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人乳腺珠蛋白单克隆抗体制备及生物特性鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
目的构建重组hMAM蛋白,通过杂交瘤技术获得特异性的抗hMAM的单克隆抗体,并鉴定其生物特性。方法克隆表达hMAM 8-93AA、20-52AA、43-70AA、56-82AA、67-93AA区段的抗原,以纯化的pBV220/hMAM(8-93AA)为免疫原,杂交瘤技术筛选出能稳定分泌抗hMAM单克隆抗体的细胞株。采用Western blotting和免疫组织化学染色方法鉴定其表位和特异性。结果获得6个高纯度的重组抗原,通过pBV220/hMAM(8-93AA)免疫小鼠后 ...
杨锡琴   +8 more
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铕螯合剂对甲胎蛋白单克隆抗体标记的研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2018
目的探究自合成铕螯合剂对甲胎蛋白单克隆抗体的标记方法。方法经EDC和NHS活化的铕螯合剂偶联甲胎蛋白单克隆抗体,通过透析收集标记抗体,检测荧光强度和免疫活性,计算回收率和标记率。结果标记抗体荧光强度高,免疫活性无明显变化,回收率为94%,标记率为15。结论自合成的铕螯合剂可用于甲胎蛋白单克隆抗体的标记,标记效果理想,可进一步建立均相时间分辨荧光免疫分析方法。
孙延文   +5 more
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ELISA定量测定单克隆抗体方法改进 [PDF]

open access: yes, 1991
本文介绍了以亲和层析纯化的免抗鼠IgG类抗体及其酶标物作为捕获及检测抗体进行鼠杂交瘤培养上清及腹水中IgG类单克隆抗体的ELISA定量测定方法。结果表明:小牛血清(BS)、免血清(RS)、马血滑(HS)、人血清(HuS)及非抗体产生细胞的培养上清对本项εLISA实验无干扰,使测定的结果较可靠,测定的鼠IgG各亚类的标准曲线的线性范围均在5~100ng/ml之间,因此这个快速 ...
陈瑞川, 卢方, 卢玉英
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人uPA基因克隆和单克隆抗体的制备及其在乳腺癌中表达的检测

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的克隆人尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因,制备和鉴定针对人uPA的单克隆抗体,检测uPA在乳腺癌中的表达。方法利用RT-PCR方法从人乳腺癌细胞MDA231总RNA中扩增克隆uPA基因,构建可表达uPA蛋白的原核表达质粒,在大肠杆菌中诱导表达GST-His-uPA融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合及次黄嘌呤、氨基蝶呤与胸苷选择性培养,并进行三次亚克隆筛选出单克隆细胞株,
赵桂梅   +3 more
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抗登革病毒单克隆抗体诊断盒的应用 [PDF]

open access: yes, 1995
应用4株I、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型登革病毒特异性单克隆抗体组成的诊断试剂盒,用荧光抗体技术特异而敏感地鉴定了Ⅰ~Ⅳ型登革病毒原型株和20个地方株的型别.并于1990-1993年间广州市及佛山市登革热流行时 ...

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抗绿脓杆菌单抗制备及对小鼠绿脓杆菌感染的保护性作用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2005
目的制备抗绿脓杆菌单克隆抗体,观察其对绿脓杆菌感染的烧伤小鼠及正常小鼠的保护作用。方法应用NS-1细胞和经绿脓杆菌免疫后的BALB/C小鼠脾细胞制备杂交瘤细胞株,收集其分泌的抗体,观察其对绿脓杆菌感染的Ⅲ°烧伤小鼠及正常小鼠的免疫保护作用。结果该单克隆抗体可预防绿脓杆菌感染。结论我们的研究结果为抗绿脓杆菌单克隆抗体在临床上应用的可行性提供了实验室基础。
温剑平   +3 more
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抗人NRP1单克隆抗体的活性鉴定及初步应用 [PDF]

open access: yes, 2012
目的鉴定抗人神经菌毛素1(neuropilin1,NRP1)单克隆抗体的生物活性并利用该抗体检测常见肿瘤细胞株NRP1蛋白的表达情况。方法腹水法制备4株抗NRP1单克隆抗体并用rProtein A亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测4株抗体的滴度水平,Western blot分析4株抗体结合NRP1蛋白的特异性,流式细胞术分析4株抗体结合NRP1蛋白的亲和力,共聚焦免疫荧光实验进一步验证抗体结合NRP1蛋白的能力;细胞免疫组织化学染色检测14株肿瘤细胞表达NRP1蛋白的情况。结果 ...
曾凡伟   +6 more
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2′,5′-寡腺苷酸合成酶的表达及其单克隆抗体的制备与应用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2008
目的用基因工程技术表达2′,5′腺苷酸酶(2-5AS)蛋白为抗原制备单克隆抗体,供荧光素标记抗体流式细胞术检测细胞内2-5AS应用。方法将2-5AS基因片段插入到带有His.Tag的pET-30a(+)质粒,并转化到宿主菌E.coli.BL21(DE3),ITPG诱导表达,Ni柱纯化,获得2-5AS蛋白后制备单克隆抗体。结果插入片段酶切测序证实,插入的片段与目的片段序列相符;Ni柱纯化过程中可见目的蛋白的洗脱峰;经Tricine-SDS-PAGE电泳,Western Blotting鉴定,得到表达蛋白 ...
宋玉国, 谭冲, 黄建文, 毕胜利
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新型生物制剂在肾小球疾病中的应用

open access: yesLinchuang shenzangbing zazhi, 2014
新型生物制剂主要是指以炎症过程或免疫反应中的特定分子或受体为靶目标的单克隆抗体或天然抑制分子的重组产物。迄今为止,国际上应用生物制剂探索治疗肾小球疾病的研究中,以抗CD20单抗一利妥昔单克隆抗体(Rituximab)为主 ...
彭佑铭
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应用噬菌体随机肽库筛选 2 型登革病毒 E 蛋白的抗原表位

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002
【目的】通过型特异性单抗与噬菌体随机 12 肽库的生物淘洗,确定 2 型登革病毒E 蛋白分子的抗原表位。【方法】以 DEN2 型特 异的 E 单克隆抗体作为筛选分子,生物淘洗噬菌体随机 12 肽库,将筛选的噬菌体阳性克隆进行 ELISA 检测、DNA 序列测定及展示肽的氨基 酸序列推导,通过展示肽序列与 DEN2 E 蛋白的氨基酸一级结构的对比,确定 E 蛋白的抗原优势表位并用相应的合成肽验证。【结果】常规生 物淘洗获得富含芳香族氨基酸并有 aHWbW 核心结构的克隆,确定为非特异的塑料结合噬菌体 ...
魏惠永, 江丽芳, 郭辉玉
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