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Toll样受体4小干扰RNA表达载体的构建及鉴定筛选

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的构建并筛选到能有效抑制TLR4基因表达的小干扰RNA表达载体,用于研究TLR4基因功能。方法 RNA干扰采用体外构建小干扰RNA表达载体法,将构建好的表达载体转染单核细胞株,分别用流式细胞术和实时荧光定量RT-PCR法检测TLR4蛋白和mRNA表达变化,筛选抑制效率最高的小干扰RNA表达载体。结果成功构建了TLR4小干扰RNA表达载体,并经电泳及测序证实;编号为S8-1的载体转染入细胞后,TLR4阳性率为27.03%,显著低于对照组的35.12%;流式细胞术和实时荧光定量RT ...
耿红莲   +6 more
doaj  

The expression and function of Brg1 in ocular surface tissues under normal and disease situation [PDF]

open access: yes, 2015
背景:Brahma相关基因1(Brahma-relatedgene1,Brg1)是染色质重塑复合物SWI/SNF的ATP酶亚基之一,广泛存在于真核细胞中。以往的研究表明,Brg1结合复合物参与不同类型细胞的细胞周期控制、凋亡和细胞分化。到目前为止,没有关于眼表上皮细胞Brg1表达以及功能的报道。 方法:对小鼠、兔以及人眼表组织的Brg1表达和定位进行免疫荧光染色和蛋白质印迹检测。人角膜上皮细胞株(HCE),小鼠角膜上皮细胞系(TKE2),小鼠原代培养的角膜上皮细胞(mCEC)分别在DMEM/F12+10%
刘婷婷
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实时荧光定量PCR方法检测乳腺癌患者外周血中uPA基因表达水平及其临床意义

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的探讨人外周血中尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,uPA)基因表达水平与乳腺癌临床分期和转移的关系,评价其对乳腺癌辅助诊断及判断预后的临床意义。方法采用实时荧光定量PCR方法检测71例正常人和90例乳腺癌患者外周血中uPA mRNA表达水平。结果97.8%的乳腺癌病人外周血中有uPA基因表达,在正常人外周血中的表达率为40.8%;基因表达水平与临床分期和肿物转移情况相关 ...
刘俊泽   +3 more
doaj  

Cloning, Expression and Immunolocalization of Aspartyl Protease Inhibitor Gene of Angiostrongylus cantonensis [PDF]

open access: yes, 2016
广州管圆线虫(Angiostrongyluscantonensis)是一种人畜共患自然疫源性寄生虫,能引起人的嗜酸性粒细胞增多性脑膜炎,也被称为广州管圆线虫病。其中间宿主是软体动物,例如福寿螺、玛瑙螺等,并以啮齿类动物等作为其终宿主。人类是广州管圆线虫的偶然宿主,因误食寄生有广州管圆线虫的第三期幼虫(L3)的福寿螺等而引起广州管圆线虫病。 寄生虫的天冬氨酸蛋白酶抑制剂(aspartylproteaseinhibitor,API)在寄生虫的寄生生活中起着重要的作用,包括寄生虫的营养摄取,组织入侵,免疫逃避,
曹斌斌
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荧光定量PCR检测外周血中JAR细胞的探讨

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2000
目的 建立灵敏可靠的外周血中检出滋养细胞肿瘤细胞的方法,为早期诊断滋养细胞肿瘤的转移奠定实验基础。 方法 在已知数量的JAR细胞掺入10ml外周血中建立肿瘤细胞血行转移实验模型,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)定量检测JAR细胞的 β-hCG—mRNA。结果 FQ-RT-PCR可检测到相当于1个JAR细胞表达的 β-hCG—mRNA量,但当JAR细胞被掺入10ml外周血中时,细胞数>102个方可经富集后可检测到。结论 FQ-RT-PCR是一种敏感的检测手 段 ...
郑彤彤, 吕时铭
doaj  

Relative Quantification of Hepcidin Gene Transcripts in Pseudosciaena crocea [PDF]

open access: yes, 2012
以大黄鱼(PSEudOSCIAEnA CrOCEA)管家基因18S rrnA和β-ACTIn作为内参基因,分别比较2个内参基因建立的相对定量曲线,最终确立以18S rrnA为参比基因,定量分析大黄鱼的HEPCIdIn抗菌肽基因.该相对定量分析方法所得结果与nOrTHErn-blOT方法一致.应用建立的HEPCIdIn基因的实时荧光相对定量研究方法,对大黄鱼头肾中的HEPCIdIn基因转录物进行相对定量,为今后开展鱼体内免疫相关基因的表达特性、诱导机制等工作奠定研究基础.同时,克隆得到的大黄鱼β ...
吴曼丽, 杨明, 范丹青, 蔡灵
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荧光定量PCR检测外周血中JAR细胞的探讨 附视频

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2000
目的 建立灵敏可靠的外周血中检出滋养细胞肿瘤细胞的方法,为早期诊断滋养细胞肿瘤的转移奠定实验基础。 方法 在已知数量的JAR细胞掺入10ml外周血中建立肿瘤细胞血行转移实验模型,荧光定量逆转录-聚合酶链反应(FQ-RT-PCR)定量检测JAR细胞的 β-hCG—mRNA。结果 FQ-RT-PCR可检测到相当于1个JAR细胞表达的 β-hCG—mRNA量,但当JAR细胞被掺入10ml外周血中时,细胞数>102个方可经富集后可检测到。结论 FQ-RT-PCR是一种敏感的检测手 段 ...
郑彤彤, 吕时铭
doaj  

实时荧光PCR同时检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7 [PDF]

open access: yes, 2009
目的建立改良分子信标-双重实时荧光PCR同时检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157:H7,应用于细菌性食物中毒的快速诊断。方法根据GeneBank公布的金黄色葡萄球菌nuc基因序列和大肠杆菌O157:H7rfbE基因序列,设计引物和改良分子信标探针,建立改良分子信标-双重实时PCR检测体系。结果双重荧光PCR反应体系检测151株金黄色葡萄球菌和27株大肠杆菌O157:H7,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对8762份大便、食品等标本进行检测,315份标本金黄色葡萄球菌实时荧光PCR阳性 ...
兰全学   +6 more
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CircRNA_100395通过结合miR-144-3p抑制心肌成纤维细胞中纤维化相关基因的表达

open access: yesZhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2020
【目的】研究环形 RNA circRNA_100395 调节心肌成纤维细胞中纤维化相关基因表达的作用机制。【方法】CircRNAs 表达谱芯片分析结合实时荧光定量 PCR 验证 circRNA_100395 在长期持续性房颤(AF)病人左心耳组织中的表达。检测血管紧张素Ⅱ(Ang-Ⅱ)诱导人心房肌成纤维细胞(HAFs)中circRNA_100395 的表达及在细胞核质中分布情况。利用放线菌素D 实验检测circRNA_100395 的RNA 稳定性。制备重组circRNA_100395 腺病毒(rAd ...
温艺红   +5 more
doaj  

Nitric oxide increases salt tolerance of a mangrove species Kandelia obovata by mediating Na+/K+ homeostasis in root under high salinity [PDF]

open access: yes, 2012
盐害是影响农业生产的重要逆境因素,高盐胁迫对植物产生严重毒害,影响植物的正常生长发育,甚至导致植株死亡,因此对植物耐盐机理的研究具有重要的科学意义。一氧化氮(nitricoxide,NO)作为一种重要的气体信号分子在植物生长发育和抵抗逆境胁迫过程中具有非常重要的作用。已有大量研究表明外源施用NO可以缓解盐胁迫对植物造成的伤害,但大多在生理水平进行分析和阐述,而目前对NO增强植物耐盐性的分子机制的研究较少,NO对植物耐盐相关基因表达的调节作用仍不明确。本文以典型的拒盐红树植物秋茄 ...
熊端业
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