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双向凝胶电泳-飞行时问质谱法分析促癌剂TPA诱导NIH3T3细胞表达变化的蛋白质
【目的】寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质,为阐明TPA 在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。(方法l用TPA刺激NIH3T3细胞,分别提取实验组和对照组 的NIH3T3细胞的总蛋白质,通过聚丙烯酰胺凝胶双向电泳,硝酸银染色后用软件分析寻找差异表达的蛋白质, 并对差异蛋白质进行质谱鉴定。(结果l软件分析显示TPA处理后的NIH3T3细胞中有明显的差异表达蛋白质, 质谱鉴定表明TPA处理后,表达上调的蛋白质有线粒体基质蛋白Pl前体、微管蛋白beta-5链 ...
江培洲
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【目的】应用精子膜蛋白亲和层析柱分离金黄地鼠前列腺精子结合蛋白,并用二维电泳和质谱对金黄地鼠前列腺精子膜结合蛋白进行初步分析。【方法】应用附睾精子膜亲和层析柱纯化前列腺精子结合蛋白,采用二维凝胶电泳对纯化的前列腺精子膜结合蛋白进行蛋白分离和图像分析,并结合基质辅助激光解吸附电离飞行时间质谱分析及数据库搜索从而鉴定部分蛋白质斑点;RT—PCR检测已鉴定蛋白在前列腺及未受精卵子中的mRNA的表达。【结果】附睾精子膜蛋白亲和层析柱可纯化出前列腺结合蛋白,前列腺附睾精子膜蛋白结合蛋白的二维凝胶电泳蛋白图谱 ...
骆建民, 谢江新, 王俐
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本发明公开了一种具有多孔结构的无电渗流电泳柱及其制备方法,首先将毛细管柱用双官能团试剂作预处理,然后将双甲基丙烯酸乙酯、甲基丙烯酸丁酯,致孔剂按10-20%、15-30%、50-70%比例混合。由偶氮二异丁腈引发在经双官能团处理过的毛细管中聚合,然后将毛细管用乙腈冲洗,除去柱内残余的单体。该电泳柱具有特殊高分子网络结构,可用于毛细管区带电泳,凝胶电泳,电色谱,等电聚焦等多种分离模式 ...
平贵臣 +3 more
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原肌球蛋白、丙酮酸激酶在急性早幼粒细胞白血病耐药细胞中表达上调
目的应用蛋白质组学方法筛选人急性早幼粒细胞白血病(APL)维甲酸敏感细胞株(NB4细胞株)和维甲酸耐药细胞株(NB4-R1细胞株)的耐药相关蛋白。方法利用双向凝胶电泳技术检测,比较NB4和NB4-R1细胞株的总蛋白,建立二维凝胶电泳(two-dimensional gel electrophoresis,2-DE)图谱。从多个差异蛋白质点中选择出2个在NB4-R1细胞株中表达明显上调的蛋白质点进行MALDI-TOF-MS生物质谱分析 ...
孙明莉 +4 more
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目的以蛋白质组学相关技术进行初步筛选人源性大肠癌Fab段噬菌体抗体库,建立一种寻找特异性大肠癌抗原蛋白及相应的噬菌体抗体的方法。方法以二维凝胶电泳分离大肠癌组织和正常大肠粘膜组织蛋白组并将获得的2-DE凝胶电转至PVDF膜。然后以大肠癌组织匀浆为靶抗原对我们构建的人源性大肠癌Fab段噬菌体初级抗体库进行三轮淘洗,再用富集抗体库和PVDF膜进行Western-Blot印记实验。结果经Western-Blot印记实验我们发现了至少八个大肠癌表达而正常大肠粘膜不表达的有噬菌体抗体特异性结合活性的抗原蛋白 ...
王旭东 +4 more
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提取新疆沙冬青叶片中蛋白质受到脂类、酚类等次生代谢产物的干扰,针对这种现象,进行了组分提取优化方法和双向电泳技术的改进.实验分析表明.用已醚淋洗完整叶片,50 mmol·L-1 Tris-HCl缓冲液,上样量240μg(7 cm胶条),考马斯亮蓝染色等方法可很大程度增加提取可溶性蛋白含量,结合丙酮-三氯乙酸的沉降 ...
YIN Lin-ke +5 more
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对诸葛菜(Orychophagmusviolaceus)花粉不同发育时期蛋白多肽进行双向电泳,结果发现花粉发育的3个时期出现蛋白多肽点的数量为:单核期121个,二核期192个,三核期275个.3个时期共有(指等电点和分子量相同)的蛋白多肽点有100个.各时期特有的蛋白多肽点分别为:单核期9个,二核期15个,三核期110个.三核期蛋白多肽点数量和特有蛋白多肽点数量的大量增加,说明诸葛菜花粉发育晚期蛋白表达异常活跃,为受精提供了物质上的准备.同时还发现不同发育时期的花粉,其相应蛋白多肽的含量有增有减.
王健美, 李旭峰, 吴俊, 刘智慧
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目的 探讨血红蛋白H病复合β地中海贫血 ( β 地贫 )的实验诊断。 方法 用血红蛋白电泳对患者作血红蛋白组份定量测定 ,红细胞形态观察协助鉴别诊断 ,PCR扩增作α与 β地贫基因分型 ,DNA测序用于检测αCS 基因突变位点。结果 先证者血红蛋白电泳检出微量HbBart’s与HbConstantSpring(HbCS) ,但未发现HbH带 ,常法PCR扩增仅检测 SEA基因与ⅣS Ⅱ 6 5 4位点突变双杂合子 ,DNA测序结果显示 ,无缺失的α珠蛋白基因上αCS 位点存在T→C突变 ...
吴教仁, 向筑
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病例简介 李某某,女24岁,因关节痛一年余,浮肿伴心悸半年,于1984年8月25日住院,体检 T 37℃,P120次/分,BP 11.7/8Kpa。颜面及下肢轻度浮肿;心界叩诊向双侧扩大,心率120次/分,律齐,未闻及杂音;腹水征阳性;双肾区无压痛及叩击痛。尿常规蛋白(+)~(++),白细胞(++),颗粒管型(++);尿纤维蛋白降解产物3.2ug/ml,血沉80mm/h。血清蛋白电泳 白旦白39.32%,r球旦白36.36%,血IgG29.2mg/ml;补体:C30.56mg/ml,类风湿因子 ...
王绍武
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目的 通过分析、纯化囊液抗原 ,筛选高免疫反应性和高特异性抗原组分 ,用于囊虫病免疫诊断。 方法 用分辨率极高的双向电泳法对囊液抗原进行分离、纯化 ,并通过免疫印记 ,用囊虫病人血清、包虫病人血清和其它异源血清筛选特异性抗原组分 ,为建立新一代免疫学诊断方法奠定基础。 结果 得到了等电点为 9 4,分子量为14KD和 16 6KD两组抗原组分 ,特异性达 10 0 % ,并且仅被急性感染的囊虫病人血清识别 ,而不被囊虫完全钙化病人血清识别。 结论 得到了高免疫反应性和高特异性的蛋白纯品 ...
王丽娜,葛凌云,董彩华,许宏秀,刘玉冰,李桂萍,缪峰,李惠
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