度测定。用免疫印迹及免疫组化方法检测VEGF蛋白的表达。结果 ...
张海鸥, 吴军, 林凯华, 易黎
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结直肠癌是全球第三常见的癌症类型,其相关死亡率在全球癌症排行第二[1]。结直肠癌的发病机制多种多样,患者的个人生活饮食习惯,家族相关病史等都可以作为患者发病的危险因素。因此,本实验通过二维液相色谱质谱联用技术,免疫印迹以及免疫组织化学技术来探究NUP107在结直肠癌和癌旁组织中的表达和意义,从而进一步为结直肠癌诊断提供新的方法和方向。
黄佳茹 +4 more
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【目的】研制抗人BLyS 单克隆抗体, 以进一步探讨人BLyS 与自身免疫性疾病的关系。【方法】将人BLy S 基因 克隆到融合蛋白原核表达载体pGEX-4T-1 中, 构建重组质粒pGEX-4T-1/hBLyS , 用此重组质粒转化大肠杆菌BL21, 加IPTG 诱导大肠杆菌表达GST-hBLy S 融合蛋白, 用此融合蛋白免疫BALB/c 鼠, 取鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合, 用ELISA 法筛选阳 性克隆, 用免疫印迹和流式细胞仪进一步鉴定抗体的特异性。【结果】重组质粒双酶切结果和DNA ...
张志方
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