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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2000 目的 建立灵敏可靠的外周血中检出滋养细胞肿瘤细胞的方法，为早期诊断滋养细胞肿瘤的转移奠定实验基础。 方法 在已知数量的ＪＡＲ细胞掺入１０ｍｌ外周血中建立肿瘤细胞血行转移实验模型，荧光定量逆转录－聚合酶链反应（ＦＱ－ＲＴ－ＰＣＲ）定量检测ＪＡＲ细胞的 β－ｈＣＧ—ｍＲＮＡ。结果 ＦＱ-ＲＴ－ＰＣＲ可检测到相当于１个ＪＡＲ细胞表达的 β－ｈＣＧ—ｍＲＮＡ量，但当ＪＡＲ细胞被掺入１０ｍｌ外周血中时，细胞数＞１０２个方可经富集后可检测到。结论 ＦＱ－ＲＴ－ＰＣＲ是一种敏感的检测手 段 ...
郑彤彤, 吕时铭
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2000 目的 建立灵敏可靠的外周血中检出滋养细胞肿瘤细胞的方法，为早期诊断滋养细胞肿瘤的转移奠定实验基础。 方法 在已知数量的ＪＡＲ细胞掺入１０ｍｌ外周血中建立肿瘤细胞血行转移实验模型，荧光定量逆转录－聚合酶链反应（ＦＱ－ＲＴ－ＰＣＲ）定量检测ＪＡＲ细胞的 β－ｈＣＧ—ｍＲＮＡ。结果 ＦＱ-ＲＴ－ＰＣＲ可检测到相当于１个ＪＡＲ细胞表达的 β－ｈＣＧ—ｍＲＮＡ量，但当ＪＡＲ细胞被掺入１０ｍｌ外周血中时，细胞数＞１０２个方可经富集后可检测到。结论 ＦＱ－ＲＴ－ＰＣＲ是一种敏感的检测手 段 ...
郑彤彤, 吕时铭
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CircRNA_100395通过结合miR-144-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2020 【目的】研究环形 RNA circRNA_100395 调节心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用机制。【方法】CircRNAs 表达谱芯片分析结合实时荧光定量 PCR 验证 circRNA_100395 在长期持续性房颤（AF）病人左心耳组织中的表达。检测血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）诱导人心房肌成纤维细胞（HAFs）中circRNA_100395 的表达及在细胞核质中分布情况。利用放线菌素D 实验检测circRNA_100395 的RNA 稳定性。制备重组circRNA_100395 腺病毒（rAd ...
温艺红 +5 more
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MiR-134 在MA 诱导神经元损伤中的表达及其对神经诱发动作电位的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2017 摘要：【目的】探讨微小非编码RNA分子miR-134在甲基苯丙胺（MA）诱导PC12神经细胞损伤中的表达变化及其对神经兴奋性的影响，为理解MA导致神经损伤的机制提供实验基础。【方法】将处于对数生长期的PC12细胞分为对照组和 MA组。MA组应用800 μmol/L MA处理，建立体外神经元损伤模型，观察培养神经细胞损伤及细胞凋亡情况；采用实时荧光定量PCR技术测定miR-134的表达水平变化；并构建miR-134干扰载体，抑制miR-134后分析神经诱发动作电位的变化。【结果 ...
李涛 +7 more
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miR-17在体外脑缺血损伤中对Smad锚着蛋白的负性调控作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的探讨microRNA-17(miR-17)在体外脑缺血损伤中对Smad锚着蛋白(Smad anchor for receptor activation,SARA)的调控机制。方法使用大鼠高分化嗜铬细胞瘤PC12细胞,经连二亚硫酸钠(NaS2O4)构建氧糖剥夺模型(Oxygen Glucose Deprivation,OGD),计时0h、1.5h、3h、6h和12h,实时定量PCR检测miR-17的表达变化。利用miR-17mimic瞬时转染PC12细胞,western blot检测转染24h ...
石晓花 +7 more
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应用实时荧光PCR方法检测乙肝病毒1896位点变异及临床意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的采用实时荧光定量PCR的方法检测乙肝病毒前C区1896位点突变,并探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR（RT-PCR）的方法对随机选取的临床诊断非慢性乙肝和肝硬化的乙型肝炎患者120例,已确诊的慢性乙肝患者80例,肝硬化患者32例进行乙肝病毒前C区1896位点突变的检测,并对80例慢性乙肝患者中HBeAg（+）和HBeAg（-）组患者,以及不同含量的HBV DNA的HBeAg（-）组患者进行乙肝病毒前C区1896位点突变分析。结果 120例随机乙肝患者中,前C区1896位点突变率为25.0 ...
肖晓光, 王晶, 林琳, 李岩
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2006 【目的】对粘结托槽前后菌斑中变形链球菌数量的差异进行定量研究。【方法】采用自身对照法。每个患者分两阶段取样：粘结托槽前和粘结托槽后4周；取样牙位包括上4个切牙。设计针对变链菌的特异性引物和MGB探针，应用实时荧光定量PCR技术测定每毫克菌斑样本中变链菌的数量。【结果】同一患者粘托槽前后变链菌数值分别为5．31×10^6／mg和6．35×10^6／mg，其差别有统计学意义（P=0．0025）。【结论】患者粘结托槽后，菌斑中变链菌密度的明显升高，可能是正畸治疗中自垩斑发生率较高的原因之一。
艾虹 +5 more
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PI3KI/Akt1在辐射诱导的乳腺癌细胞自噬发生中表达调控及作用机制
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究不同剂量X线诱导乳腺癌细胞株MCF-7自噬发生过程中Akt表达的变化以及探讨小分子干扰RNA沉默Akt基因后对自噬的影响及可能的作用机制。方法采用实时荧光定量PCR方法检测MCF-7中Akt基因表达,Western blot方法检测Akt蛋白表达;实时荧光定量PCR方法检测Akt过表达和沉默模型中MAP1LC3B基因表达。结果正常照射组MCF-7细胞量效研究表明,在4、8、16 h Akt1表达分别在24、、8Gy区间内呈剂量依赖下降变化,照射后Akt1总体表达均低于假照组 ...
高琳, 刘晓冬, 孔德娟, 马淑梅
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基于episomal CRISPR/Cas9 载体的基因敲入方法
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 【目的】研究一种在哺乳动物细胞中高效的基因敲入方法，比较带有oriP-EBNA1 序列的episomal CRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体的基因敲入效率是否有差别。【方法】首先利用慢病毒载体构建稳定表达红色荧光蛋白DsRedE2的人胚肾细胞系（293FT）与人诱导多能干细胞系（hiPS）；利用CRISPR/Cas9序列设计网站，设计和合成靶向DsRedE2的向导RNA（sgRNA），分别克隆至带有oriP-EBNA1的episomal CRISPR ...
邹征伟, 赖兴强, 李伟强
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多重methylight在结直肠癌相关基因ALX4和SEPT9 甲基化检测中的应用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2015 摘 要: 【目的】 探讨多重methylight方法在检测结直肠癌(CRC)外周血ALX4? SEPT9 基因甲基化状态中的价值,为CRC无创检测提供新方法?【方法】 采用不同的荧光报告基团标记ALX4? SEPT9 基因甲基化探针,利用高敏感性?高特异性的多重实时定量甲基化特异性PCR方法(MSP,methylight),同时检测ALX4? SEPT9基因在CRC外周血中的甲基化情况?【结果】 ALX4?
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