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目的通过对系统性硬皮病(SSc)患者抗核抗体谱(ANAs)检测结果的分析,探讨这些抗核抗体(ANA)对系统性硬皮病的诊断价值。方法分别采用间接免疫荧光法(IIF)和免疫印迹法(IB)对62例SSc患者和20例健康对照者血清中15种抗核抗体进行测定。结果IIF检测ANA结果显示,SSc患者中ANA的阳性率为98.4%(61/62),其荧光染色模型主要为均质核仁型;IB检测15种ANA结果显示,SSc患者中的ANA以抗Scl-70抗体、抗SS-A抗体和抗Ro-52抗体为主,在46例弥漫性硬皮病(dSSc ...
韩建华 +4 more
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目的 建立人血浆因子V(FV)蛋白免疫印迹分析,对遗传性FV缺乏症家系成员血浆FV含量进行分析。方法 以33%饱和硫酸铰从多克隆兔抗人FV抗血清中纯化IgG,待测血浆行4%~12%梯度的SDS-PAGE,继之电转印至硝酸纤维膜上。结果 在330 kD附近,正常人混合血浆呈现一明显的条带,患者母亲对应条带的显色强度明显弱于正常对照,而患者则完全缺如,且未能检出其他较小的FV片段产物。结论 我们建立的人血浆FV蛋白免疫印迹分析法对于遗传性FV缺乏症的辅助诊断及分型具有重要作用。该家系属于I型遗传性FV缺乏。
谢飞, 兰风华, 朱忠勇
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摘 要: 【目的】 研究Robo蛋白在人膀胱移形上皮癌细胞(T24)中的表达及沉默Robo基因对T24细胞增殖的影响?【方法】 实验分为两组,对照组(不转染载体)和转染组(转染复合载体),每组20例?对照组体外培养T24细胞,用免疫组织化学?免疫荧光和蛋白质印迹检测是否有Robo蛋白的表达及其表达亚型;转染组利用RNA干扰技术,寻找表达基因的沉默位点,构建合理的表达载体,转染T24细胞,免疫荧光化学观察细胞转染结果,蛋白质印迹来检测该表达基因沉默后蛋白表达的变化,MTT检测该表达基因沉默后细胞存活率变化?
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目的 建立人血浆因子V(FV)蛋白免疫印迹分析,对遗传性FV缺乏症家系成员血浆FV含量进行分析。方法 以33%饱和硫酸铰从多克隆兔抗人FV抗血清中纯化IgG,待测血浆行4%~12%梯度的SDS-PAGE,继之电转印至硝酸纤维膜上。结果 在330 kD附近,正常人混合血浆呈现一明显的条带,患者母亲对应条带的显色强度明显弱于正常对照,而患者则完全缺如,且未能检出其他较小的FV片段产物。结论 我们建立的人血浆FV蛋白免疫印迹分析法对于遗传性FV缺乏症的辅助诊断及分型具有重要作用。该家系属于I型遗传性FV缺乏。
谢飞 +7 more
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EUROlineScan分析软件在免疫印迹法检测自身抗体中的应用探讨
目的比较目测判断法和EUROLineScan软件分析法在免疫印迹法检测自身抗体时的差异,为以显色条带灰度强度为基准的扫描软件分析法替代传统目测判断法提供实验依据。方法同时采用目测判断法和EUROlineScan软件分析法对免疫印迹法检测膜条显色带进行结果分析,并比较两种方法在结果判断上的差异;编写EUROlineScan软件与实验室信息系统(LIS)连接的接口,达到检测结果实时传入LIS的目的。结果在148条膜条的1184例自身抗体检测实验中,两种方法检测结果一致率为88.43%(1047/1184 ...
武永康, 王兰兰, 蔡蓓, 张崇唯
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结直肠癌是全球第三大癌症死因,每年有超过185万病例被发现,85万人死亡[1]。结直肠癌初期起病隐匿,发展缓慢,多数病例是在癌症晚期才被确诊,有效的诊断及发病机制的研究对肿瘤的预后有重要意义[2]。本研究通过二维色谱质谱联用技术、免疫印迹实验、免疫组化实验来探究ATP5B蛋白在结直肠癌组织与癌旁组织的表达及意义,为结直肠癌的临床诊断及发病机制的研究提供新的方向。1 ...
林英, 李时孟, 岳斯琦, 杨琦
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一步免疫印迹法同时检测抗RA33抗体和抗ENA抗体及其对RA患人的诊断价值
目的提高抗RA33抗体诊断类风湿性关节炎(RA)的特异性。方法建立一步免疫印迹法,可同时检测抗RA33抗体和抗ENA抗体。并对266例不同风湿性疾病患者血清和24例正常人血清进行了检测。结果抗RA33抗体阳性率:RA 38%(38/100),SLE 35.8%(24/67),MCTD 36.4%(8/22),SS 8.3%(3/36)。抗RA33抗体阳性血清中抗ENA抗体的检出率:95.8%(23/24)SLE有抗Sm/u1RNP抗体,100%(8/8)MCTD有抗u1RNP抗体,100%(3/3 ...
刘学明 +5 more
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【目的】探讨干扰素调节因子5(IFR5)是否通过下调DNA修复酶PARP-1,进而抑制鼻咽癌细胞的侵 袭能力。【方法】本研究使用的临床标本是经病理确诊的鼻咽癌患者组织标本46例和正常组织51例。免疫组化 检测鼻咽癌组织和正常组织中IRF5和PARP-1的表达。构建IFR5过表达质粒,上调鼻咽癌细胞CNE-2中IFR5 表达,荧光定量PCR(QPCR)和免疫印迹确定建立IRF5过表达细胞。上调IRF5表达后,划痕和transwell实验检 测细胞侵袭能力的改变,QPCR 和免疫印迹检测PARP ...
李民英 +3 more
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EB病毒gp125蛋白的酵母表达及在鼻咽癌检测中的应用 EB病毒gp125蛋白的酵母表达及在鼻咽癌检测中的应用
摘 要: 【目的】 采用毕赤酵母系统构建表达EB病毒gp125重组蛋白,并探讨其在鼻咽癌血清学诊断中的应用?【方法】以EBV DNA为模版,采用PCR法扩增gp125的编码基因BALF4(2574 bp),与毕赤酵母表达载体pPIC9连接,转化酵母菌GS115,甲醇诱导重组蛋白表达?重组蛋白经SDS-PAGE?免疫印迹法鉴定后,包被聚丙乙烯板,制备ELISA试剂检测鼻咽癌患者和正常人群gp125-IgA抗体?【结果】 在毕赤酵母菌中高效地表达了分泌型的gp125重组蛋白,相对分子质量为110 000 ...
张新玲
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以免疫印迹法分析登革病毒感染的鼠脑抗原和白纹伊蚊细胞抗原,用单克隆抗体及多克隆抗体作探针。结果显示:登革病毒的非结构蛋白NV5存在有群及型特异的抗原决定簇。
林波
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