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目的 初步建立、优化用于胃癌蛋白质组研究的双向凝胶电泳技术和计算机图像分析技术 ,提高其分辨率及重复性 ,得到一种分析胃癌蛋白质组双向凝胶电泳新方法。方法 提取胃癌组织中蛋白质 ,对以固相pH梯度为第一向双向电泳的关键因素与环节 ,如样品处理、电泳参数和凝胶浓度进行一系列优化。进一步采用双向凝胶电泳分离胃癌组和正常组总蛋白质 ,银染显色、图像分析软件分析电泳图谱。结果 重复性实验结果显示同组样品在 3次不同实验中所得蛋白质斑点数目相对标准差 (变异系数平均值 % ) :胃癌组和正常组分别为 2 3.0 ...
赵吉生, 房学东, 冯也
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胃癌细胞SGC-7901双向电泳系统的建立及优化 [PDF]
文蛤抗癌活性多肽对多种癌细胞有抑制效应,具有良好的药物开发前景.双向电泳技术的进步为药物的开发提供了理想的技术平台.我们通过对胃癌细胞SGC-7901总蛋白双向电泳技术的建立以及初步优化对一些环节如样品处理的方法、上样量的选择、电泳参数的设置、凝胶浓度和SDS凝胶电泳染色方法等进行了优化得到了分辨率较好的胃癌细胞的蛋白图谱 ...
陈清西, 冷波, 贺量, 康劲翮
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目的建立优化的大鼠肾移植急性排斥反应异基因移植物蛋白质组学研究双向电泳技术体系。方法利用双向电泳技术研究大鼠同种异基因移植3d、7d后肾脏组织蛋白质,对IPG胶条范围、样品制备、上样量及染色方法进行比较,优化实验条件。结果获得了大鼠肾移植急性排斥反应肾脏组织蛋白质组电泳图谱。结论建立了大鼠肾移植急性排斥肾脏组织蛋白质组学研究地双向电泳技术平台,为其他肾脏病学研究提供了一套切实可行的的技术方案。
吕天羽 +7 more
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佳辐占和广陆矮4号水稻叶片蛋白质的双向电泳比较研究 [PDF]
应用双向电泳技术研究比较两种不同品质水稻(佳辐占和广陆矮4号)叶片的蛋白质组分的差异.两种水稻叶片提取的蛋白质的双向电泳图谱斑点清晰,形态规则.采用考马斯亮蓝染色获得约400个斑点,银染图谱约800个斑点.两种水稻的蛋白质图谱考马斯亮蓝染色图谱存在5个显著差异点 ...
陈清西, 林建峰, 石艳
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目的比较大鼠血清样本的4种制备方法对血清蛋白质双向凝胶电泳(2-DE)分离效果的影响。方法分别用直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理大鼠血清样本,双向电泳分离血清蛋白;硝酸银染色;image master5.0软件分析所得蛋白质斑点。结果对直接溶解法、试剂盒沉淀除杂质、改良的TCA/丙酮法和采用去白蛋白及免疫球蛋白试剂盒预处理的大鼠血清样本进行双向电泳分离,经3次重复性检测,凝胶的平均蛋白质点数分别为610±54,683±46,735±42和865 ...
张彬, 谭岩
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目的建立脊髓缺血再灌注损伤双向凝胶电泳图谱,对照观察蛋白质的差异表达。方法建立脊髓缺血再灌注损伤模型,获取损伤和正常脊髓的蛋白质组双向电泳荧光图谱,观察差异蛋白的不同时间点的变化规律,建立缺血再灌注24 h与正常脊髓蛋白质组的匹配差异图谱,鉴定差异蛋白。结果成功建立损伤和正常的双向电泳荧光图谱和肽质量指纹图谱,比较再灌注损伤24 h组与正常组可检测到46个蛋白差异点,鉴定出10个差异蛋白。结论损伤24 h组较其他组变化明显,与正常脊髓的蛋白质组存在明显差异。
朱本清, 杨小玉, 顾锐, 邱宾涛
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以适宜参数的电流作用于神经中枢而研究其效果,是一项常用的电生理学方法。在直接电刺激中枢神经系统时,单向波容易产生极化作用,损伤神经组织,妨碍实验研究的正常进行,而双向波则可避免极化损伤作用,因此,目前国外关于中枢神经系统电刺激的实验研究一般已不再使用单向波,而广泛采用双向方波电刺激 ...
魏景汉
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Effect of chromium stress on protein profiles in saffron(铬胁迫对西红花叶片蛋白表达谱的影响)
铬是植物的非必需元素,对植物的生长发育具有显著的抑制作用.采用双向电泳和质谱技术,研究了铬胁迫对西红花叶片蛋白表达的影响.通过质谱技术,成功鉴定出9个在铬胁迫后下调表达的蛋白,分别为细胞分裂循环蛋白48、ATP合成酶α亚基、核酮糖二磷酸羧化酶长链(2个)、未知蛋白、核酮糖二磷酸羧化加氧酶、蛋白酶体α 亚基、铁蛋白和蛋白酶体β亚基;6个上调表达的蛋白,分别为蔗糖合酶、真核起始因子4A、α-1,4-葡聚糖蛋白合成酶、1-氨基环丙烷-1-羧酸氧化酶、异黄酮还原酶类似物IRL和未知蛋白 ...
RAOJunfeng(饶君凤) +2 more
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目的建立视网膜光感受器细胞外基质(Interphotoreceptor matrix,IPM)蛋白质sialoprotein associated with cones and rods(SPACR)分离和纯化方法。方法分离视网膜IPM,提取蛋白质组份,通过离子交换、凝胶过滤层析等技术分离纯化SPACR,并通过双向电泳及western blot技术验证。结果通过双向电泳技术及western blot结果显示分离纯化后仅有等电点在5-5.5,分子量约在150 kDa的单一条带和SPACR抗体反应 ...
赵劲松, 黄岚峰, 王淑荣
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目的比较海洛因对大鼠C6胶质瘤细胞的双向电泳图谱差异,从蛋白质水平初步探索阿片类毒物-海洛因的作用机制。方法提取对照组与海洛因组C6胶质瘤细胞的蛋白质,以固相pH梯度等电聚焦为第一向,SDS-PAGE垂直电泳为第二向进行2-DE。以图像分析软件ImageMaster V 5.0分析电泳图谱。结果将对照组与海洛因组C6胶质瘤细胞的2-DE图谱匹配后,检测到570个蛋白点,差异大于1.5倍的斑点有29个,其中20个下调,9个上调。结论初步建立了大鼠C6胶质瘤细胞的蛋白质组学分析方法 ...
阚慕洁 +4 more
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