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Development of real-time PCR genotyping based on allele specific primer and displacing probe methods. [PDF]
, 2007 本论文围绕实时PCR基因分型中的引物基因分型和探针基因分型两个关键技术展开了研究，研究工作主要包括ARMS引物、硫代磷酸化修饰引物以及荧光双链置换探针用于实时PCR基因分型的研究。 第一章，以酒精代谢过程中的关键酶—乙醇脱氢酶2的基因多态性为研究对象，采用新型的荧光染料EvaGreen为实时PCR指示剂，建立了ARMS改良四步法的实时PCR分型体系。通过对传统三步PCR循环进行改良，即根据目的产物和引物二聚体的熔点差异，在传统延伸步骤之后增加一步恒温79°C检测荧光步骤，可消除引物二聚体的影响 ...
顾莹莹
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探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药突变 [PDF]
, 2011 目的评价探针熔解分析法快速检测结核分枝杆菌链霉素耐药突变的应用价值,为临床应用提供依据。方法首先用中国药品生物制品检定所提供的含37份标准非结核分枝杆菌的标准盘进行特异性评价,然后将野生型结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA梯度稀释进行灵敏度考察,最后对906株结核分枝杆菌临床分离株(其中37份有药物敏感性试验结果)的链霉素耐药相关基因进行检测,并对突变菌株、有药敏结果的菌株以及疑似杂合的菌株进行测序分析。结果标准盘评价结果证实该体系特异检测H37Rv结核分枝杆菌。分析灵敏度为5～50拷贝每反应 ...
张向东 +5 more
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Analysis on characterization of immediate early gene ORF62 of varicella vaccine Oka strains manufactured in China [PDF]
, 2014 目的： 通过比较两株国产水痘减毒活疫苗株（vOka）与其父系株（pOka）的即刻早期基因ORF62启动子区序列、启动子的启动活力和启动子区转录因子结合基序的差异，以及ORF62编码区序列及其编码即刻早期蛋白（IE62）反式激活力的差异，探讨vOka株ORF62突变在其减毒机制中的可能作用。 方法： 1、应用分子克隆技术克隆构建长春百克生物科技股份公司vOka-BK株、上海生物制品研究所vOka-SH株、葛兰素-史克公司vOka-GSK株（对照）及其父系pOka株ORF62启动子的启动子-报告子质粒 ...
吴宁俊
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Phylogenetic diversity and biogeography of protease-producing bacterioplankton in polar marine environments [PDF]
, 2010 浮游细菌是海洋生态系统的主要成员之一并且具有重要的生态学意义。胞外蛋白酶是这些细菌发挥特定生态功能、表征生理活性的一个重要标志。在极地低温海洋环境中同样分布着数量众多的浮游细菌，它们在极地海洋生态系统的物质循环与能量流动中扮演着极其重要的角色。而两极地区独特的地理位置及气候环境特征，是否会导致生存其中的浮游细菌群落组成存在差异，是一个广受关注的科学问题。此外，相距遥远的两极之间是否存在相同种属的海洋细菌，也是一个值得探讨的问题。 本研究采用16SrRNA基因文库与ARDRA分析相结合的分子生物学手段 ...
曾胤新
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PCR-SSCP检测急性髓系白血病患者FLT3基因及FLT3/ITD基因突变
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的研究急性髓系白血病（AML）患者DNA水平FLT3基因及其内部串联重复（ITD）突变。方法采用多聚酶链反应（PCR）联合单链构象多态性（SSCP）方法检测43例不同免疫分型AML患者DNA水平FLT3基因及FLT3/ITD基因突变。结果43例AML患者经PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳FLT3基因检测全部阳性,未发现FLT3/ITD基因突变;SSCP电泳FLT3基因检测全部阳性,43例AML患者中有15例（35%）出现FLT3/ITD基因突变。结论PCR-SSCP适用于检测急性髓系白血病FLT3 ...
黄晶 +4 more
doaj
Study on LEP genetic polymorphism, serum organochlorines pesticides (DDTs and HCHs) level and risk of cholesterol gallstone [PDF]
, 2017 研究背景 胆结石（Cholecystolithiasis）是世界范围的一种重要公共健康问题。近来年，随着人民生活水平的提高，饮食结构和行为生活方式的改变，我国人群的胆石症（尤其是胆囊胆固醇结石）发病率日趋增加。胆囊胆固醇结石的发生、发展与遗传、环境因素及体内激素（雌激素、瘦素等）水平等密切相关。环境中持久性有机污染物，如有机氯农药（Organicchlorinatedpesticides，OCPs）滴滴涕（dichlorodiphenyltrichloroethane，DDTs）和六六六 ...
陈静
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Research Progress on Molecular Classification of Echinococcus [PDF]
, 2007 目的:本文介绍了基因型分析、分子标记、DNA杂交及序列测定等技术运用于棘球绦虫分子分类的研究进展。In this paper, the research progress was summarized that molecular classification of Echinococcus was studied by analysis of genotype, molecular markers, DNA hybridization and sequence analysis,et ...
彭文峰, 马金友
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2001 目的 探讨纤支镜后痰液标本的ｐ５３基因突变检测用于肺癌早期诊断的可行性。方法 采用聚合酶链反应－单链构象多态性分析（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）银染技术，对２９例怀疑为肺癌患者的痰液标本行ｐ５３基因５－８号外显子突变检测。结果８例患者有ｐ５３突变，突变率为２７．６％，其中以６号外显子突变率最高（１７．２％）。ｐ５３突变率明显高于相应细胞学阳性率（Ｐ＜０．０５）。结论 纤支镜后痰标本ｐ５３突变检测对肺癌的早期诊断具有一定价值，可作为肺癌早期诊断的辅助方法之一。
倪培华 +3 more
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用Taqman MGB探针研究中国人群TNF-α基因启动子区单核苷酸多态性 [PDF]
, 2006 【目的】了解中国人群肿瘤坏死因子α（the tumour necrosis factor α，TNF-α）基因启动子区多态性。【方法】 随机选取20名深圳地区汉族健康体检者，采用两对引物PCR扩增TNF-α基因启动子区（-1389nt～＋125nt），对PCR产物进行序列分析，寻找单核苷酸多态性位点（single nueleofide polymorphisms，SNPs）。采用Taqman MGB探针建立了-857nt（C／T）位点的实时定量PCR（thereal-time PCR）分型方法 ...
叶小明 +4 more
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, 2003 以荧光染料Fam和Joe分别标记野生型和突变型双链探针作为均相检测探针,以构建的DNA模板作为研究模型,采用固定波长差同步荧光分析法对PCR反应产物进行终点检测。通过对HFE基因C282Y点突变的检测,并以限制性内切核酸酶RsaI证实,该方法是一种廉价、快速、可靠的筛查遗传性血色病基因C282Y突变的方法 ...
张永有 +3 more
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