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, 2008 本研究为筛选胆管癌癌变的标志物,开发相应的药物研究,通过对胆管癌血清双向电泳的样品处理、pH范围、上样量的选择、电泳参数的设置和SDS凝胶电泳染色方法等进行比较优化.确定了样品预处理后通过Millpore公司推出的Montage Albumin Deplete kit去除血清中高丰度的白蛋白,再经丙酮沉淀,用裂解液溶解后,采用pH3.5~10与pH5~8的两性载体电解质以体积比1∶4混合使用,100μg的上样量,12.5%的SDS-PAGE胶,16 mA/胶进行双向电泳的电泳体系 ...
康劲翮 +7 more
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应用蛋白质组学及噬菌体抗体库技术筛选大肠癌特异性抗原及抗体方法的建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 构建大肠癌患者转移淋巴结Fab段噬菌体抗体库并结合蛋白质组学相关技术进行初步筛选大肠癌特异性抗原蛋白及相应的噬菌体抗体。方法 取大肠癌患者系膜转移淋巴结 ,提取总RNA ,RT PCR扩增重链Fd和轻链cDNA ,将扩增产物依次插入载体pComb3,电转感受态大肠杆菌XLI Blu ,加噬菌体VCSM13超感染。以二维凝胶电泳分离大肠癌细胞和正常大肠粘膜蛋白组并转至PVDF膜 ,将银染胶图用Melanie 112 DE分析软件进行分析 ,以大肠癌组织匀浆为靶抗原对初级抗体库进行三轮淘洗 ...
王旭东 +4 more
doaj
Over-Expression of AOX in Escherichia coli and Purification [PDF]
, 2006 交替氧化酶（Alterativeoxidase,AOX）是广泛存在于植物、藻类、真菌和原生生物线粒体内膜的交替呼吸途径终端氧化酶，从主呼吸链的辅酶Q分岔，氧化辅酶Q、还原氧分子生成水。交替氧化酶氧化过程没有质子穿膜运动、不产生膜电子势差，没有ATP产生，能量以放热方式散发。交替氧化酶是双铁羧酸蛋白质家族的膜蛋白质，至今只有其二级结构的几种假设模式，最新的模式认为交替氧化酶是膜界面蛋白质，不是跨膜蛋白。交替氧化酶的3级结构还不清楚，原因是交替氧化酶分离后不稳定 ...
王雅英
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运用蛋白质组学技术研究结肠粘膜、腺瘤及腺癌组织蛋白的差异表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2008 ［目的］通过比较结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌组织之间的蛋白质组表达差异，寻找结肠腺癌相关的蛋白质，筛选结肠癌早期诊断的分子标志物。［方法］运用比较蛋白质组学技术，对8例结肠癌患者（伴有腺瘤）的正常粘膜、腺瘤、腺癌组织提取的总蛋白进行双向电泳（2-D），分析凝胶图片选择两两间差异表达超过2倍的蛋白质进行MALDI-TOF/TOF质谱分析和生物学信息分析。［结果］成功建立结肠正常粘膜、腺瘤、腺癌的双向凝胶电泳图谱，在凝胶电泳图谱中平均蛋白质斑点数分别为3066 、2986和3289 ...
doaj
Differential Protein Analysis of Rice Chalkiness During Grain Formation [PDF]
, 2015 随着人民生活水平的提高，对稻米品质的要求也越来越高。垩白性状是评价稻米外观品质的重要指标，对其研究有助于稻米品质的改善。本研究选用的材料为优质低垩白品系珍佳B（ZJB，即珍汕97B与佳辐占的杂交后代）和高垩白亲本珍汕97B（ZB），以及从以珍佳B做母本、珍汕97B为轮回亲本进行杂交构建的近等基因系中筛选出来的高低垩白水稻株系，运用蛋白质组学技术方法对其籽粒形成各个时期的蛋白表达情况进行研究。其主要的研究结果如下： （1）研究材料垩白检测结果：2013年早季ZJB的垩白粒率为10%、垩白度为4 ...
刘青青
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的初步分析胶质瘤细胞分泌的exosome蛋白组成,探讨胶质瘤来源exosome的潜在免疫调节功能,从而为进一步利用exosome对胶质瘤进行免疫治疗提供理论依据。方法采用差速离心法从U251胶质瘤细胞培养上清液和Ⅲ级星形胶质瘤囊液中分别提纯exosome,用透射电镜鉴定;利用二维电泳分离、分析exosome内蛋白质,并用质谱技术鉴定了部分蛋白质。结果胶质瘤细胞可以产生exosome,其平均直径约100 nm。二维电泳图显示U251细胞分泌的exosome含有270个蛋白点,与数据库相符的有66个 ...
金铮 +4 more
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Differential proteomics study of Microcystis aeruginosa in diverse N/P concentrations [PDF]
, 2006 铜绿微囊藻(Microcystisaeruginosa)是富营养化湖泊和水库中形成“水华”的主要蓝藻。分子生物学技术和蛋白质组学的快速发展为深入研究赤潮形成及其性质提供了重要手段。赤潮对人类正常生活和环境的影响日益严重，由于赤潮发生是多方面原因引起的，研究常见赤潮藻种在特定环境中的蛋白质组差异，从中寻找出有价值的蛋白质分子水平上的差异，这对一些赤潮的防治和治理具有重要意义。本文运用蛋白质组学及生物信息学技术方法，研究铜绿微囊藻全蛋白分别在不同浓度氮/磷营养盐条件下变化的情况 ...
钱方
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的应用蛋白质组学相关技术筛选多发性骨髓瘤（MM）患者尿液中差异表达的蛋白质,寻找与MM诊断相关的疾病标志物。方法收集MM组、疾病对照组（肾脏疾病）、健康对照组尿液各8例,TCA沉淀法提取尿液蛋白质后建立双向凝胶电泳图谱;Image Master软件筛选差异蛋白质;利用MALDI-TOF-MS获得肽质量指纹图谱,通过Mas-cot软件进行数据库搜索,得到蛋白质鉴定结果。结果筛选出57个差异蛋白点,43个在MM组上调,14个下调。对其中30个差异蛋白点进行分析,鉴定出甘露聚糖结合凝集素相关蛋白19 ...
房亚哲 +7 more
doaj
, 2002 人类基因组计划即将提前完成，人类将进入后基因组——功能基因组时代。作为以功能执行者－蛋白质为研究对象的蛋白质组学将是21世纪整体细胞生物学新的最重要的内容,而且将为医药、农业和工业的革新提供崭新的思路。 论文采用蛋白质组学方法对水产养殖动物的重要致病菌——嗜水气单胞菌的分子解剖图谱、免疫原性蛋白、与传代和耐药有关的功能蛋白质组学进行较系统的研究。 实验首先初步构建了一张嗜水气单胞菌总蛋白质的分子解剖图谱，通过对124个蛋白质的肽质量指纹图谱分析，鉴定了40个蛋白质，其中17个为嗜水气单胞菌的蛋白 ...
吴谋胜
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