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目的探讨去除高丰度蛋白质对脑脊液差异蛋白鉴定的影响。方法应用Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱去除脑脊液中含量最多的高丰度蛋白质-白蛋白,然后对去除白蛋白前后的脑脊液样本,以及经过Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱吸附后洗脱下来的脑脊液样本,分别进行双向凝胶电泳,对比分析各样本差异蛋白点的分布情况。结果 Cibacron-blue-3G-A亲和层析柱通过结合去除了脑脊液中的大部分白蛋白,但是同时也去除了一些其它可能有意义的蛋白质,而且在去除白蛋白后 ...
金涛, 张凯, 孙莉, 张颖
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为了优化适用于甘蔗叶片蛋白质的分离纯化方法与双向凝胶电泳体系,比较了3种蛋白质分离纯化方法对甘蔗叶片蛋白质的SDS-PAGE电泳图谱、蛋白质提取率以及双向凝胶电泳的影响,同时优化了双向电泳条件。结果显示,SDS提取法的SDS-PAGE电泳图谱中条带较少,蛋白质沉淀杂质多,效果差;三氯乙酸/丙酮沉淀法蛋白质沉淀得率高,但沉淀复溶性差,蛋白质溶液浓度低,难于满足双向电泳大胶的高上样量要求;酚抽提法蛋白质沉淀得率虽低,但沉淀纯度高、复溶性好,蛋白质溶液浓度高,是适合双向电泳分离纯化甘蔗叶片蛋白质的理想方法 ...
周桂 +6 more
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应用蛋白质组学及噬菌体抗体库技术筛选大肠癌特异性抗原及抗体方法的建立
目的 构建大肠癌患者转移淋巴结Fab段噬菌体抗体库并结合蛋白质组学相关技术进行初步筛选大肠癌特异性抗原蛋白及相应的噬菌体抗体。方法 取大肠癌患者系膜转移淋巴结 ,提取总RNA ,RT PCR扩增重链Fd和轻链cDNA ,将扩增产物依次插入载体pComb3,电转感受态大肠杆菌XLI Blu ,加噬菌体VCSM13超感染。以二维凝胶电泳分离大肠癌细胞和正常大肠粘膜蛋白组并转至PVDF膜 ,将银染胶图用Melanie 112 DE分析软件进行分析 ,以大肠癌组织匀浆为靶抗原对初级抗体库进行三轮淘洗 ...
王旭东 +4 more
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本发明涉及毛细管电泳检测器,特别是一种可实现双检测响应同步的毛细管电泳荧光—非接触电导组合检测器,包括荧光检测系统及非接触电导检测系统,两个检测系统共用一个检测池;其中荧光检测系统包括激发光源、光纤、滤光片、光电转化器件及检测池,非接触电导检测系统包括激励源、管状电极、信号处理电路板及检测池;在检测器内部还固设有基座、其上设有限位槽,限位槽内开有光阑;光纤及检测池分别置于限位槽内,在限位槽内、检测池的两侧设有管状电极。本发明是将荧光检测器和非接触电导检测器集成在一起,共用一个检测池可实现响应同步 ...
杨丙成, 谭 峰, 关亚风
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【: 目的】研究低剂量三氯乙烯对人 L-02 肝细胞蛋白质表达谱的影响, 以助于阐明三氯乙烯引起细 胞早期应答反应的分子机制。【方法】L-02 肝细胞暴露于低剂量( 3 μmol/L) 三氯乙烯24 h 后, 提取细胞总蛋 白, 双向电泳分离蛋白质, 软件分析凝胶图像, 基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOFMS) 对相关异常变化斑点进行鉴定。【结果】和对照组比较, 低剂量三氯乙烯处理后L-02 肝细胞蛋白质表达发 生改变, 初步鉴定出7 个差异蛋白 ...
黄海燕 +5 more
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采用模拟电荷法计算了500kV瓷柱式双断口SF_6断路器“Y”形和“T”形布置型式的空间三维电场,绘出了两种布置型式中轴向剖面场域分布图及断路器触头表面环向场强分布图 ...
周侗, 林莘
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目的初步分析胶质瘤细胞分泌的exosome蛋白组成,探讨胶质瘤来源exosome的潜在免疫调节功能,从而为进一步利用exosome对胶质瘤进行免疫治疗提供理论依据。方法采用差速离心法从U251胶质瘤细胞培养上清液和Ⅲ级星形胶质瘤囊液中分别提纯exosome,用透射电镜鉴定;利用二维电泳分离、分析exosome内蛋白质,并用质谱技术鉴定了部分蛋白质。结果胶质瘤细胞可以产生exosome,其平均直径约100 nm。二维电泳图显示U251细胞分泌的exosome含有270个蛋白点,与数据库相符的有66个 ...
金铮 +4 more
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【目的】 找出有坐骨神经痛的腰椎间盘突出症患者血清蛋白质组最明显的改变,揭示椎间盘突出可能的病理机制65377; 【方法】 选择有坐骨神经痛的腰椎间盘突出症患者10例作为病例组,志愿者10例作为对照组,取血,提取分离纯化血清蛋白,双向电泳,找到表达上差异最明显蛋白质,进行质谱鉴定65377;所得差异蛋白应用酶联免疫吸附试验对另外10例腰椎间盘突出症患者及10例正常人血清表达浓度进行检测65377; 【结果】 在双向电泳图谱上有6个蛋白质的表达在两组间存在明显差异65377 ...
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