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TNF induced RIP3-dependent NADH depletion [PDF]
肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF)能诱导L929细胞产生相互作用蛋白3(receptor-interactingprotein3,RIP3)依赖的程序性细胞坏死,并且在该过程中,胞内的线粒体产生的活性氧(reactiveoxygenspecies,ROS)会积聚,同时当RIP3的表达水平敲低时,胞内ROS的积聚也受到了抑制。但是RIP3如何影响ROS的具体机制仍不清楚。 因为ROS的产生主要在线粒体电子传递链上,而还原型辅酶Ⅰ(NADH)和还原型辅酶Ⅱ(NADPH ...
张丽芳
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Establishment of MDCK cell lines which stably express visualable human neonatal Fc receptor [PDF]
[目的]建立稳定表达融合EGFP的人新生儿Fc受体(h FcRn)的MDCK细胞株。[方法]构建重组慢病毒质粒p EGFP-h FcRn,采用四质粒包装系统共转染HEK 293T细胞生产重组慢病毒,感染MDCK细胞后对EGFP阳性细胞进行流式单细胞分选;通过Western Blot及EGFP-β2m荧光共定位验证h FcRn的完整性,并用流式细胞仪检测h FcRn与人Ig G的结合活性。[结果]测序结果表明成功构建p EGFP-FcRn慢病毒表达载体;感染后EGFP阳性MDCK细胞比例约为26.5 ...
周兵 +6 more
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应用双靶标CRISPR慢病毒载体在间充质干细胞中稳定敲除lncRNA DANCR基因
【目的】应用CRISPR/Cas9方法,构建特异性靶向长链非编码RNADANCR基因两端的双靶标慢病毒载体,稳定敲除间充质干细胞(MSC)中的DANCR基因,为研究DANCR的生物学功能奠定基础。【方法】首先设计靶向DANCR的5’和3’端的sgRNA(single-guideRNA),转染293FT细胞,提取293FT细胞基因组DNA,验证靶向序列的有效性。然后通过gateway和酶切连接的方法,将分别靶向5’和3’端的两条有效sgRNA序列连接至同一慢病毒CRISPR载体 ...
彭丹, 钟小敏
doaj
重组慢病毒对不同哺乳动物细胞基因转移及表达效率的研究 [PDF]
慢病毒是一种具有独特优点和巨大应用潜力的哺乳动物细胞基因转移载体,我们对慢病毒载体对不同哺乳动物细胞的基因转移及表达效率进行了平行比较研究.应用第三代重组慢病毒系统构建了携带CMV启动子-EGFP报告基因表达元件的重组慢病毒Lenti-EGFP,分别对多种不同哺乳动物细胞进行转导实验,在转导48 h后应用流式细胞仪检测报告基因在不同细胞株中的转移及表达效率.我们共使用了29种哺乳动物细胞株,包括14种人类组织细胞,5种猴组织细胞,9种鼠组织细胞,1种兔组织细胞.结果显示,重组慢病毒具有良好的基因转移能力,
夏宁邵 +8 more
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Expression and biological behaviors of long non-coding RNA-ROR in gastric cancer [PDF]
背景:胃癌是消化系统常见的恶性肿瘤,发病率高,预后效果差。早期发现、早期诊断是目前提高胃癌患者生存率的关键环节,因此,寻找新的胃癌早期诊断的分子标志物是目前胃癌研究亟待解决的问题之一;此外,近年来肿瘤的分子靶向治疗方兴未艾,但这些靶向治疗药物价格昂贵、疗效不稳且大多依赖进口,因而,从我国国情的实际出发,寻找新的治疗靶点是我国目前肿瘤靶向治疗急需克服的困难。长链非编码RNA-ROR是最新发现对细胞重编程过程具有重要调控作用的非编码RNA。目前研究发现ROR与乳腺癌、肝癌及胶质瘤的发生进展密切相关 ...
朱长明
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e抗原阴性乙肝患者HBV-DNA检出率与临床疾病状态的关系 附视频
研究肝病患者e抗原转阴后病毒复制情况以及HBV-DNA检出率与临床疾病状态的关系。方法采用PCR技术对108例eAg阴性、HBsAg阳性肝病患者进行血清HBV-DNA分析,同时进行肝功能指标检测。结果50.9%的患者体内仍存在乙肝病毒复制。HBV-DNA阳性无症状携带者27.8%、慢迁肝45.8%、慢活肝77.8%、肝硬化56.5%、肝癌37.5%。HBV-DNA阳性组ALT值为138.6±102.8IU,而HBV-DNA阴性组为34.2±30.2IU ...
杨立军, 张晶
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TIPE2 promote synovial fibroblasts cell apoptosis of adjuvant arthritis rats by up-regulating caspase while down-regulating NF-κB [PDF]
目的:TIPE2能够抑制炎症以及肿瘤的发生发展,并且TIPE2过表达能够促进细胞的凋亡。类风湿关节炎是一种免疫多态性慢性疾病,我们应用类风湿关节炎模型大鼠佐剂型关节炎滑膜成纤维样细胞(fibroblast-likesynoviocytesofratadjuvantarthritis,AA-FLS),通过体外实验分析TIPE2对死亡受体5诱导细胞凋亡的作用探讨TIPE2对佐剂型关节炎发病的影响。 方法:通过RT-PCR、荧光实时定量PCR和Western ...
石春燕
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研究肝病患者e抗原转阴后病毒复制情况以及HBV-DNA检出率与临床疾病状态的关系。方法采用PCR技术对108例eAg阴性、HBsAg阳性肝病患者进行血清HBV-DNA分析,同时进行肝功能指标检测。结果50.9%的患者体内仍存在乙肝病毒复制。HBV-DNA阳性无症状携带者27.8%、慢迁肝45.8%、慢活肝77.8%、肝硬化56.5%、肝癌37.5%。HBV-DNA阳性组ALT值为138.6±102.8IU,而HBV-DNA阴性组为34.2±30.2IU ...
杨立军, 张晶
doaj
Study of regulation of OVOL2 in colorectal cancer metastasis and invasion [PDF]
OVOL2是进化上相当保守的一种转录因子,它与胚胎发育之间的关系已经被很多研究所报道,但是OVOL2与肿瘤的发生发展关系还知之甚少。本文主要从OVOL2是如何调控结直肠癌的转移与侵袭方面做了详细的研究。 首先我们从结直肠癌病人样本的组织芯片中发现肿瘤中OVOL2含量低的病人预后生存期更短。然后我们通过体外细胞增殖实验、裸鼠皮下成瘤实验、小鼠免疫组化实验、HE染色实验证实了OVOL2不能够抑制结直肠癌的增殖。于是我们猜测OVOL2可能是通过抑制结直肠癌转移和侵袭过程,延长患者的寿命 ...
孙广斌
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一种可药物筛选及体内检测的新型慢病毒基因治疗载体的构建 [PDF]
为实现基因治疗过程中的有效药物筛选及体内检测,首次利用核糖体内部进入位点(IRES)构建了同时携带O6-烷基鸟嘌呤-DNA烷基转移酶(MGMT)的突变型P140K基因和荧光素酶(Luciferase)基因的慢病毒载体pBobi-MIL。RT-PCR、免疫荧光、药物筛选克隆形成及化学发光检测等实验结果表明感染重组慢病毒L-MIL的细胞能同时表达MGMT及Luciferase。构建成功的新型慢病毒载体为今后的基因治疗奠定了基础 ...
侯汪衡 +9 more
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