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应用双靶标CRISPR慢病毒载体在间充质干细胞中稳定敲除lncRNA DANCR基因
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2019 【目的】应用CRISPR/Cas9方法，构建特异性靶向长链非编码RNADANCR基因两端的双靶标慢病毒载体，稳定敲除间充质干细胞（MSC）中的DANCR基因，为研究DANCR的生物学功能奠定基础。【方法】首先设计靶向DANCR的5’和3’端的sgRNA（single-guideRNA），转染293FT细胞，提取293FT细胞基因组DNA，验证靶向序列的有效性。然后通过gateway和酶切连接的方法，将分别靶向5’和3’端的两条有效sgRNA序列连接至同一慢病毒CRISPR载体 ...
彭丹, 钟小敏
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2021 慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种以呼吸道症状为主的呼吸系统疾病,是全球第三大死亡原因[1]。主要特征为持续且渐进性发展的气流受限,通常是由于长期吸入有毒颗粒或气体引起的慢性气道炎症性疾病[1-2]。吸烟是慢性阻塞性肺疾病发病最重要的环境危险因素,烟草中的有毒物质可加剧慢性阻塞性肺疾病气道炎性改变[2-3]。红细胞分布宽度(RDW)作为红细胞体积异质性的参数[4],可以预测慢性阻塞性肺疾病病情严重程度以及死亡率,吸烟对红细胞分布宽度会产生一定影响 ...
王新桐, 车春莉
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e抗原阴性乙肝患者HBV-DNA检出率与临床疾病状态的关系 附视频
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 1998 研究肝病患者ｅ抗原转阴后病毒复制情况以及ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率与临床疾病状态的关系。方法采用ＰＣＲ技术对１０８例ｅＡｇ阴性、ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者进行血清ＨＢＶ－ＤＮＡ分析，同时进行肝功能指标检测。结果５０．９％的患者体内仍存在乙肝病毒复制。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性无症状携带者２７．８％、慢迁肝４５．８％、慢活肝７７．８％、肝硬化５６．５％、肝癌３７．５％。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组ＡＬＴ值为１３８．６±１０２．８ＩＵ，而ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性组为３４．２±３０．２ＩＵ ...
杨立军, 张晶
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 1998 研究肝病患者ｅ抗原转阴后病毒复制情况以及ＨＢＶ－ＤＮＡ检出率与临床疾病状态的关系。方法采用ＰＣＲ技术对１０８例ｅＡｇ阴性、ＨＢｓＡｇ阳性肝病患者进行血清ＨＢＶ－ＤＮＡ分析，同时进行肝功能指标检测。结果５０．９％的患者体内仍存在乙肝病毒复制。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性无症状携带者２７．８％、慢迁肝４５．８％、慢活肝７７．８％、肝硬化５６．５％、肝癌３７．５％。ＨＢＶ－ＤＮＡ阳性组ＡＬＴ值为１３８．６±１０２．８ＩＵ，而ＨＢＶ－ＤＮＡ阴性组为３４．２±３０．２ＩＵ ...
杨立军, 张晶
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2013 目的构建人Shh基因过表达慢病毒载体,转染293T细胞,建立稳定转染人Shh基因的293T的细胞系。方法设计引物引入AgeⅠ酶切位点,使用PCR方法从质粒中扩增Shh基因的编码区序列,对所扩增出的目的片段回收纯化。将AgeⅠ内切酶消化后目的片段交换连接入pGC-FU载体,构建Shh慢病毒表达载体pGC-FU-Shh。酶切验证并测序正确后,将质粒pGC-FU-Shh与携带GFP的慢病毒辅助包装载体共转染293T细胞,荧光显微镜检测慢病毒载体转染细胞的结果,重组质粒pGC-FU-Shh的测序,Western
边学海 +6 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的探讨慢病毒载体在CD34+脐血细胞（CBCs）中的基因转导效率,为基因治疗的临床应用提供关键材料。方法应用1型人类免疫缺陷病毒（HIV-1）改造而成的第三代自身失活（self-inactivating,SIN）慢病毒载体（lentiviralvector）系统,通过流式细胞术检测基因导入细胞百分比,评价该载体系统在人CBCs中的基因转导效率。结果 HIV载体的转导效率在95%以上。结论基于慢病毒载体基因转导的高效性,该载体系统可作为CD34+CBCs基因转导的极好工具。
卢振霞, 白元松, 林玉梅
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的研究靶向沉默增殖诱导配体（aproliferation-inducing ligand,APRIL）基因对人胃癌MGC803细胞增殖及细胞周期的影响。方法构建含有APRIL的siRNA序列的慢病毒载体并转染人胃癌MGC803细胞,以非特异性序列nonsilencing siRNA作为对照。通过Real-time PCR（RT-PCR）评价APRIL的沉默效率;MTT法检测沉默A-PRIL基因后,细胞增殖的变化;流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果 RT-PCR测序证实,成功构建APRIL siR ...
蒿姗姗, 李薇, 王畅, 崔久嵬
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Linchuang shenzangbing zazhi, 2014 病毒感染人体后,可通过免疫病理机制和(或)直接作用导致肾脏损害。与肾损害相关的病毒有乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)、丙型肝炎病毒(hepatitis C virus,HCV)、人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)、巨细胞病毒(cytomegalovirus,CMV)、多瘤病毒(pdyomaviruse,PV)、非洲淋巴瘤病毒(epstein-Barr virus,EBV)、汉坦病毒(hanta virus,HV)等。目前 ...
熊勇
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Ｌｅｎｔｉ－ＣＸＣＲ４－ｓｉＲＮＡ慢病毒对ＳＷ４８０结肠癌细胞株生长与侵袭的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2012 【目的】 探讨Ｌｅｎｔｉ-ＣＸＣＲ４-ｓｉＲＮＡ慢病毒对结肠癌细胞株ＳＷ４８０生长、迁移与侵袭的抑制作用。【方法】 应用我们已构建的Ｌｅｎｔｉ-ＣＸＣＲ４-ｓｉＲＮＡ慢病毒转染ＳＷ４８０细胞，检测ＣＸＣＲ４ ＲＮＡ干扰对ＣＸＣＲ４ ＲＮＡ 和蛋白的抑制作用，ＭＴＳ法检测能否抑制细胞增殖，Ｔｒａｎｓｗｅｌｌ小室评价对细胞迁移和侵袭的影响。【结果】重组Ｌｅｎｔｉ-ＣＸＣＲ４-ｓｉＲＮＡ慢病毒转染ＳＷ４８０细胞可见绿色荧光。ＳＷ４８０、阴性对照组及Ｌｅｎｔｉ-ＣＸＣＲ４-ｓｉＲＮＡ慢病毒组ＣＸＣＲ４ ＲＮＡ ...
王天宝
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应用实时荧光PCR方法检测乙肝病毒1896位点变异及临床意义
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2014 目的采用实时荧光定量PCR的方法检测乙肝病毒前C区1896位点突变,并探讨其临床意义。方法应用实时荧光定量PCR（RT-PCR）的方法对随机选取的临床诊断非慢性乙肝和肝硬化的乙型肝炎患者120例,已确诊的慢性乙肝患者80例,肝硬化患者32例进行乙肝病毒前C区1896位点突变的检测,并对80例慢性乙肝患者中HBeAg（+）和HBeAg（-）组患者,以及不同含量的HBV DNA的HBeAg（-）组患者进行乙肝病毒前C区1896位点突变分析。结果 120例随机乙肝患者中,前C区1896位点突变率为25.0 ...
肖晓光, 王晶, 林琳, 李岩
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