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作者在对背角无齿蚌外套膜中分离提纯到的一种酸性磷酸酶 (ACPase)的部分酶学性质进行研究的基础上 ,测定了该酶的亚基分子量为 6 1,80 0D ,等电点 (pI)为 6 .12 (2 5℃ ) ,并对其氨基酸组成进行了分析 .对ACPase的二级结构的圆二色谱 (CD)分析显示 ,酶分子中α 螺旋占 31.8% ,β 折叠占 4 2 .6 % ,β 转角 17.9% .对ACPase进行了化学修饰研究 ,初步认为组氨酸、丝氨酸、色氨酸和半胱氨酸有可能是该酶的功能基团 ...
魏炜, 张洪渊, 石安静
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建立了全二维液相色谱串联质谱分离分析模式,将质脂体色谱柱和ODS反相色谱柱作为二维分析色谱柱,二者通过一个连有两个0.5mL定量环的八通阀耦联。质脂体色谱柱上的馏分在反相色谱柱上分离后,直接进入紫外一检测器,然后经分流器分流后进入大气压电离质谱。将该体系用于银杏叶提取物的组成研究,共检测到至少41个组分,结合紫外一可见光谱和质谱信息,其中13个组分初步鉴定为银杏内酯B、银杏内酯C、白果内酯、槲皮素芸香糖苷、槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖基(1-2)-α-L-鼠李糖苷、槲皮素-3-O-卢-D ...
陈学国 +4 more
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加热处理后的沙冬青提取液依次经过DEAE-cellulose A52层析,Sephacryl S300层析,高效液相Poros20HP2层析和高效液相Source 15Q层析,分离纯化到抗冻蛋白amAFP28.amAFP28能修饰冰晶形态.在SDS-PAGE和IEF中,纯化的amAFP28显示单一蛋白染色带,其分子量约为28 kDa,等电点是6.68.经Schiff试剂检验,amAFP28不含碳水化合物.氨基酸组成分析表明,amAFP28富含亲水性氨基酸.圆二色谱(CD ...
王维香, 魏令波, 张虎
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黄精凝集素Ⅱ (PolygonatumcyrtonemaHua .LectinⅡ ,PCLⅡ )具有 32 3nm的荧光发射峰和 2 81.6nm的激发峰 .其远紫外圆二色谱 (CD谱 )显示 2 2 4nm负峰 ,分子中含 17.3%的α螺旋和 4 5.8%的 β折叠 .在 10mmol/L的SDS中 ,PCLⅡ完全丧失兔红细胞凝集能力及促T 淋巴细胞有丝分裂活性 ,CD谱呈现双负峰的α螺旋构象 ;去除SDS后 ,则呈无规卷曲构象 .此时 ,荧光发射峰红移而激发峰蓝移 ,PCLⅡ仍完全失活 ...
鲍锦库 +6 more
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借助内源荧光和圆二色谱分析 ,考察了几种不同的盐溶液 (CaCl2 ,NaCl,脲 ,三氯乙酸、二硫苏糖醇 )对水溶液中 33kD蛋白构象的影响 .以 2 95nm波长的光激发时 ,33kD蛋白具有330nm的荧光发射峰 ,表明 33kD蛋白所含唯一的2 4 1Trp位于分子内部的疏水部位 .CaCl2 、脲、三氯乙酸或二硫苏糖醇的存在 ,均会改变 33kD蛋白的内源荧光的强度和位置 ,而NaCl几乎无影响 .脲、二硫苏糖醇对 33kD蛋白的二级结构的影响较大 .因此维系 33kD蛋白构象的主要因素包括
刘洪, 杜林方
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利用E.coliBL21原核表达,纯化得到了His-hPin1融合蛋白,并研究了它的热稳定性.在中性条件下进行不同温度处理,SDS-PAGE分析表明,低于40℃处理不会影响His-hPin1的溶解性,50~100℃处理会使其部分变性而沉淀.荧光发射光谱研究表明,未处理的His-hPin1具有339 nm的荧光发射峰;热处理使荧光发射峰的位置变化,低于40℃处理对His-hPin1的荧光强度影响较小,50~100℃热处理使His-hPin1的荧光强度明显降低.圆二色谱研究表明,热处理对His ...
王敬章 +5 more
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水稻巯基蛋白酶抑制剂(CPI)圆二色性谱(CD)显示206nm和222nm处的双负峰,CPI分子以α 螺旋构象为主;当CPI与木瓜蛋白酶等摩尔结合后,CPI完全丧失抑制活性,复合物CD谱发生显著变化,α 螺旋含量降低.CPI具有较高的结构稳定性,但在100℃处理时间延长以及pH向酸碱两极变化时,其CD谱发生较大改变,α 螺旋含量减少;而抑制活性仅在pH>9时逐渐下降,在酸性条件下保持不变.用不同试剂修饰CPI分子中的巯基和二硫键,CPI的活性不受影响;DTT、PCMB修饰CPI,其CD谱发生显著变化 ...
荣艳珍 +7 more
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本设备属于一种物质样品分析装置,其结构是在液相色谱与气相色谱之间的接口装置,该装置由电动阀、调压阀、调流阀组成,其中电磁阀控制端与控制器联接,电磁阀与调压阀之间装有精密压力表,调压阀后面接调流阀,最后输出与气相色谱联接。优点:一种适用于二维色谱的通用接口,这种接口的使用模式是可以选择的。该接口以常规高效液相色谱与毛细管气相色谱联用为主,并可用于毛细管液相变色与毛细管气相色谱联用;同时应用该接口能实现二维气相色谱之切割与反吹操作并能直接进行双柱串了关气相色谱分离测定 ...
黄威东, 陈吉平
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填充毛细管液相色谱-毛细管气相色谱在线联用分析八角茴香挥发油
首次将填充毛细管高效液相色谱-毛细管气相色谱在线联用技术(μ-HPLC-CGC)用于分离分析八角茴香果实的挥发油成分。液相色谱选用氰基分析柱(250mm×0.32mm i.d.),正己烷-乙腈-二氯甲烷(体积比为80:8:12)为流动相,对挥发油样品做族组分分离,得到的5个族组分被依次存放在多位储存接口内,然后不分流分别转入毛细管气相色谱仪做详细分析。气相色谱柱由10m×0.53mm i.d.保留间隔柱和30m×0.53mm i.d.×1.0 μmSE-54分析柱组成 ...
王涵文 +4 more
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采用圆二色谱、荧光光谱,研究了黄精凝集素II(PolygonatumcyrtonemaHua.LectinII,PCLII)在4mol/L和6mol/L盐酸胍中,以及巯基修饰后,其活性和分子构象的变化关系.研究结果表明:PCLII是一种稳定的蛋白质,巯基修饰剂虽不影响其活性,但可使其分子构象发生变化,去除修饰剂后其结构部分能够恢复.在4mol/L盐酸胍中,PCLII活性及构象可发生很大变化,去除盐酸胍后其活性恢复;在6mol/L盐酸胍中,呈现典型的无规卷曲构象,活性完全丧失,去除盐酸胍后活性仍不能恢复 ...
吴传芳 +13 more
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