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慢病毒敲减质粒pLKO.1-hSRF的构建及鉴定 [PDF]
, 2018 目的:构建敲减人血清反应因子SRF基因的慢病毒质粒,为进一步研究SRF在口腔鳞状细胞癌中的作用提供工具。方法:利用Thermo Fisher公司RNAi网站设计出针对SRF基因特异性敲减的片段,然后通过对pLKO.1载体进行双酶切,胶回收纯化后,经T4连接酶将双酶切线性化载体与设计的目的片段进行连接,转化和质粒提取,采用双酶切以及测序的方法对重组质粒进行序列鉴定。利用293T细胞对构建正确的pLKO.1-hSRF质粒进行病毒包装后感染SAS口腔鳞癌细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定株,并通过Western ...
纪晴 +5 more
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实时荧光定量 PCR检测野生型p53介导蛋白磷酸酶mRNA 在非小细胞肺癌中的表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 荧光染料Ⅰ(SYBR GreenⅠ)是一种较为常用的非探针类定量PCR的方法,其结果具有一定特异性65377;本研究的目的是建立检测野生型p53介导蛋白磷酸酶(Wip1)mRNA的SYBR GreenⅠ实时定量PCR的方法,了解肺癌组织及其远癌正常肺组织中Wip1的表达水平,研究肺癌组织中Wip1的表达水平与各种临床病理特征之间的关系65377; 【方法】 利用相对定量的方法检测44例肺癌及相应远癌正常肺组织中Wip1 mRNA相对于β-actin mRNA的表达量,进行相对定量分析65377;
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2019 【目的】探讨囊性纤维化跨膜转导调节因子（CFTR）对内脏脂肪组织前脂肪细胞增殖和分化的调控作用。【方法】分别采用CFTR基因敲除小鼠（CFTRKO）4、8周龄及同周龄野生型对照鼠，分离内脏脂肪组织前脂肪细胞，采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）技术检测增殖分化转录因子表达变化。采用地塞米松-异丁基甲基黄嘌呤-胰岛素（DMI）诱导3T3-L1细胞建立前脂肪细胞分化模型，采用免疫印迹（Western blot）技术检测CFTR及分化因子蛋白表达变化；并进一步转染CFTR沉默及过表达病毒，采用免疫印迹 ...
晋晨晨 +3 more
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诱导耐药型宋内志贺菌中主动外排阻遏基因acrR、marR的变化
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2015 目的分析宋内志贺菌在被环丙沙星诱导耐药后其主动外排阻遏基因acrR、marR突变与表达量的变化。方法通过1/2MIC逐级诱导宋内志贺菌对环丙沙星耐药,通过提取诱导株诱导前后DNA和总RNA,采用基因测序检测突变和实时荧光定量PCR方法检测acrR、marR基因表达量的变化。结果 2株诱导耐药株中acrR、marR中均不存在基因突变,相对于诱导前acrR、marR Ct值增加,基因表达量降低。结论 acrR、marR基因表达量降低间接导致主动外排基因acrAB-tolC转录水平提高 ...
高佩增, 姚明晓
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脊髓白细胞介素-10/β-内啡肽通路抑制幼年大鼠神经病理性疼痛
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2019 【目的】探究幼年大鼠经历外周神经损伤后不发生神经病理性疼痛反应的生理机制。【方法】出生10d或33d大鼠构建坐骨神经分支选择性损伤（SNI）诱导的神经病理性疼痛模型，术后7d检测后肢机械痛阈值并用实时荧光定量PCR检测脊髓白细胞介素-10（IL-10）和β-内啡肽前体阿黑皮素原（POMC）基因表达水平。出生10d幼年大鼠构建SNI模型后7d，连续3d鞘内注射生理盐水或IL-10抗体或β-内啡肽抗体，每次注射后1h检测后肢机械痛阈值。实时荧光定量PCR检测脊髓IL-10和POMC基因表达水平。【结果 ...
唐雪琪 +3 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue目的探究miR-320b对结直肠癌化疗耐药的作用及其机制。方法经实时荧光定量PCR（Quantitative Real-Time PCR，qRT-PCR）测定miR-320b在结直肠癌化疗病人血清与耐药细胞系内的表达。在结直肠癌耐药细胞系中过表达 miR-320b，细胞计数试剂盒8（Cell Counting Kit-8，CCK8）测定细胞增殖；蛋白质印迹法（Western blotting，WB）测定凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2蛋白（B-cell Lymphoma 2，Bcl-2）、Bcl ...
卢方浩, 赵祥, 董严, 李建军
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的对正常结直肠组织和癌组织KLK5 mRNA进行定量,并分析其表达与部分临床病理特征的关系。方法应用荧光实时PCR（RT-PCR）技术检测51例结直肠癌切除的癌组织及相应正常组织中KLK5基因mRNA的表达。结果67%（33/51）的患者结直肠癌组织可检测到KLK5 mRNA表达。KLK5基因表达与淋巴结转移和临床分期显著相关 ...
陈英剑 +3 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的建立人KLK7 mRNA荧光定量检测方法,对正常乳腺组织和癌组织KLK7 mRNA进行定量,分析其表达与部分临床病理特征的关系,探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR检测48例乳腺癌切除的组织中KLK7基因mRNA的表达量,并分析KLK7 mRNA的表达量与年龄、TNM分期、组织学类型、淋巴结转移、雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）等临床病理特征的关系。结果KLK7 mRNA在乳腺正常组织相对表达水平为0.091±0.139,在乳腺癌组织中的相对表达水平为0.107±0.122,无统计学意义（
孙晓明 +3 more
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[Diagnostic Value of Serological Markers and Quantitative Real-Time PCR in Patients With Invasive Candidiasis]. [PDF]
Sichuan Da Xue Xue Bao Yi Xue BanMd Ali H, Peng L, Yuan Y, Zhou X, Ma Y.
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[Protective effect and mechanism of TSPAN9-mediated mitocytosis in interleukin-1β-induced rat chondrocyte senescence]. [PDF]
Zhongguo Xiu Fu Chong Jian Wai Ke Za ZhiChen Q, Da W, Luo N, Shen B.
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