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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2002 【目的】调查线粒体NADH 脱氢酶亚单位1(ND1)基因的T3394C 位点突变与中国人糖尿病的发病情况。【方 法】随机收集338 例无血缘关系的糖尿病患者及262 例正常对照组, 用聚合酶链反应扩增、限制性内切酶Hae Ⅲ 消化进行突 变筛查, DNA 序列分析确认。【结果】糖尿病患者中T3394C 突变者共8 例(2.37%), 正常对照组中只有1 例(0.38 %, P < 0.01)。糖尿病突变患者中4 例有糖尿病家族史, 4 例病人由于胰岛素分泌功能下降和/ 或出现并发症 ...
修玲玲 +4 more
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亚洲黑熊四川亚种Ursus thibetanus mupinensis线粒体细胞色素C氧化酶亚基Ⅲ基因的克隆与初步分析
四川大学学报. 自然科学版, 2007 根据已报道的部分哺乳动物线粒体细胞色素C氧化酶(Cytochrome C Oxidase)亚基Ⅲ基因(mtCOXⅢ)的相关信息设计引物,运用PCR技术,首次从亚洲黑熊四川亚种(以下简称四川黑熊,Ursus thibetanus mupinensis)的肌肉组织总DNA中成功克隆了mtCOXⅢ基因的编码序列,并对其进行了初步分析.结果表明:四川黑熊mtCOXⅢ基因序列全长784 bp,ORF是783 bp,编码261个氨基酸的蛋白质,该蛋白的等电点为6.47,分子量为29840.6 Da ...
杜玉杰 +4 more
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban正常眼压性青光眼（NTG）是原发性开角型青光眼（POAG）的独立亚型，特征为眼压正常（＜21 mmHg）但出现进行性视神经病变、视网膜神经节细胞（RGC）凋亡及视野缺损。其发病机制主要为非眼压依赖，核心涉及以基因与线粒体为中心的过程，包括RGC退变、神经炎症、线粒体功能障碍和遗传易感性。基于此，本文系统梳理NTG的非眼压依赖、基因驱动机制，重点解析OPTN、TBK1、FOXC1与OPA1如何通过线粒体功能紊乱、胶质细胞激活、炎症信号、细胞凋亡与轴突退化等途径导致RGC损伤。其中 ...
胡昊, 梁亮
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的探讨右美托咪定（DEX）诱导的肌细胞钙浓度双相增加与能量代谢之间的相关性。方法选取出生5天后的雄性Wistar大鼠做为实验中的研究对象,共分为2大组:对照组和右美托咪定组（低剂量0.1μmol/L、高剂量1μmol/L）。利用荧光蛋白钙指示剂测定大鼠肌细胞中钙的变化情况,利用酶标仪测定线粒体琥珀酸脱氢酶反应线粒体的功能,采用1420Victor多标记免疫分析仪测定分析肌细胞中线粒体膜电位的变化,利用高效液相色谱技术测定肌细胞中三磷腺苷、二磷腺苷以及一磷腺苷含量变化 ...
许占宏, 房丽华, 李淑艳, 董冉
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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban缺血性脑卒中（IS）是一种因血栓或栓塞导致脑血流中断，进而引发脑组织损伤的脑血管疾病。线粒体不仅是能量代谢的核心场所，还参与钙信号调控、活性氧生成及细胞凋亡启动等关键生物学过程。因此，线粒体结构和功能的完整性对于神经细胞的存活至关重要，而线粒体质量控制系统（MQC）是维持线粒体功能与质量稳态的基石。MQC通过协同调控线粒体生物发生、线粒体动力学平衡（融合与分裂）、线粒体自噬、氧化应激清除及钙稳态调节等核心环节，维持线粒体网络在数量、结构和功能上的稳态。然而在IS发生后，神经元因缺血缺氧会出现炎症反应 ...
彭依然, 李瑞青
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的探讨3个原发性点突变与LHON的关系,以了解我国LHON的发病特点,为LHON的快速诊断和产前咨询提供一个快速、经济适用的方法。方法选取83例临床诊断为LHON患者,针对其mtDNA基因组3460、11778、14484位点设计引物进行PCR,并对PCR产物进行SSCP及DNA序列分析。同时选取25例正常健康成人作为对照。结果所有83例被临床诊断为LHON先证者中,发现78例患者有线粒体基因组DNA的点突变,占94.0%（78/83）。其中73例患者mtDNA存在G11778A位点突变,占88.0%（
隋桂琴, 王陆飞, 王桂云
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重组质粒pcEgr-hp53的构建及在A549和SKOV-3细胞中电离辐射诱导p53基因和蛋白的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建重组质粒pcEgr-hp53,并探讨其在A549和SKOV-3细胞中的辐射诱导表达及抗癌作用。方法将野生型p53 cDNA全长插入pcDNA3.1质粒多克隆位点,用Egr-1启动子替代pcDNA3.1质粒CMV启动子,构建成pcEgr-hp53重组质粒;通过脂质体介导转染法将重组质粒pcEgr-hp53和pcDNA3.1分别转染入A549和SKOV3细胞株,并经G418筛选稳定克隆并扩增培养。采用RT-PCR和流式细胞术的方法检测了不同剂量X-射线照射转染后的A549和SKOV ...
刘锋, 董丽华, 李艳博, 龚守良
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四川大学学报. 自然科学版, 2010 利用RT-PCR方法从7721细胞系中分离野生型SAFB1基因,将该基因分别克隆入PET28a和pcDNA3.1载体来构建原核表达及真核表达载体.重组质粒经IPTG诱导表达后亲和层析纯化,用Western印迹实验验证蛋白表达的正确性.将SAFB1基因转入MCF7中,以RT-PCR的方法检测蛋白的表达,检测其对XOR基因的调控作用及做生长曲线验证其对乳腺癌细胞抑制作用.结果证实了SAFB1对乳腺癌细胞生长抑制作用非常明显,且对XOR基因的表达有一定的抑制作用.
季雯娟 +5 more
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重组腺病毒载体Ad-LMP-1的构建及其转染 MSC后成骨活性
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2010 【目的】 快速构建大鼠LIM矿化蛋白-1基因重组腺病毒载体,转染MSC,探讨LMP-1基因对MSC成骨分化和成骨活性的影响65377; 【方法】 从大鼠成骨细胞内提取总RNA,并设计LMP-1特异性引物进行RT-PCR,获取LMP-1基因后利用Invitrogen公司的TOPO定向克隆技术创建入门克隆pENTR/D-LMP-165377;转化TOP10细菌后,挑取阳性克隆摇菌提取质粒,入门克隆再与表达载体pAD/CMV/V5-DEST进行同源重组反应得到病毒载体pAD/CMV/V5-LMP-1 ...
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pcEgr-hp53辐射诱导表达载体的构建及其体外抗肿瘤的作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的构建辐射诱导表达载体pcEgr-hp53,并研究其体外稳定转染联合X射线照射对人卵巢癌SKOV3细胞增殖的抑制作用及其凋亡的影响。方法将野生型p53cDNA全长插入pcDNA3.1质粒的多克隆位点,用Egr-1的启动子替代pcDNA3.1质粒的CMV启动子,构建成pcEgr-hp53重组质粒;通过脂质体介导转染法将重组质粒pcEgr-hp53和pcDNA3.1分别转染入SKOV3细胞株,细胞株命名为SKOV3-hp53及SKOV3-vect,并经G418筛选稳定克隆并扩增培养 ...
董丽华 +4 more
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