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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的体外构建DNA氧化损伤模型,荧光实时定量PCR检测线粒体DNA氧化损伤。方法体外应用亚甲蓝联合可见光（MBL）方法建立DNA氧化损伤模型,通过8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶（OGG1）特异性切割氧化损伤位点8-羟基鸟嘌呤（8-oxoG）,运用荧光实时定量PCR法检测不同比例混匀的OGG1酶切与未酶切的DNA氧化损伤模板。结果成功构建体外氧化损伤DNA模型,OGG1酶能特异切割氧化损伤位点;OGG1酶切DNA在定量PCR体系模板中所占比例,与线粒体DNA编码基因COⅡ扩增Ct值呈正相关 ...
孙玉 +6 more
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Study on Alleviation Mechanism of Hydrogen Sulfide on Copper Stress in Rice Seedlings [PDF]
, 2015 硫化氢（hydrogensulfide,H2S）是继一氧化氮（nitricoxide,NO）、一氧化碳和(carbonmonooxide,CO)之后被广泛关注的气体信号分子，低浓度的H2S在动物、植物和微生物中被证实参与了众多生理生化过程，调节了有机体的生长发育。H2S在植物应对盐害、干旱、重金属胁迫、冷热胁迫中发挥重要作用，增强植物对逆境的抵抗力。 铜污染是环境污染中不容忽视的一类重金属污染。本文中，我们以水稻（Oryzasativa）为材料，研究了H2S对铜胁迫的影响。结果显示低浓度的H2S ...
尹珊珊
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2003 目的 探讨dUTP/UDG反应体系在荧光定量PCR中抗PCR产物污染的能力。方法 用TaqMan荧光定量PCR检测方法进行定量检测。将一系列不同浓度的含dUTP的HBV DNA PCR扩增产物作为污染源 ,分别加至含dUTP/UDG的PCR反应体系和普通荧光定量PCR反应体系中 ,在荧光定量PCR仪上进行定量检测 ,从而得出含dUTP/UDG的PCR反应体系的抗污染能力。结果 1.最佳抗污染实验条件 :UDG酶含量 0 .0 5U ,消化时间 37℃ 5min ,灭活时间 92℃ 1min ...
王忠永 +4 more
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Quantification and Genotyping of Trace Samples [PDF]
, 2018 Objective To introduce real-time polymerase chain reaction （real-time PCR） into the initial sample screening, to improve the effectiveness of traditional trace sample extraction method.
SONG Li, LIU Song, WU Hui，et al.
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实时荧光定量RT-PCR检测siRNA表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的评价实时荧光定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测小干扰RNA（siRNA）表达载体抑制人肾癌786-0细胞G250 mRNA表达的可靠性,以建立稳定的RNAi技术。方法体外合成四条针对G250基因的siRNA,并设计阴性对照和空白对照,转染肾癌786-0细胞株;根据G250 mRNA的序列设计特异性引物,荧光染料SYBR Green Ⅰ法定量RT-PCR测定G250 mRNA的表达情况。结果四条siRNA分别使G250 mRNA表达量降低了35.56%、49.27%、45.88%、65.13%
赵俊峰 +5 more
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The expression and clinical significance of SATB2 in Esophageal Squamous Cell Carcinoma [PDF]
, 2015 摘要 研究目的：食管癌在中国是一种高发的消化系统恶性肿瘤。由于解剖位置深、临床症状隐匿、早期症状不明显、易以多种路径转移、高位癌手术残留、术后容易复发以及放化疗不敏感等特点，食管癌预后较差。因此，进一步深入研究食管癌发生发展、侵袭转移以及预后评估因素的内在机制具有重要的意义。SATB1是富含AT序列结合蛋白的特殊家庭成员之一，已被证明影响众多肿瘤致瘤性的过程。SATB2与肿瘤的关系密切一直是研究的关注点，然而，其在食管鳞状细胞癌组织中的作用不清楚。本论文以食管鳞癌为研究对象，以SATB2为切入点 ...
李宁
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野生动物学报, 2010 为建立SYBR Green I实时荧光PCR检测鉴定狮（Panthera Leo）制品的方法,本文在豹属动物线粒体细胞色素b基因上设计狮特异性引物,建立并优化了SYBR Green I实时荧光PCR检测鉴定体系,采用17种血液、组织和骨粉类样品的DNA,通过扩增曲线和融解曲线分析检测的特异性和灵敏度,并用狮肉粉和牛肉骨粉系列百分比混合物进行抗干扰能力分析。结果显示,狮血液和组织DNA样品均出现特异性的实时扩增曲线,平均熔解温度在84±0.2℃。虎、豹、熊等14种哺乳动物DNA样本的检测结果均为阴性 ...
徐君怡 +3 more
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端粒酶逆转录酶启动子热点突变的ARMS-LNA-qPCR检测方法建立
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的建立一种定量检测端粒酶逆转录酶（TERT）启动子区-124bp（C/T）和-146bp（C/T）位点突变率的实时荧光定量PCR方法。方法以常规PCR扩增含有TERT热点突变位点的纯化产物作为检测标本,采用等位基因扩增阻滞原理（ARMS）的引物,并结合锁核酸（LNA）探针作为野生等位基因抑制子,建立实时荧光定量PCR的TERT启动子热点突变率检测方法（ARMS-LNA-qPCR）。在30例表观健康人确定检测下限。结果所建方法的突变率标准曲线为:-124bp（C/T）突变率%=10（0.262×ΔCt ...
张洁, 李方, 齐长海, 梁国威
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Cloning and expression patterns of stem cells induction-associated pluripotency factors in large yellow croaker Larimichthys crocea [PDF]
, 2016 通过iPSCs技术获得iPSCs，建立个体特异的多能干细胞系，可为生长发育、种质资源保护、疾病防治及药物筛选研究等提供宝贵的实验材料，是一条新的从根本上解决大黄鱼养殖中的各种难题的有效策略模式。其中，多能性因子对iPSCs技术的研究是必不可少的，它们在调控胚胎干细胞（ESCs）的自我更新和多能性、原始生殖细胞（PGCs）的形成、早期胚胎发育、生殖细胞发生、器官发生、再生及增殖、生长、分化、凋亡等细胞过程等方面发挥重要作用。然而关于大黄鱼多能性因子的研究尚属空白。本文采用SMART ...
姜永华
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定量RT-PCR检测PBC患者外周血中颗粒溶素的基因表达水平
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的建立检测人颗粒溶素（granulysin,GNLY）mRNA含量的实时荧光定量RT-PCR的方法,并测定PBC患者外周血单个核细胞（PBMC）中GNLY的基因表达水平,探讨GNLY基因表达水平与原发性胆汁性肝硬化（PBC,primarybiliary cirrhosis）发生发展的关系。方法基于TaqMan荧光探针技术,构建质粒pET28a-GNLY,作为定量模板,建立实时荧光定量RT-PCR方法。用此方法测定了60例PBC、60例乙型肝炎肝硬化及60例健康对照者外周血中GNLY mRNA的含量 ...
钱琤 +10 more
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