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Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒对SW480结肠癌细胞株生长与侵袭的影响
【目的】 探讨Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒对结肠癌细胞株SW480生长、迁移与侵袭的抑制作用。【方法】 应用我们已构建的Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒转染SW480细胞,检测CXCR4 RNA干扰对CXCR4 RNA 和蛋白的抑制作用,MTS法检测能否抑制细胞增殖,Transwell小室评价对细胞迁移和侵袭的影响。【结果】重组Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒转染SW480细胞可见绿色荧光。SW480、阴性对照组及Lenti-CXCR4-siRNA慢病毒组CXCR4 RNA ...
王天宝
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人HMGN5基因shRNA慢病毒载体构建与RNAi效率的鉴定
目的构建人HMGN5基因的shRNA慢病毒载体并鉴定在肺癌A549和H1299细胞上的沉默效率。方法设计HMGN5基因特异性siRNA靶点,构建于慢病毒pLL-3.7载体,并筛选获得有效的shRNA慢病毒载体,在293T细胞包装成病毒颗粒,将其感染肺癌A549和H1299细胞,应用Real-time PCR方法从mRNA水平上检测HMGN5的沉默效率。结果构建的慢病毒载体shRNA的PCR鉴定和测序正确,包装病毒后滴度达到5×108TU/ml ...
陈鹏 +8 more
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目的构建Tet-on调控的人HOXB4慢病毒载体,为体外扩增造血干细胞并保持其干细胞特性提供实验材料基础。方法应用PCR技术从质粒TAT-HA-HOXB4-Full中扩增编码人HOXB4的cDNA,用限制性内切酶EcoRI分别酶切HOXB4基因片段和带有Tet-on开关的可调控慢病毒载体,经T4DNA连接酶连接获得慢病毒载体Teto-Fuw-hHOXB4。对构建的HOXB4慢病毒载体进行酶切片段凝胶电泳及DNA测序分析。结果酶切片段电泳分析和DNA测序分析证明Tet ...
李秀英 +5 more
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慢性丙型肝炎患者外周血DNT细胞与HCV-RNA病毒载量关系的研究
丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)感染机体后所引起的传染性疾病。大多数的丙型肝炎患者感染后转为慢性,病毒在体内持续存在,慢性丙型肝炎是引起肝硬化和肝癌的重要原因之一。CD3+CD4-CD8-T细胞(双阴性T细胞,DNT)是一种新发现的调节性T细胞亚群,研究发现其在移植排斥、自身免疫性疾病、肿瘤免疫、感染性疾病 ...
马寅芙 +4 more
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目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海 +6 more
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USP4 inhibits p53 and NF-κB through deubiquitinating and stabilizing HDAC2 [PDF]
蛋白泛素化/去泛素化修饰的异常与多种肿瘤的发生存在密切相关。作为去泛素化酶家族中的重要一员,USP4在一些肺癌细胞及其它人类癌细胞中呈现出高表达,说明USP4可能作为癌蛋白(oncoprotein)参与到对肿瘤细胞发生发展的调控。而目前对USP4参与肿瘤细胞发生的分子机制尚不清楚。我们的前期研究发现,USP4可以与去乙酰基转移酶HDAC2结合。初步研究表明USP4可以去泛素化并稳定HDAC2。进一步的研究发现,USP4通过HDAC2抑制p53的转录活性及NF-κB信号通路。在本项申请中 ...
李增鹏
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【目的】探讨抗病毒治疗以及治疗依从性对住院慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者肝病谱构成比的影响。【方法】回顾性收集2018 年在中山大学附属第三医院感染科住院的慢性HBV 感染者。根据患者入院前既往抗病毒治疗史,将纳入的患者分为抗病毒组(n = 460)和未抗病毒组(n = 1 240);根据患者的治疗依从性将抗病毒治疗的患者分为规范抗病毒组(n = 277)和不规范抗病毒组(n = 183)。分别比较两组的肝病谱构成比的分布情况。并与2011 年的研究结果进行比较。【结果 ...
陈幼明 +3 more
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NFAT2 in the regulation of CAII and V-ATPase mRNA expression in osteoclast-like cells and intervention study of PEMF [PDF]
目的:研究低频脉冲电磁场(PEMF)对去卵巢大鼠核因子κB受体活化因子(RANK)、活化T细胞核因子(NFATc1/NFAT2)、碳酸酐酶II(CAII)、空泡型H+三磷酸腺苷转运酶(V-ATPase)基因表达的影响;研究NFAT2对CAII和V-ATPase基因表达的调控作用。 方法:1.选取48只雌性SD大鼠,分为三组,分别为SHAM(假手术)组、OVX(去卵巢)组、OVX+PEMF组,OVX+PEMF组随机选一半被PEMF干预14天和28天,测雌激素和骨密度。RT-PCR检测NFAT2、RANK ...
傅继凡
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Epithelial-mesenchymal Transition in Renal Cell Carcinoma: The Role of Hepatocyte Nuclear Factor 4α [PDF]
【背景及目的】 肾癌(renalcellcarcinoma,RCC)是起源于肾小管上皮细胞的恶性肿瘤,占肾脏恶性肿瘤的80%~90%,近年来发病率呈上升趋势。除传统手术治疗外,缺乏其它的有效治疗方法。上皮间质转化(epithelial-mesenchymaltransition,EMT)是上皮细胞在细胞结构、形态、功能等方面获得间质细胞特性的过程,在肿瘤的发生、浸润、转移过程中具有重要作用,核心为上皮标志物E-cadherin表达降低和间质标志物表达增高。肝细胞核因子4α ...
谭伟
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目的观察血常规检测(PLR、NLR等指标)在丙肝病毒感染所致肝脏疾病的不同病情阶段的变化情况,寻求血常规监测疾病的临床应用价值。方法选择2017年1月至2018年1月在天津市第三中心医院肝胆内科就诊的丙型肝炎病毒感染患者112例(慢性丙型病毒性肝炎组47例,慢性丙型病毒性肝硬化组65例)。同时,从预防保健中心体检人群中随机选择30例作为健康对照组。然后我们再根据患者接受抗病毒治疗后载量的变化将慢性丙型病毒性肝炎和慢性丙型病毒性肝硬化分为亚组(即慢性丙型肝炎清除组21例、慢性丙型肝炎未清除组26例 ...
刘爽 +4 more
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