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急性脊髓损伤蛋白质的双向电泳分析和质谱鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的建立急性脊髓损伤双向凝胶电泳图谱,初步观察急性脊髓损伤组织中蛋白质组的变化与差异表达,为进一步探讨急性脊髓损伤分子机制奠定了基础。方法采用双向凝胶电泳分离脊髓总蛋白,银染显色,Image Master图象分析系统分析,从胶中选取分离蛋白质点,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析获取肽质量指纹图谱(PMF),Mascot软件搜索MSDP、SWISS-PROT数据库鉴定蛋白质。结果获得重复性和分辨率较好的脊髓双向凝胶电泳图谱。质谱分析了12个蛋白质点,获取6张肽质量指纹图谱 ...
赵宝林   +6 more
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髓母细胞瘤与室管膜瘤脑脊液差异凝胶电泳方法的建立

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2014
目的建立脑脊液双向差异凝胶电泳方法,寻找髓母细胞瘤脑脊液、室管膜瘤脑脊液与正常脑脊液三者之间的差异蛋白表达。方法选取3例已确诊髓母细胞瘤患者脑脊液等体积混合为髓母细胞瘤组(M);3例已确诊室管膜瘤患者脑脊液等体积混合为室管膜瘤组(E);3例正常脑脊液等体积混合为正常对照组(CON);分别采用10%TCA/冰丙酮沉淀法除盐提取蛋白;蛋白等量混合为内标组(S);将各组蛋白分别经花青染料Cy2、Cy3和Cy5标记,混合后进行双向差异凝胶电泳(2D-DIGE),分别在波长488nm ...
李文臣   +4 more
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室管膜瘤患者脑脊液蛋白质组学分析

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的建立脑脊液二维电泳系统,寻找室管膜瘤患者脑脊液差异蛋白质表达。方法收集5例术后病理证实室管膜瘤患者脑脊液和2例健康受试者脑脊液,采用二维电泳分离方法分析室管膜瘤患者与正常受试者脑脊液蛋白质组学差异,寻找标志性蛋白质。结果室管膜瘤患者脑脊液中可以检测到400±40蛋白质点,正常受试者脑脊液中近360±36个蛋白质点,其中25个点在室管膜瘤患者中含量增加,有5个点在室管膜瘤患者脑脊液中减少,13个点为室管膜瘤患者脑脊液中特有。结论室管膜瘤患者和对照组的脑脊液双向电泳图谱存在着明显差异 ...
洪新雨   +4 more
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DAB诱发大白鼠肝癌的研究——利用双向电泳检测癌变后蛋白质的变化

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1987
研究癌变过程基因调控的改变,对癌症发生机制的阐明将起重要作用。我们用二甲氨基偶氮苯(DAB)诱发大鼠肝癌变,利用高分辨率的双向电泳及高灵敏度的银染色法,对基因表达的产物——蛋白质(包括胞浆蛋白、核质蛋白及染色质非组蛋白)作了研究,初步观察化学致癌物DAB诱发肝癌中基因表达的改变。
蔡晓丹
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前列腺精子结合蛋白的二维凝胶电泳及质谱分析

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2007
【目的】应用精子膜蛋白亲和层析柱分离金黄地鼠前列腺精子结合蛋白,并用二维电泳和质谱对金黄地鼠前列腺精子膜结合蛋白进行初步分析。【方法】应用附睾精子膜亲和层析柱纯化前列腺精子结合蛋白,采用二维凝胶电泳对纯化的前列腺精子膜结合蛋白进行蛋白分离和图像分析,并结合基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析及数据库搜索从而鉴定部分蛋白质斑点;RT—PCR检测已鉴定蛋白在前列腺及未受精卵子中的mRNA的表达。【结果】附睾精子膜蛋白亲和层析柱可纯化出前列腺结合蛋白,前列腺附睾精子膜蛋白结合蛋白的二维凝胶电泳蛋白图谱 ...
骆建民, 谢江新, 王俐
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原肌球蛋白、丙酮酸激酶在急性早幼粒细胞白血病耐药细胞中表达上调

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的应用蛋白质组学方法筛选人急性早幼粒细胞白血病(APL)维甲酸敏感细胞株(NB4细胞株)和维甲酸耐药细胞株(NB4-R1细胞株)的耐药相关蛋白。方法利用双向凝胶电泳技术检测,比较NB4和NB4-R1细胞株的总蛋白,建立二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)图谱。从多个差异蛋白质点中选择出2个在NB4-R1细胞株中表达明显上调的蛋白质点进行MALDI-TOF-MS生物质谱分析 ...
孙明莉   +4 more
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以蛋白质组学方法筛选人源性大肠癌噬菌体抗体库

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2006
目的以蛋白质组学相关技术进行初步筛选人源性大肠癌Fab段噬菌体抗体库,建立一种寻找特异性大肠癌抗原蛋白及相应的噬菌体抗体的方法。方法以二维凝胶电泳分离大肠癌组织和正常大肠粘膜组织蛋白组并将获得的2-DE凝胶电转至PVDF膜。然后以大肠癌组织匀浆为靶抗原对我们构建的人源性大肠癌Fab段噬菌体初级抗体库进行三轮淘洗,再用富集抗体库和PVDF膜进行Western-Blot印记实验。结果经Western-Blot印记实验我们发现了至少八个大肠癌表达而正常大肠粘膜不表达的有噬菌体抗体特异性结合活性的抗原蛋白 ...
王旭东   +4 more
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糖皮质激素致眼压升高1例

open access: yesHuli yanjiu, 1993
病例简介 李某某,女24岁,因关节痛一年余,浮肿伴心悸半年,于1984年8月25日住院,体检 T 37℃,P120次/分,BP 11.7/8Kpa。颜面及下肢轻度浮肿;心界叩诊向双侧扩大,心率120次/分,律齐,未闻及杂音;腹水征阳性;双肾区无压痛及叩击痛。尿常规蛋白(+)~(++),白细胞(++),颗粒管型(++);尿纤维蛋白降解产物3.2ug/ml,血沉80mm/h。血清蛋白电泳 白旦白39.32%,r球旦白36.36%,血IgG29.2mg/ml;补体:C30.56mg/ml,类风湿因子 ...
王绍武
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原发性肝癌组织双向电泳技术优化

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2010
【目的】 优化双向凝胶电泳的实验步骤,总结出一套适用于原发性肝癌组织的双向凝胶电泳技术65377;【方法】 对双向电泳实验中的关键环节:样本处理65380;上样方法65380;聚焦条件等进行研究与优化,考马斯亮蓝染色后进行凝胶图像比较65377; 【结果】 采用7 mmol /L尿素65380;2 mol /L硫脲65380;40 g/L CHAPS65380;100 mmol /L DTT65380;5 g/L (pH 3-10) IPG buffer,1 mmol /L PMSF作为裂解液 ...
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盘状红斑狼疮皮损角质形成细胞的蛋白组学初步分析

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008
【目的】建立盘状红斑狼疮皮损和正常皮肤角质形成细胞的双向电泳图谱,分析二者蛋白质的表达差异及特点。【方法】运用固相pH梯度双向凝胶电泳分离6例盘状红斑狼疮患者皮损及正常皮肤角质形成细胞总蛋白,考马斯亮蓝染色后用ImageMaster 2D图象软件比较分析,识别差异蛋白。【结果】盘状红斑狼疮皮损和正常对照电泳图谱平均蛋白点分别为1566±32和1682±38,平均匹配点数为1286±14 和1314±21,匹配率为82.12%和78.12%。分辨差异蛋白点共22个,11个在皮损高表达,2个在皮损组低表达 ...
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