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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 初步建立、优化用于胃癌蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术和计算机图像分析技术 ,提高其分辨率及重复性 ,得到一种分析胃癌蛋白质组双向凝胶电泳新方法。方法 提取胃癌组织中蛋白质 ,对以固相pH梯度为第一向双向电泳的关键因素与环节 ,如样品处理、电泳参数和凝胶浓度进行一系列优化。进一步采用双向凝胶电泳分离胃癌组和正常组总蛋白质 ,银染显色、图像分析软件分析电泳图谱。结果 重复性实验结果显示同组样品在 3次不同实验中所得蛋白质斑点数目相对标准差 （变异系数平均值 % ） :胃癌组和正常组分别为 2 3.0 ...
赵吉生, 房学东, 冯也
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的建立和优化人骨肉瘤蛋白质组双向电泳图像分析方法。方法对第一向双向电泳的关键因素与环节（如样品处理、电泳参数和凝胶浓度等）进行一系列优化。进一步采用双向凝胶电泳分离骨肉瘤组和正常组总蛋白质,银染显色,Image Master图像分析系统分析电泳图谱。结果重复性实验结果显示同组样品在3次不同实验中所的蛋白质斑点数目相对标准差。（变异系数平均值%）:骨肉瘤组和正常组分别为23.00±10.11、20.33±9.90。（变异系数范围%）:骨肉瘤组和正常组分别为3.80-6.89、2.70-6.89 ...
孙庆, 杨小玉, 李红群, 齐飞
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的比较大鼠血清样本的4种制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳（2-DE）分离效果的影响。方法分别用直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理大鼠血清样本,双向电泳分离血清蛋白;硝酸银染色;image master5.0软件分析所得蛋白质斑点。结果对直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理的大鼠血清样本进行双向电泳分离,经3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数分别为610±54,683±46,735±42和865 ...
张彬, 谭岩
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的建立急性脊髓损伤双向凝胶电泳图谱,初步观察急性脊髓损伤组织中蛋白质组的变化与差异表达,为进一步探讨急性脊髓损伤分子机制奠定了基础。方法采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白,银染显色,Image Master图象分析系统分析,从胶中选取分离蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）分析获取肽质量指纹图谱（PMF）,Mascot软件搜索MSDP、SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果获得重复性和分辨率较好的脊髓双向凝胶电泳图谱。质谱分析了12个蛋白质点,获取6张肽质量指纹图谱 ...
赵宝林 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的建立脊髓缺血再灌注损伤双向凝胶电泳图谱,对照观察蛋白质的差异表达。方法建立脊髓缺血再灌注损伤模型,获取损伤和正常脊髓的蛋白质组双向电泳荧光图谱,观察差异蛋白的不同时间点的变化规律,建立缺血再灌注24 h与正常脊髓蛋白质组的匹配差异图谱,鉴定差异蛋白。结果成功建立损伤和正常的双向电泳荧光图谱和肽质量指纹图谱,比较再灌注损伤24 h组与正常组可检测到46个蛋白差异点,鉴定出10个差异蛋白。结论损伤24 h组较其他组变化明显,与正常脊髓的蛋白质组存在明显差异。
朱本清, 杨小玉, 顾锐, 邱宾涛
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的建立脑脊液双向差异凝胶电泳方法,寻找髓母细胞瘤脑脊液、室管膜瘤脑脊液与正常脑脊液三者之间的差异蛋白表达。方法选取3例已确诊髓母细胞瘤患者脑脊液等体积混合为髓母细胞瘤组（M）;3例已确诊室管膜瘤患者脑脊液等体积混合为室管膜瘤组（E）;3例正常脑脊液等体积混合为正常对照组（CON）;分别采用10%TCA/冰丙酮沉淀法除盐提取蛋白;蛋白等量混合为内标组（S）;将各组蛋白分别经花青染料Cy2、Cy3和Cy5标记,混合后进行双向差异凝胶电泳（2D-DIGE）,分别在波长488nm ...
李文臣 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的建立视网膜光感受器细胞外基质（Interphotoreceptor matrix,IPM）蛋白质sialoprotein associated with cones and rods（SPACR）分离和纯化方法。方法分离视网膜IPM,提取蛋白质组份,通过离子交换、凝胶过滤层析等技术分离纯化SPACR,并通过双向电泳及western blot技术验证。结果通过双向电泳技术及western blot结果显示分离纯化后仅有等电点在5-5.5,分子量约在150 kDa的单一条带和SPACR抗体反应 ...
赵劲松, 黄岚峰, 王淑荣
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原肌球蛋白、丙酮酸激酶在急性早幼粒细胞白血病耐药细胞中表达上调
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2007 目的应用蛋白质组学方法筛选人急性早幼粒细胞白血病（APL）维甲酸敏感细胞株（NB4细胞株）和维甲酸耐药细胞株（NB4-R1细胞株）的耐药相关蛋白。方法利用双向凝胶电泳技术检测,比较NB4和NB4-R1细胞株的总蛋白,建立二维凝胶电泳（two-dimensional gel electrophoresis,2-DE）图谱。从多个差异蛋白质点中选择出2个在NB4-R1细胞株中表达明显上调的蛋白质点进行MALDI-TOF-MS生物质谱分析 ...
孙明莉 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007 【目的】应用精子膜蛋白亲和层析柱分离金黄地鼠前列腺精子结合蛋白，并用二维电泳和质谱对金黄地鼠前列腺精子膜结合蛋白进行初步分析。【方法】应用附睾精子膜亲和层析柱纯化前列腺精子结合蛋白，采用二维凝胶电泳对纯化的前列腺精子膜结合蛋白进行蛋白分离和图像分析，并结合基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析及数据库搜索从而鉴定部分蛋白质斑点；RT—PCR检测已鉴定蛋白在前列腺及未受精卵子中的mRNA的表达。【结果】附睾精子膜蛋白亲和层析柱可纯化出前列腺结合蛋白，前列腺附睾精子膜蛋白结合蛋白的二维凝胶电泳蛋白图谱 ...
骆建民, 谢江新, 王俐
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的以蛋白质组学相关技术进行初步筛选人源性大肠癌Fab段噬菌体抗体库,建立一种寻找特异性大肠癌抗原蛋白及相应的噬菌体抗体的方法。方法以二维凝胶电泳分离大肠癌组织和正常大肠粘膜组织蛋白组并将获得的2-DE凝胶电转至PVDF膜。然后以大肠癌组织匀浆为靶抗原对我们构建的人源性大肠癌Fab段噬菌体初级抗体库进行三轮淘洗,再用富集抗体库和PVDF膜进行Western-Blot印记实验。结果经Western-Blot印记实验我们发现了至少八个大肠癌表达而正常大肠粘膜不表达的有噬菌体抗体特异性结合活性的抗原蛋白 ...
王旭东 +4 more
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