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Virus-like particle-based vaccine development using Escherichia coli expression system [PDF]
, 2014 重组病毒样颗粒是病毒衣壳蛋白外源表达的重要形式,形态结构与天然病毒高度相似,位于纳米尺度的大小易于被免疫系统识别,可激发机体产生保护性免疫反应,且不含有病毒基因,因此,是一种理想的疫苗形式,也是基于结构进行疫苗设计的重要结构载体。目前已上市的乙型肝炎疫苗、人乳头瘤病毒疫苗和戊型肝炎疫苗等基因工程疫苗均采用病毒样颗粒形式。大肠杆菌表达系统被广泛用于基因工程药物的生产,具有安全性好、生产周期短、易于放大生产等优点,在病毒样颗粒疫苗应用上具有良好前景 ...
夏宁邵, 李少伟
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Identification and immunogenicity analysis of artificial antigen of Glycyrrhizic acid conjugated with BSA [PDF]
, 2008 目的制备中药甘草的活性成分甘草酸(GA)的人工抗原及抗血清,为制备GA的单克隆抗体、并建立快速检测GA的酶联免疫吸附测定(ELISA)提供技术基础。方法将GA与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联起来制得完全抗原后,经基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定其相对分子质量,用此抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,并通过间接ELISA法和竞争ELISA法检测其抗体效价和特异性。结果合成的人工抗原GA-BSA中GA与BSA的结合比约为7∶1;免疫小鼠得到特异针对GA的多抗血清,GA抗体的效价为1∶8000 ...
徐金森 +3 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的从尖锐湿疣病变组织中克隆人乳头瘤病毒6型（HPV6）E7基因,为HPV感染的检测及基因工程疫苗的研制奠定基础。方法以临床尖锐湿疣标本总DNA为模板,采用聚合酶链反应（PCR）技术,从尖锐湿疣病变组织中扩增出人乳头瘤病毒6型E7基因完整开放阅读框架,并插入载体PMD-18T中构建重组质粒,转化JM109中扩增,进行酶切及测序分析。结果测序结果证实克隆成功。结论该实验为研究人乳头瘤病毒E7蛋白的免疫学和流行病学特点创造了条件,也为下一步制备HPV6型疫苗奠定了基础。
丛宪玲 +4 more
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人乳头瘤病毒18型病毒样颗粒在大肠杆菌中的表达及免疫原性分析 [PDF]
, 2009 利用大肠杆菌表达系统可溶性表达人乳头瘤病毒18型(HPV18)L1蛋白,经过纯化和重组装过程获得HPV18病毒样颗粒(VLPs),研究其免疫原性和诱发中和抗体生成的水平。首先,提取HPV18的基因组DNA,通过PCR扩增获得HPV18 L1基因片段,将其插入pTrxFus表达载体,在大肠杆菌中可溶性表达HPV18 L1蛋白;其次,通过硫酸铵沉淀、离子交换层析和疏水相互作用层析获得高纯度的HPV18 L1蛋白,而后透析去除预先加入的还原剂DTT,使HPV18 L1蛋白自发组装成VLPs;最后 ...
吴婷 +9 more
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野生动物学报, 2021 动物肠道中寄生着数以亿计的微生物,参与到动物机体中如代谢和免疫等重要的生理过程中。然而,在粪便等复杂样本中包含着大量微生物,无法通过纯培养技术进行研究,无法评估样本中的微生物多样性。通过宏基因组学技术可以对微生物群总DNA进行分析,使其成为目前研究复杂样本微生物结构和功能的重要工具。并且伴随高通量测序技术和生物信息学的进步,对微生物的分析流程也在不断地被改进。本文比较了在宏基因组学中普遍应用的标志基因扩增子分析和全宏基因组分析,对宏基因组技术在几类野生脊椎动物肠道微生物领域中的应用进行综述 ...
赵宇卓 吴 尽 杨天雄 姚茂林 裴 欣 付蓝仪 刘学东
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, 2007 目的通过对中国华东地区分离出的2株基因3型戊型肝炎病毒株进行同源性分析,探讨其分子起源和传播问题。方法收集华东某地区13个养猪场的133份猪粪便标本,利用巢式RT-PCR技术扩增戊肝病毒基因组的开放读码区2(ORF2)和RNA依赖的RNA聚合酶区(RdRp,ORF1),并进行基因同源性分析。结果戊肝病毒RNA检出率为43.61%(58/133)。其中,在同一个养猪场检出的2份阳性标本与23条戊肝病毒基因3型全长序列在ORF2和ORF1区的同源性分别为77.10%~92.64%和77.49%~91.14%,
夏宁邵 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的基因工程重组表达2-氧戊二酸脱氢酶复合体E2（OGDC-E2）融合蛋白。方法用PCR方法扩增得到OGDC-E2的基因片段,插入表达载体pET28a（+）,构建重组表达载体pET28a（+）-OGDC-E2,测序正确后在大肠杆菌BL21（DE3）中表达。结果获得OGDC-E2融合蛋白,经SDS-PAGE分析,相对分子质量与预期大小一致;经免疫学鉴定,重组抗原片段具有抗线粒体抗体二亚型（AMA-M2）的免疫原性。结论基因重组表达的融合蛋白将有利于原发性胆汁性肝硬化（PBC）的实验诊断。
周晔 +8 more
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Study on the Biology of Eimeria tenella from Xiamen and the Effect of Alage Transformed with Thymosin α1 Gene for Anti-Coccidia [PDF]
, 2004 摘要2001年8月份至2004年7月份，作者对厦门产的柔嫩艾美尔球虫（E.tenella）的病原生物学、生活史各期形态特征、球虫的致病作用等方面进行了详细的研究，在此基础上对鸡感染从厦门获得的柔嫩艾美尔球虫{以下简称柔嫩艾美尔球虫（厦门）}后血清抗体变化规律也进行了考察，并对转胸腺素α1基因蓝藻在球虫感染中的保护作用及药代动力学进行探讨，研究内容结果如下：一、柔嫩艾美尔球虫厦门（E.tenella）病原生物学考察，此项内容包括：1.采用单卵囊分离技术分离并增殖到柔嫩艾美尔球虫（厦门 ...
周克夫
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】对SD大鼠喉移植的自然免疫排斥过程进行病理学观察，定义移植喉急性免疫排斥反应的病理评价标准。【方法】实验采用作者已建立的改良模型进行鼠喉移植。实验组12例，受体和供体均为封闭群Ⅱ级雄性SD大鼠，移植术后第1，3，5，7，14，21天（各2例）解剖移植喉，常规病理观察移植喉的组织结构变化；对照组12例，受体和供体均为F344近交系大鼠，方法同实验组。【结果】实验组术后第1天移植喉表现为周围组织，黏膜固有层水肿；术后第3天时固有层增厚，炎症细胞浸润．小涎腺腺泡结构部分破坏，扭曲 ...
彭汉伟, 李浩, 曾宗渊
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基于公共文化服务均等化理念的“文化账户” 模式探索 [PDF]
, 2018 作为保障公民基本文化权利的公共文化服务，均等性是其基本特征之一。均等化则是解决公共文化服务发展不平衡的必由之路。基于此，发达国家对公共文化服务的发展改革均朝着降低政府管控、引入市场竞争、鼓励公民参与的方向迈进。面对当前中国公共文化服务供给在地区、城乡、群体上的不均等，可以学习发达国家的先进经验，借鉴其文化“自助餐” 模式的理念，并结合中国实际国情以及基层相关实践基础，探索具有中国特色的“文化账户” 模式。通过引入竞争机制激发供给侧活力、拓展资金渠道提升质量、培育社会力量带动公民参与 ...
金, 莹, 闫, 博文
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