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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2005 【目的】为探索XIAP 相关因子1( Xaf1) 调节肿瘤细胞凋亡的机制, 利用基因开关调节系统( Teton) , 拟建立由doxycycline 调控表达的Xaf1 诱导细胞株。【方法】将pTREHA-Xaf1 和pWZL-Hyg 质粒用基因 转染技术转入稳定表达rtTA 的Saos-2 细胞中。经过hygromycin 的抗性筛选, 挑出并扩增表达Xaf1 的细胞株。 在8 例实验组中加入doxycycline, 和不加doxycycline 的8 例对照组比较, 重复3 ...
夏焱 +6 more
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脂代谢相关基因ABHD5在泛癌中的表达模式及其与预后和免疫浸润的相关性分析
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2022 目的探究脂代谢相关基因ABHD5在肿瘤中的表达水平及其与临床分期、预后、免疫浸润的关系。方法在本研究中，使用GTEx、TCGA、TIMER2.0、CPTAC数据库及免疫组织化学法、免疫印迹法探究ABHD5在泛癌中的表达模式及其与不同临床分期的相关性，使用Kaplan-Meier Plotter、Oncolnc、R2数据库探究ABHD5与预后的相关性，并使用TCGA、TIMER2.0数据库探究ABHD5与免疫细胞浸润之间的相关性，再用STRING、GEPIA数据库获取肿瘤中与ABHD5结合或共表达的基因 ...
陈宇涛 +7 more
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激活素受体相互作用蛋白ARIPzip真核表达载体的构建及表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建激活素受体相互作用蛋白（activin receptor interacting protein zip,ARIPzip）真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从小鼠成纤维细胞3T3中提取RNA,并利用ARIPzip特异性引物通过RT-PCR方法扩增了ARIPzip cDNA,并克隆入pcDNA-Flag载体中,构建重组载体pcDNA-F-ARIPzip。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测ARIPzip的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功 ...
裴颖 +7 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的探讨cyclin/DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白质印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白表达的可行性、科学性和优越性,为肿瘤的细胞周期分析提供科学有效的技术支持。方法运用cyclin/DNA双参数流式细胞术及流式细胞术分选后的免疫沉淀蛋白印迹技术和共聚焦显微镜技术检测临床实体瘤细胞周期蛋白的表达,并与传统的免疫组织化学切片法进行比较。结果流式细胞术可以准确地对细胞周期蛋白在临床实体瘤中的表达进行定性、定量、定位的分析 ...
何小军 +9 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的构建核转录因子κB抑制蛋白激酶（inhibitor of kappa B kinase,IKK）β真核表达载体,以便进一步探讨其生物学作用。方法从人正常肝细胞L02中提取RNA,并利用IKKβ特异性引物通过RT-PCR方法扩增了IKKβcD-NA,并克隆入pcDNA3载体中,构建重组载体pcDNA3-IKKβ。将重组载体转染入HEK293细胞中,并通过免疫印迹方法检测IKKβ的表达。结果酶切及测序结果显示,重组质粒构建成功;免疫印迹结果显示 ...
张冬梅 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的用人工合成的内切磷硫酰寡脱氧核糖核苷酸（ODN-PSs）对星形胶质细胞进行体外干预培养,分析硫酸软骨素蛋白聚糖表达,探讨ODN-PSs与神经损伤修复的关系。方法采用星形胶质细胞体外诱导培养技术,制备得到ODN-PSs条件培养的细胞;利用斑点杂交、免疫印迹和RT-PCR方法对细胞表达的硫酸软骨素蛋白聚糖和木糖基转移酶-1（XT-1）mRNA进行分析。结果制备的星形胶质细胞采用抗GFAP抗体进行免疫细胞化学染色法进行鉴定,纯度在95%以上;条件培养星形胶质细胞的免疫印迹和RT-PCR分析结果表明,XT ...
沈哲, 刘永茂, 杨有赓
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野生动物学报, 2016 研究贵州省遵义地区野生蝙蝠脑组织中BDV自然感染情况。方法:采用蛋白免疫印迹检测贵州省遵义地区82只野生蝙蝠脑组织中BDV磷蛋白表达情况。结果:82只蝙蝠脑组织中BDV磷蛋白阳性9例(11%)。结论:贵州省遵义地区蝙蝠存在BDV自然感染。
杨利玲 雷以会 徐 平
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pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体的构建及在C6细胞中的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建pcDNA3.1-flag-pygo2真核表达载体并在C6细胞中进行表达。方法从小鼠脑胶质细胞中提取总RNA,RT-PCR法反转录合成c DNA,设计引物,调取目的片段,与pcDNA3.1-flag载体连接后转化大肠杆菌DH5α,LB平板筛选菌落,提取质粒。重组质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经过酶切鉴定及测序后,阳离子脂质体法转染C6细胞并经免疫细胞化学染色及蛋白印迹检测重组体的表达。结果重构质粒pcDNA 3.1-flag-pygo2经限制性核酸内切酶EcoRⅠ ...
王海东 +5 more
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M2抗体重组人源靶抗原二联体在原发性胆汁性肝硬化患者中的检测及应用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的利用重组抗原BCOADA-E2和PDC-E2的二联体（BP）,检测PBC患者血清中的M2抗体并探讨其临床意义。方法经Ni-NTA亲和柱纯化重组表达的BP融合蛋白,分别建立免疫印迹法（IBT）和酶链免疫吸附（ELISA）法检测60份PBC患者血清,以60份其他肝病患者6、0份自身免疫病患者8、0例正常人血清为对照组。结果经常规试剂盒检测为M2（+）的60份患者血清,利用重组抗原检测阳性53例,阴性7例,阳性率为88.3%;经常规试剂盒检测为M2（-）的60份自身免疫病患者血清 ...
陈燕 +10 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 1999 目的针对ＤＭＤ基因的突变特点以及由此而产生的编码产物的异常，探讨ＤＭＤ基因及其编码产物──抗肌营养个良蛋白的检测对于诊断疾病的意义。方法用多重ＰＣＲ技术和免疫印迹技术对ＤＭＤ或ＢＭＤ患者的ＤＭＤ基因和抗肌营养不良蛋白进行了检测。结果３３．３％的ＤＭＤ患者虽然未被检测出基因的片段性缺失，但他们的抗肌营养不良蛋白却完全丧失。结论多重ＰＣＲ技术是检测ＤＭＤ基因片段性缺失的有效方法，但却无法检测出点突变等微小突变。兔疫印迹技术能反映由于各种类型的基因突变所造成的编码产物的缺陷，更有利于ＤＭＤ和ＢＭＤ的确实诊断 ...
樊绮诗 +7 more
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