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ＲＮＡｉ沉默ＰＥＬＰＩ／ＭＮＡＲ基因对子宫内膜癌细胞增殖和细胞周期的作用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2013 【目的】 构建脯氨酸－谷氨酸－亮氨酸富集蛋白１（ＰＥＬＰ１）基因慢病毒表达载体，研究沉默ＰＥＬＰ１／雌激素受体非基因组活性辅助调节因子（ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ）基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和周期的作用及机制。【方法】 构建合成靶向ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ＲＮＡｉ慢病毒表达载体，并转染子宫内膜癌Ｉｓｈｉｋａｗａ细胞，Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ和ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ＰＥＬＰ１／ＭＮＡＲ ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达。使用普通培养基和加入Ｅ２的培养基培养各组细胞，ＭＴＴ检测各组细胞增殖情况 ...
doaj
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2014 摘 要: 【目的】 分析妊娠期慢性乙型肝炎病毒(HBV)携带者病毒载量与妊娠结局的关系? 【方法】 按HBV-DNA是否≥1.0 × 103 U/mL分为:HBV-DNA阳性组,172例;及HBV-DNA阴性组,206例;并设立非HBV携带者作为对照组1144例?分别比较各组产妇的住院时间?分娩孕周?剖宫产率?妊娠期并发症(早产?产后出血?妊娠期糖尿病?妊娠期高血压疾病?胎儿生长受限?羊水量异常?胎儿窘迫) 及新生儿出生体质量?新生儿窒息?新生儿高胆红素血症等的差异?【结果】 HBV-DNA阳性组 ...
doaj
慢病毒敲减质粒pLKO.1-hSRF的构建及鉴定 [PDF]
, 2018 目的:构建敲减人血清反应因子SRF基因的慢病毒质粒,为进一步研究SRF在口腔鳞状细胞癌中的作用提供工具。方法:利用Thermo Fisher公司RNAi网站设计出针对SRF基因特异性敲减的片段,然后通过对pLKO.1载体进行双酶切,胶回收纯化后,经T4连接酶将双酶切线性化载体与设计的目的片段进行连接,转化和质粒提取,采用双酶切以及测序的方法对重组质粒进行序列鉴定。利用293T细胞对构建正确的pLKO.1-hSRF质粒进行病毒包装后感染SAS口腔鳞癌细胞,经嘌呤霉素筛选获得稳定株,并通过Western ...
纪晴 +5 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2009 【目的】 探讨荧光染料CM-DiI直接标记和慢病毒感染法EGFP标记人骨髓间充质干细胞(hMSC)用于体内示踪的优缺点65377;【方法】 利用FUGW质粒构建携带EGFP基因的慢病毒载体,并感染P3代hMSC,荧光倒置显微镜下观察细胞的感染效果及传代前后细胞EGFP表达情况的变化;CM-DiI直接标记P3代hMSC,观察CM-DiI 标记对细胞生物学特性的影响及传代前后细胞标记效果的变化65377;分别将CM-DiI和EGFP标记的P3代hMSC移植入新生大鼠左侧脑室,2周后取大鼠脑组织行冰冻切片 ...
doaj
Lentivirus production by HEK 293T cell lines using two sites of SIPI/EDG-I gene in chicken [PDF]
, 2010 RNA干扰的发现是近十年生物学上最重要的发现。RNA干扰是指动植物体内由与被沉默的基因同源的双链RNA诱发的、具有序列特异性的、转录后基因沉默的一个过程。 RNA干扰目前已成为一种出色的运用在脊椎动物体上抗病毒技术。尽管在多数研究中采用外源短链干扰RNA(siRNA)来抑制病毒复制，然而最有效的是能在修饰过的内源微RNA(miRNA)存在的情况下表达短链发卡RNA(shRNA-mirs)的载体。这些载体已在活体中得到了运用。 本研究中，通过病毒注射或病毒感染HEK293T细胞株发育而来的鸡胚胎成纤维细胞，
KARAMO TOURE
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Ｃａｓｐａｓｅ－３沉默对缺血缺氧大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的影响
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2013 【目的】 探讨沉默ｃａｓｐａｓｅ－３对大鼠骨髓间充质干细胞（ＭＳＣ）在体外缺血缺氧环境下凋亡的影响。【方法】 构建靶向ｃａｓｐａｓｅ－３的ｓｈＲＮＡ重组慢病毒并转染ＭＳＣ。建立缺血缺氧模型，流式细胞术和Ｈｏｅｃｈｓｔ荧光染色法检测细胞的凋亡情况。Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ检测ｃａｓｐａｓｅ－３的蛋白表达，Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ ＰＣＲ检测ｃａｓｐａｓｅ－３、Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ的ｍＲＮＡ表达。【结果】 重组慢病毒成功转染ＭＳＣ。缺血缺氧环境下，转染组的细胞凋亡率为（１３．６６ ± ０．２０）％，低于空载体组的 ...
doaj
Characterization of a Novel Alternatively Spliced Variant from Human FMR1 Gene and Function of Its Encoded Product [PDF]
, 2017 脆性X智力障碍1基因（fragileXmentalretardation1gene，FMR1）编码一个选择性RNA结合蛋白，称脆性X智力低下蛋白(fragileXmentalretardationprotein，FMRP)。该蛋白表达减少或缺失可导致一种常见的遗传性智力缺陷疾病，称脆性X综合征（fragileXsyndrome，FXS）。FMR1基因的可变剪接与FMRP蛋白表达关系密切。不同的剪接方式会产生不同的转录本，最后导致FMRP蛋白的结构和功能发生改变，且相应的信号通路也受到影响 ...
杨文静
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慢病毒载体介导siRNA对裸鼠移植人肺腺癌A549抑瘤作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的研究慢病毒载体介导siRNA抑制survivin基因表达后对人肺腺癌A549细胞体内增殖能力的影响以及对裸鼠移植人肺腺癌的抑瘤活性。方法应用裸鼠成瘤实验测定致瘤能力的改变,采用RT-PCR和Western-blot测定干扰后survivin基因及其蛋白的表达水平;流式细胞术检测肺癌细胞凋亡指数和增殖指数。结果靶向survivin基因的siRNA可以有效抑制survivin基因的表达,使survivin-mRNA表达减少50%-80%,蛋白表达减少60%;流式细胞术检测细胞凋亡率明显提高 ...
赵岐刚, 田小侠, 李鹏, 司磊
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基于episomal CRISPR/Cas9 载体的基因敲入方法
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2018 【目的】研究一种在哺乳动物细胞中高效的基因敲入方法，比较带有oriP-EBNA1 序列的episomal CRISPR/Cas9载体与普通CRISPR/Cas9载体的基因敲入效率是否有差别。【方法】首先利用慢病毒载体构建稳定表达红色荧光蛋白DsRedE2的人胚肾细胞系（293FT）与人诱导多能干细胞系（hiPS）；利用CRISPR/Cas9序列设计网站，设计和合成靶向DsRedE2的向导RNA（sgRNA），分别克隆至带有oriP-EBNA1的episomal CRISPR ...
邹征伟, 赖兴强, 李伟强
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慢病毒载体介导的BDNF基因与电针对神经病理痛模型大鼠痛阈的影响
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的观察慢病毒载体介导的BDNF与电针对神经病理痛模型大鼠热辐射痛阈的影响差别,比较基因与电针的镇痛疗效,探讨BDNF对疼痛可能的作用机理。方法本研究采用坐骨神经结扎损伤的神经病理性疼痛大鼠CCI模型,运用荧光免疫标记法,观察慢病毒载体介导的BDNF与电针干预后大鼠不同时间点（3 d、7 d、21 d）BDNF在相应节段脊髓内表达的变化。另运用BME-410C热痛刺激仪记录大鼠术前（0 d）及术后1 d、3 d、5 d、7 d、9 d、14 d、21 d,各组的热辐射刺激缩足潜伏期痛阈的变化 ...
黄爱苹 +5 more
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