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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 探讨dUTP/UDG反应体系在荧光定量PCR中抗PCR产物污染的能力。方法 用TaqMan荧光定量PCR检测方法进行定量检测。将一系列不同浓度的含dUTP的HBV DNA PCR扩增产物作为污染源 ,分别加至含dUTP/UDG的PCR反应体系和普通荧光定量PCR反应体系中 ,在荧光定量PCR仪上进行定量检测 ,从而得出含dUTP/UDG的PCR反应体系的抗污染能力。结果 1.最佳抗污染实验条件 :UDG酶含量 0 .0 5U ,消化时间 37℃ 5min ,灭活时间 92℃ 1min ...
王忠永 +4 more
doaj
Expression and biological behaviors of long non-coding RNA-ROR in gastric cancer [PDF]
, 2016 背景：胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤，发病率高，预后效果差。早期发现、早期诊断是目前提高胃癌患者生存率的关键环节，因此，寻找新的胃癌早期诊断的分子标志物是目前胃癌研究亟待解决的问题之一；此外，近年来肿瘤的分子靶向治疗方兴未艾，但这些靶向治疗药物价格昂贵、疗效不稳且大多依赖进口，因而，从我国国情的实际出发，寻找新的治疗靶点是我国目前肿瘤靶向治疗急需克服的困难。长链非编码RNA-ROR是最新发现对细胞重编程过程具有重要调控作用的非编码RNA。目前研究发现ROR与乳腺癌、肝癌及胶质瘤的发生进展密切相关 ...
朱长明
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实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小干扰RNA（siRNA）表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%
赵俊峰 +5 more
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Study on Alleviation Mechanism of Hydrogen Sulfide on Copper Stress in Rice Seedlings [PDF]
, 2015 硫化氢（hydrogensulfide,H2S）是继一氧化氮（nitricoxide,NO）、一氧化碳和(carbonmonooxide,CO)之后被广泛关注的气体信号分子，低浓度的H2S在动物、植物和微生物中被证实参与了众多生理生化过程，调节了有机体的生长发育。H2S在植物应对盐害、干旱、重金属胁迫、冷热胁迫中发挥重要作用，增强植物对逆境的抵抗力。 铜污染是环境污染中不容忽视的一类重金属污染。本文中，我们以水稻（Oryzasativa）为材料，研究了H2S对铜胁迫的影响。结果显示低浓度的H2S ...
尹珊珊
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野生动物学报, 2010 为建立SYBR Green I实时荧光PCR检测鉴定狮（Panthera Leo）制品的方法,本文在豹属动物线粒体细胞色素b基因上设计狮特异性引物,建立并优化了SYBR Green I实时荧光PCR检测鉴定体系,采用17种血液、组织和骨粉类样品的DNA,通过扩增曲线和融解曲线分析检测的特异性和灵敏度,并用狮肉粉和牛肉骨粉系列百分比混合物进行抗干扰能力分析。结果显示,狮血液和组织DNA样品均出现特异性的实时扩增曲线,平均熔解温度在84±0.2℃。虎、豹、熊等14种哺乳动物DNA样本的检测结果均为阴性 ...
徐君怡 +3 more
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端粒酶逆转录酶启动子热点突变的ARMS-LNA-qPCR检测方法建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的建立一种定量检测端粒酶逆转录酶（TERT）启动子区-124bp（C/T）和-146bp（C/T）位点突变率的实时荧光定量PCR方法。方法以常规PCR扩增含有TERT热点突变位点的纯化产物作为检测标本,采用等位基因扩增阻滞原理（ARMS）的引物,并结合锁核酸（LNA）探针作为野生等位基因抑制子,建立实时荧光定量PCR的TERT启动子热点突变率检测方法（ARMS-LNA-qPCR）。在30例表观健康人确定检测下限。结果所建方法的突变率标准曲线为:-124bp（C/T）突变率%=10（0.262×ΔCt ...
张洁, 李方, 齐长海, 梁国威
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miR-4465靶向KPNA2调控宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2021 目的探讨微小RNA-4465(miR-4465)靶向核转运蛋白基因α2(KPNA2)调控宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭的分子机制。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测宫颈癌组织、癌旁组织中miR-4465、KPNA2的表达量;双荧光素酶报告检测miR-4465过表达对野生型和突变型KPNA2荧光素酶活性的影响;体外培养宫颈癌细胞Hela,利用脂质体法分别将miR-NC、miR-4465mimics、si-NC、si-KPNA2、miR ...
于利, 张明, 王迪
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Cloning and expression patterns of stem cells induction-associated pluripotency factors in large yellow croaker Larimichthys crocea [PDF]
, 2016 通过iPSCs技术获得iPSCs，建立个体特异的多能干细胞系，可为生长发育、种质资源保护、疾病防治及药物筛选研究等提供宝贵的实验材料，是一条新的从根本上解决大黄鱼养殖中的各种难题的有效策略模式。其中，多能性因子对iPSCs技术的研究是必不可少的，它们在调控胚胎干细胞（ESCs）的自我更新和多能性、原始生殖细胞（PGCs）的形成、早期胚胎发育、生殖细胞发生、器官发生、再生及增殖、生长、分化、凋亡等细胞过程等方面发挥重要作用。然而关于大黄鱼多能性因子的研究尚属空白。本文采用SMART ...
姜永华
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定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的建立检测人颗粒溶素（granulysin,GNLY）mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞（PBMC）中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化（PBC,primarybiliary cirrhosis）发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量 ...
钱琤 +10 more
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The expression and clinical significance of SATB2 in Esophageal Squamous Cell Carcinoma [PDF]
, 2015 摘要 研究目的：食管癌在中国是一种高发的消化系统恶性肿瘤。由于解剖位置深、临床症状隐匿、早期症状不明显、易以多种路径转移、高位癌手术残留、术后容易复发以及放化疗不敏感等特点，食管癌预后较差。因此，进一步深入研究食管癌发生发展、侵袭转移以及预后评估因素的内在机制具有重要的意义。SATB1是富含AT序列结合蛋白的特殊家庭成员之一，已被证明影响众多肿瘤致瘤性的过程。SATB2与肿瘤的关系密切一直是研究的关注点，然而，其在食管鳞状细胞癌组织中的作用不清楚。本论文以食管鳞癌为研究对象，以SATB2为切入点 ...
李宁
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