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Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997 摘 要 为了解肝细胞癌(HCC)中p53 基因的突变情况, 收集86 例HCC 手术切除标本, 采用聚合酶链反 应-单链构象多态性(PCR/ SSCP)、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR/ RFLP)和DNA 序列分析, 研 究了p53 基因的突变情况。86 例HCC 中, p53 基因的突变率为36 %, 其中, 密码子249 的突变率为33 .7 %, 1 例 SSCP 和RFLP 均提示密码子249 存在突变者经DNA 序列分析显示密码子249 的第三个碱基发生了AGG/Arg →
彭晓谋 彭文伟 周元平
doaj
, 2005 目的建立一种准确、方便、价廉、适合临床的APC基因突变检测方法。方法采用SYBRGreenⅠ为实时聚合酶链反应(PCR)指示剂,首先从基因组DNA中扩增包含突变位点的靶基因(270bp),并通过熔解曲线分析确定产物;再以上述片段为模板扩增特定长度的小片段(40/35bp),以0.5℃/step的速率,获得从65℃到99℃的熔解曲线以检测APC_1309位5bp缺失突变。结果临床标本检测结果表明:18例结直肠肿瘤患者石蜡组织标本中检出APC_1309位5bp缺失突变7例 ...
刘忠臣, 李庆阁, 郑薇薇
core
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 2001 【目的】构建人Ⅰ 型基质金属蛋白酶基因(MMP1)真核表达重组质粒, 并进行序列分析。【方法】用逆转录聚 合酶链反应扩增人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 获得目的基因片段(1 407 bp)连接至pcDNA3 载体, 并转化大肠杆菌DH5α, 筛 选阳性克隆并鉴定, 并对片断全长进行DNA 序列测定。【结果】所克隆人Ⅰ 型基质金属胶原酶cDNA, 含全长MMP1 编码区, 与GeneBank 公布序列比较, 仅1 318 位的胞苷酸C 突变为腺苷酸A。并成功构建了含有MMP1 ...
彭 慧, 汪 谦, 黄洁夫
doaj
, 2001 目的分析闽南肝癌高发区乙型肝炎病毒 (HBV)复制与原发性肝细胞癌 (PHCC)的关系。方法用实时荧光定量聚合酶链反应 (PQ- PCR)技术测定 6 1例 PHCC患者、40 7例不同病程的 HBV感染者及 17例健康人血清中 HBV DNA的含量 ,对照分析 HBV标志物 (HBVM) ,同时检测 PHCC患者抗 - HCV- Ig G和 HCV RNA。结果PHCC组 HBV DNA阳性率高达 80 .3% (49/ 6 1) ,高于其他肝病组 ,差异具显著性 ...
尹震宇 +4 more
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PCR-SSP 快速HLA-DR 基因分型法#br# 的建立及临床初步应用
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997 摘 要 采用序列特异性引物聚合酶链反应(PC R-SS P)方法, 对22 份国际标准细胞株DNA 及23 例临床 血标本DNA 进行H LA-DR 基因分型, 扩增条件为94 ℃, 30 s , 58 ℃, 30 s 共30 个循环, 对各个标准DNA 的分 型结果显示, 符合率为100 %, 无假阳性及假阴性,提示本方法快速、准确, 适合于临床应用。
王晓波 陈规划 郑克立
doaj
LAPTM4B Promotes Autophagy through Regulation of ATG3 in Hepatocellular Carcinoma [PDF]
, 2017 摘要 背景 原发性肝癌在世界范围内都有很高的发病率与死亡率，是常见的恶性肿瘤之一，肝癌的发生具有早期症状不明显，后期发展迅速的特点，这为肝癌的早期治疗提高了难度，随着医学的进步，尽管肝癌的诊断与治疗都有了很大进步，但肝癌患者的总体生存率还是不理想，所以寻找新的治疗靶点越来越迫切。 近年来关于自噬在肿瘤发生发展中的研究越来越多，自噬在肿瘤的形成、增殖、转移以及能量代谢等诸多方面具有调节作用。自噬活性在肝癌的发生发展中起着重要作用。LAPTM4B ...
王菲
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野生动物学报, 1996 利用蛋白酶Ｋ分解毛发蛋白，并使用酚和氧仿除去蛋白质杂质方法提取毛中ＤＮＡ。结果测量获得的数据和曲线表明：动物脱落毛发以及从保存多年标本获得的毛发均可用来提取到具有一定纯度和数量的ＤＮＡ，完全可以满足聚合酶链式反应（ＰＣＲ）所需。
郑冬, 孔瑾, 石绍业
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浙江大学学报. 医学版目的研究核蛋白（Nupr）1调控软骨细胞铁死亡在骨关节炎进展中的作用及机制。方法将小鼠膝关节软骨细胞分为小干扰RNA（siRNA）对照组、靶向Nupr1的siRNA（siNupr1）组、siRNA对照+IL-1β组（siRNA对照干扰24 h后再加入10 ng/mL IL-1β）和siNupr1+IL-1β组（siNupr1干扰24 h后再加入10 ng/mL IL-1β）。采用蛋白质印迹法和定量逆转录聚合酶链反应法分别检测Nupr1蛋白及其信使RNA（mRNA）表达。采用细胞计数试剂盒（CCK ...
廖 太阳 +6 more
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Mutual regulation between CHD5 and EZH2 in hepatocellular carcinoma [PDF]
, 2016 肝细胞癌Hepatocellularcarcinoma(HCC)在全球范围内是发病率排第五位的癌症。由于其在手术后存在潜在的转移和复发，尽管对于肝细胞癌的治疗越来越先进，但是肝细胞癌病人的预后仍然很差。因此，研究清楚肝癌肿瘤发生发展和复发的分子机制，发现新的预后分子标志物，将会有助于肝癌治疗策略的发展。 分子机制的研究主要是以染色质调控为重要部分，其调控方式有很多不同的分类，如有些调控基因参与“书写”和“阅读”组蛋白翻译后修饰，这些调控基因在肿瘤的发生发展中控制基因的表达起到重要作用。例如：多疏蛋白 ...
李钊
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TaqDNA 聚合酶一步法获得TGF-β1#br# 基因片段的RT-PCR 扩增产物
Zhongshan Daxue xuebao. Yixue kexue ban, 1997 摘 要 以组织细胞中提取的总RNA 为模板, 加入TaqDNA 聚合酶和一对以TGF-β 1 cDNA 为模板设计的 引物, 经变性、退火、延伸共30 次循环后, 可以得到以cDNA 为模板的扩增产物。实验证实TaqDNA 聚合酶具有 逆转录酶活性, 用一步常规聚合酶链反应即可获取逆转录聚合酶链反应的TGF-β 1 468 bp 扩增产物。
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