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, 2012 目的鉴定抗人神经菌毛素1(neuropilin1,NRP1)单克隆抗体的生物活性并利用该抗体检测常见肿瘤细胞株NRP1蛋白的表达情况。方法腹水法制备4株抗NRP1单克隆抗体并用rProtein A亲和柱纯化抗体,间接ELISA检测4株抗体的滴度水平,Western blot分析4株抗体结合NRP1蛋白的特异性,流式细胞术分析4株抗体结合NRP1蛋白的亲和力,共聚焦免疫荧光实验进一步验证抗体结合NRP1蛋白的能力;细胞免疫组织化学染色检测14株肿瘤细胞表达NRP1蛋白的情况。结果 ...
曾凡伟 +6 more
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, 2008 通过Western blot、体外捕获PCR、ELISA阻断实验及合成的多肽库等方法,对23株抗戊型肝炎病毒(HEV)单克隆抗体(单抗)识别HEV ORF2表位的作用进行系统研究。结果显示,7株线性单抗识别表位都位于ORF2 aa408~458之间,16株构象型单抗识别表位都定位于ORF2 aa459~606之间,大部分构象型单抗识别表位都在天然病毒表面。对这些单抗识别表位系统地了解将为HEV疫苗、诊断 ...
张军 +9 more
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, 1996 采用“例逐龄级累加法”（ＲＡＡ）研究了缙云山斑苦竹无性系种群的克隆生长格局动态，以及无性系分株克隆生长型的动态趋势．结果表明，作为复轴型的斑苦竹，其无性系种群随时间进程表现为聚集程度逐渐降低的集群分布格局．在自然条件下，斑苦竹更多地表现出单轴型的繁殖趋势．应用ＲＡＡ分析植物种群，尤其是竹类植物种群前期的克隆生长格局的动态，结果可靠，具有重要的应用价值．
钟章成, 刘庆
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四川大学学报. 自然科学版, 2014 本文设计并合成了狂犬病病毒PV株基质蛋白(matrixprotein,MP)基因与优化的PV株基质蛋白基因,分别克隆至转移载体pVL1393中构建穿梭质粒,再以穿梭质粒与线性化的杆状病毒BaculoGoldTM进行重组,构建表达MP的重组杆状病毒,然后感染Sf9昆虫细胞进行表达.通过SDS-PAGE电泳分析显示,表达的MP和优化后MP约分别为27kDa和26kDa.间接免疫荧光检测(IFA)显示,表达的MP和优化后MP均可与鼠抗His单克隆抗体及鼠抗RV血清特异性结合,出现明显的特异性绿色荧光 ...
杨硕 +5 more
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, 2007 常绿小乔木黄牛奶树具有有性繁殖和克隆繁殖两种繁殖方式,对森林更新意义重大.以种群个体空间分布的坐标点图为基础,采用点格局分析法对其不同生境下克隆苗与实生苗的分布格局及其相互关系进行了研究.结果表明,克隆苗和实生苗的密度顺序都是常绿阔叶林>竹林>针阔混交林,在水肥资源丰富、郁闭度较大(常绿阔叶林和竹林)的生境中,两类苗密度都较大,但克隆苗占优势;在水肥资源贫乏光照较强的生境中,两类苗数量均较低,实生苗占优势.黄牛奶树克隆苗与实生苗在竹林与针阔混交林下以集群分布为特征 ...
张运春 +4 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2002 目的 体外培养和鉴定神经干细胞 .方法 从胎鼠前脑取出脑组织 ,采用酶消化、机械吹打、对倍稀释成单个细胞 ,经无血清培养获得单细胞克隆 ,由免疫细胞化学方法鉴定分离的神经干细胞 .结果 从胎鼠脑中分离的细胞具有连续传代形成克隆的能力 ,表达神经干细胞蛋白 (nestin) ,并能诱导分化成神经元和神经胶质细胞 .结论 分离的细胞是神经干细胞 .
庞栋 +7 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 [目的]构建带有肝脏特异性启动子和tTS沉默子的四环素调控系统,观察其在人HepG2细胞内的表达,建立严密型四环素调控系统的HepG2细胞模型.[方法]通过二次分子克隆构建重组真核表达质粒载体pliv7-rtTA-tTS-Neo,用脂质体法将质粒pliv7-rtTA-tTS-Neo及pliv7-rtTA-Neo转染人HepG2细胞,经G418筛选后的克隆用有限稀释法进行单克隆化,克隆扩增后瞬时转染pTRE-Luc质粒,强力霉素（1 mg/L）诱导表达后检测荧光素酶活性 ...
张若霜, 帅丽芳, 赵勇, 陈系古
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鲤鱼（Cyprinus Carpio）促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备
, 2006 采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）方法，从鲤鱼脑垂体获得了两种GtHβ亚基的cDNA，克隆在pMD18-T载体。经测序确证后，将这两个基因克隆到原核表达载体pET-32（a）中，转化E．coli表达菌BL21（DE3），以IFFG诱导融合蛋白的高效表达。利用初步纯化后的抗原免疫新西兰大白兔，制备多克隆抗体。应用制备的兔抗血清与抽提的鲤鱼脑垂体的总蛋白分别进行Westem-blot及ELISA分析，结果显示获得的多抗能特异识别各自的天然蛋白。该结果为纯化天然GtH蛋白提供了有效的检测手段 ...
汪亚平 +5 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2009 以从正在萌发的诸葛菜种子中提取总RNA反转录成的cDNA作为模板,进行PCR扩增,获得了160 bp的植物防御素cDNA片段。然后将该片段克隆到pMD18-T栽体。经测序后将片段酶切回收,再克隆到GTK原核表达载体中。经0.1 mmol/L IPTG诱导表达,获得了与理论值相符的32 kD的融合蛋白质条带。用GST单克隆抗体做第一抗体进行Western-Blot检测,获得阳性结果。这为诸葛菜植物防御素基因功能的研究提供了基础。
钱磊 +8 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的观察抗CD3单克隆抗体在预防肾移植术后急性排斥反应的作用。方法164例肾移植患者分为两组,42例移植术后应用抗CD3单克隆抗体（5mgd）为治疗组;其它122例为对照组。观察移植术后人肾存活率、急性排斥反应及CMV感染的发生率。结果治疗组1年、2年及3年人存活率与对照组无显著差异,而治疗组移植肾存活率明显高于对照组 ...
张玉华, 王伟刚, 周洪澜
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