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四川大学学报. 自然科学版, 2015 本研究以猪作为研究模型,对GHR基因启动子区开展了克隆、转录因子结合位点分析和启动子活性鉴定.结果表明:家猪GHR基因或由两个启动子(GHR-P1和GHR-P2)控制.GHR-P1的部分核苷酸序列与牛、羊对应核苷酸序列具有较高的同源性,但功能分析显示其启动子活性较低.针对GHR-P2的实验结果表明其具有典型的GHR组成型启动子特征,荧光素酶报告实验表明其具有启动子活性,因此我们推测本次克隆获得的GHR-P2是猪GHR的组成型启动子.
徐敏 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建SLPI基因启动子驱动下EGFP表达载体并验证该启动子在非小细胞肺癌细胞株中的特异调控活性。方法通过PCR方法从人外周血基因组中扩增SLPI启动子,经序列分析后,利用pcDNA3.1（+）和pEGFP构建SLPI启动子调控下EGFP表达载体,以脂质体介导转染入人宫颈上皮癌Hela、肺腺癌A549、SPC-A1和肝细胞癌HepG2细胞中,经G418稳定筛选后,在荧光显微镜下观察该启动子在非小细胞肺癌细胞株中的特异调控EGFP表达的活性 ...
杜晓媛 +4 more
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两种不同AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒获得及鉴定
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 构建及包装由全长 5 1kbAFP启动子和低氧反应元件 （HRE）与 0 3kbAFP启动子两者组合的杂合0 3kbAFP启动子控制下表达HIVvpr基因的两种重组非复制型腺病毒。方法 采用细菌内同源重组腺病毒载体制备方法和PacI酶切、PCR、SouthernBlot鉴定方法。结果 构建及包装出由这两种AFP启动子控制下表达HIVvpr基因的重组非复制型腺病毒 ,经PacI酶切、PCR和SouthernBlot基因整合分析证明构建成功。结论 我们成功构建了的全长5 ...
魏强 +4 more
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甘薯(Ipomoea batatas L.Lam.)基因启动子在根癌农杆菌中的作用
四川大学学报. 自然科学版, 1998 作者曾用自行构建的启动子探针型载体ｐＳＵＰＶ４，从甘薯（ＩｐｏｍｏｅａｂａｔａｔａｓＬ．Ｌａｍ．）总ＤＮＡ中克隆到了６５个在大肠杆菌中具有启动基因表达功能的ＤＮＡ片段．现研究发现，甘薯基因启动子片段在根癌农杆菌中也具有启动基因转录的功能，其启动功能的大小与启动子片段在大肠杆菌中启动卡那霉素抗性基因表达活性呈正相关，即原来卡那霉素抗性越高的，ＧＵＳ基因的酶活性越高．利用重组子ｐＩＢ２中插入片段所做的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交实验证实，该ＤＮＡ片段来源于甘薯基因组．
宋玉萍 +2 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的探讨载体、质粒转染剂量、启动子长度、细胞系以及检测仪器等因素对启动子分析实验的影响。方法采用化学发光法测定荧光素酶,EGFP荧光强度采用流式细胞仪。以上检测每组样品均设三复孔,并重复两次,所得结果进行t检验。结果选择不同的报告基因、载体、质粒转染剂量、启动子长度和细胞系得到不同的结果。结论载体、质粒转染剂量、启动子长度、细胞系的选择会对启动子分析的结果造成很大的影响,因此,在进行启动子分析前,应综合考虑上述因素,以达到更好的实验效果。
李慧萍, 姚兴伟, 郭楠, 杨曦明
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水稻RSSG8基因启动子与GUS融合基因的构建及在烟草中的瞬间表达
四川大学学报. 自然科学版, 2004 使用染色体步移(Genomewalking)法,从籼稻(Oryzasativasubsp indica)桂朝2号基因组中克隆到长度为471bp的水稻精细胞优势表达基因RSSG8的启动子片段R8PN,并进行了全序列测定和分析 该段序列中含有3个CAAT box,6个G box和多种植物顺式作用元件,但没有发现典型的TATA box,推测为一种特殊的启动子结构.为了鉴定RSSG8基因的基本启动子元件,将二条长度不同的5'端侧翼区缺失体(分别长471bp,260bp)定向插入载体pBI121中 ...
龚举成 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建调控人核心蛋白聚糖基因特异性在肺癌细胞A549内表达的基因表达载体,为进一步应用该基因进行肺癌靶向治疗的研究奠定实验基础。方法应用PCR技术从人外周血基因组中扩增肺癌细胞特异性表达的人分泌型白细胞蛋白酶抑制剂的启动子,利用基因重组技术将该启动子插入真核细胞表达载体pcDNA3.1（+）,替换该载体的CMV启动子与增强子序列,从而构建成由人分泌型白细胞蛋白酶抑制剂基因的启动子启动基因表达的基因表达载体。将人核心蛋白聚糖基因通过基因重组技术插入到上述载体人分泌型白细胞蛋白酶抑制剂基因启动子的下游 ...
吕俊锋 +3 more
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携带Egr-1启动子和Endostatin基因的腺病毒穿梭质粒构建及鉴定
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的构建含辐射敏感启动子Egr-1和人内皮抑素（endostatin）基因的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。方法利用RT-PCR方法从人胎肝中扩增出人endostatin cDNA序列,从T-Egr1质粒中扩增出Egr-1基因序列,并将它们连接到pMD19T质粒进行测序,利用基因重组技术构建含有辐射诱导启动子Egr-1的腺病毒穿梭质粒pshuttle-Egr1-Endostatin。结果经测序证实,获得的人endostatin基因和Egr ...
李艳博 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建卵巢特异启动子-1（ovarian-specific promoter,OSP-1）调控白介素-24基因（Interleukin-24,IL-24）表达的真核表达载体。方法通过RT-PCR方法从人外周血基因组中扩增IL-24基因片段,应用基因重组技术将0SP-1启动子片段插入到pcDNA3.0真核表达载体,替换pcDNA3.0载体的CMV启动子与增强子序列,然后将克隆的IL-24基因片段插入到pcDNA3.0-OSP-1载体的OSP-1启动子的下游,从而构建成由OSP-1启动子调控IL ...
祝贺 +4 more
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四川大学学报. 自然科学版, 2015 为探究组蛋白H3K9me2催化酶G9a对甲基化诱导静止基因1(Target of Methylation-induced gene Silencing 1,TMS1)的表观调控作用,通过染色质免疫共沉淀实验检测G9a在TMS1基因启动子区域的结合情况,然后构建shRNA表达载体转入细胞敲低G9a,检测TMS1启动子区域组蛋白H3K9me2修饰程度与TMS1 mRNA表达水平.研究结果显示G9a在TMS1基因启动子区域有结合,敲低G9a后,TMS1基因启动子区域H3K9me2抑制性修饰程度降低 ...
衡鉴, 刘涛, 高江苓, 吴传芳
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