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双向凝胶电泳-飞行时问质谱法分析促癌剂TPA诱导NIH3T3细胞表达变化的蛋白质
【目的】寻找并鉴定在TPA处理后小鼠成纤维细胞NIH3T3中表达发生变化的蛋白质,为阐明TPA 在诱导细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。(方法l用TPA刺激NIH3T3细胞,分别提取实验组和对照组 的NIH3T3细胞的总蛋白质,通过聚丙烯酰胺凝胶双向电泳,硝酸银染色后用软件分析寻找差异表达的蛋白质, 并对差异蛋白质进行质谱鉴定。(结果l软件分析显示TPA处理后的NIH3T3细胞中有明显的差异表达蛋白质, 质谱鉴定表明TPA处理后,表达上调的蛋白质有线粒体基质蛋白Pl前体、微管蛋白beta-5链 ...
江培洲
doaj
Studies on AOX and protein complexes of mitochondria (Arum maculatum) [PDF]
氧化磷酸化是需氧细胞生命活动的主要能量来源,真核生物的电子传递和氧化磷酸化都在细胞的线粒体内膜发生作用。与动物的电子传递链不同,除细胞色素外,植物线粒体还有其他的末端氧化还原酶,其中最重要的为交替氧化酶(AOX),具有抗氰化物的特征。AOX普遍存在于高等植物线粒体中,定位于线粒体内膜,属于一种双铁离子羧基蛋白,在有活性的单体和不具活性的二聚体之间互相转化。它在天南星科植物的佛焰花序中含量特别丰富,开花时能使花序温度大幅度提高,体现出该种酶的时空特征。AOX在花序发育中的表达状况和调控机制目前仍不清楚 ...
叶律
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【目的】 找出有坐骨神经痛的腰椎间盘突出症患者血清蛋白质组最明显的改变,揭示椎间盘突出可能的病理机制65377; 【方法】 选择有坐骨神经痛的腰椎间盘突出症患者10例作为病例组,志愿者10例作为对照组,取血,提取分离纯化血清蛋白,双向电泳,找到表达上差异最明显蛋白质,进行质谱鉴定65377;所得差异蛋白应用酶联免疫吸附试验对另外10例腰椎间盘突出症患者及10例正常人血清表达浓度进行检测65377; 【结果】 在双向电泳图谱上有6个蛋白质的表达在两组间存在明显差异65377 ...
doaj
采用改良的TCA/丙酮法直接提取牙鲆肝脏蛋白质组,并采用双向凝胶电泳技术予以分离.实验结果表明:经氯化镉诱导后,牙鲆肝表达出16个差异蛋白质(斑点),其中4个斑点上调,2个斑点下调,6个斑点消失,新增4个斑点;并且蛋白质斑点在凝胶上的分布表现出较高的重复性.一旦这些差异蛋白质点在双向凝胶电泳图谱上实现标准指纹化后 ...
朱金勇 +4 more
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【目的】 用蛋白组学方法,通过对膝关节骨关节炎患者及正常人群血清蛋白的比较,寻找差异表达蛋白并探讨其与骨关节炎致病机理的关系65377; 【方法】 选取2007年10月到12月10例在中山大学附属第三医院骨科住院治疗的膝关节骨关节炎患者为实验组;10名性别相同,年龄65380;身体质量指数值相约的健康志愿者为对照组,分析2组双向电泳结果,并对差异表达蛋白进行质谱鉴定65377; 【结果】 通过双向电泳图普比较发现7个差异表达蛋白,其中6个在关节炎组中呈低表达,1个呈高表达65377;经质谱鉴定为分别为 ...
doaj
1983年,我室建立了两株能分泌抗登革热Ⅱ型(DEN-2)病毒单克隆抗体(MCAb)的杂交瘤细胞株。本文进一步分析了这两株McAb的若干特性。包括①两株McAb与DEN-2病毒感染的C6/36细胞裂解物进行双向免疫抗散,形成融合的沉淀线;②两株McAb都能沉淀DEN-2病毒感染的C6/36细胞裂解物中的分子量约为60K的抗原;③这两株McAb能抑制由蔗糖密度梯度离心纯化的DEN-2病毒的红细胞凝集性;④对DEN-2病毒感染的C6/36细胞作间接免疫荧光染色,呈膜抗原染色阳性。这些结果表明 ...
吴美雄
doaj
Studies on cell surface proteome of key harmful algal bloom species isolated from the coast of China Sea [PDF]
东海原甲藻(ProcentrumdonghaienseLu)和链状亚历山大藻(Alexandriumcatenella)是中国近海两种重要的有害赤潮生物,常形成大规模的赤潮,已对海洋生态系统、沿海养殖业和人民健康构成了严重威胁。本研究以这两种赤潮生物为模式种,运用免疫荧光标记技术、现代蛋白质组技术、免疫蛋白质组技术和生物质谱技术等研究了这两种赤潮生物细胞表面蛋白质组,制备了高特异性细胞表面抗体,分离、确认了细胞表面蛋白,并对细胞表面蛋白进行了鉴定 ...
黄旭光
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The comparative proteomic study of potential toxic Pseudo-nitzschia (Bacillariophyta) —inverstigation of toxin-related proteins [PDF]
拟菱形藻(Pseudo-nitzschia)是少数能够产生毒素的硅藻之一。它产生一种神经性毒素-软骨藻酸(Domoicacid,DA),进而引发记忆丧失性贝毒(Amnesicshellfishpoisoning,ASP),而其产毒机理却尚未得以明确阐述。研究发现拟菱形藻产毒存在3个特点:a)不同种产毒能力不同;b)同种不同株系产毒能力不同;c)不同地理株系的产毒能力不同。 本论文首先运用光学和电子显微镜对不同地理株系的四种拟菱形藻进行了形态学观察比较和特征描述;其次采用高效液相色谱(HPLC ...
杨阳
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Study on HMW-PAH metabolic mechanism in Novosphingobium pentaromativorans US6-1 isolated from marine environment [PDF]
多环芳烃是一类在环境中有广泛分布的有机化学污染物,具有“三致”(致畸、致突变、致癌),通过食物链的传递会对生态环境和人体健康造成极大危害。微生物的降解与转化是消除PAHs污染的有效方式。研究降解菌的遗传控制、探索代谢途径、解析相关酶系和功能基因,从而构建基因工程菌株用于污染环境的生物修复是当前的研究热点。 本论文对一株从Ulsan海湾(韩国)沉积物中筛选到的高效PAHs降解菌NovosphingobiumpentaromativoransUS6-1对菲、芘和苯并芘(三环至五环PAH)降解特性 ...
吕意华
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Proteomics Approach for Outer Membrane Proteins from Important Gram Negative pathogens [PDF]
采用蛋白质组学、基因工程技术、生物信息分析等研究方法,对10种重要的革兰氏阴性病原菌的外膜蛋白进行了较系统的研究,成功建立了6种细菌的分子表达图谱,重点筛选和鉴定了与盐调节、耐药和交叉抗原相关的蛋白质组。在对外膜蛋白质提纯方法比较的基础上、应用月桂酰肌氨酸钠二步法获得的高纯度外膜蛋白质,建立六种革兰氏阴性菌外膜蛋白的分子解剖图谱。通过对已知蛋白的网上模拟及鉴定、双向电泳图谱的比较,建立了一种对未进行全基因序列测定的细菌进行PMF鉴定的方法,并在溶藻弧菌及荧光假单胞菌这两种菌中得到了成功的应用 ...
徐常新
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