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采用聚合酶链反应-限制性片段长度的多态性(polymerasechainreaction-restrictionfragmentlengthpolymorphism,PCR-RFLP)分析apoE的多态性。通过在引物5′端增加一段寡核苷酸,降低了扩增用二甲基亚砜(DMSO)的浓度,高效地扩增目标基因。运用限制性内切酶HhaI内切编码精氨酸的核苷酸顺序GCGC,不能切割编码半胱氨酸的核苷酸顺序GTGC。对含有编码有变异的112位和158位氨基酸的扩增产物进行酶解,用聚丙烯酰胺电泳(PAGE ...
陆元善, 吴文俊, 庄庆祺
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恙虫病是由感染恙螨幼虫叮咬人体传入恙虫病立克次体所致的急性传染病。地里纤恙螨和小板纤恙螨分别为 我国南方和北方的主要传播媒介。近年来,新、旧流行区的恙虫病陆续发生、疫情上升。本课题系为进一步控制恙虫病的流 行,对我国主要媒介地里纤恙螨的一些生物学特征和恙虫病立克次体进行了系列研究,包括 : ①地里纤恙螨射线诱发突变、种 株杂交、种株染色体与氨基酸测定;②恙螨人工接种恙虫病立克次体及其阳性恙螨模型的建立;③恙螨体内恙虫病立克次体 的分离、检测及其效果;④恙螨、鼠宿主和患者体内恙虫病立克次体动态及其传病关系;
黎家灿 郑小英 奚志勇 倪 宏 张海红 陈成福
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建立一种非同位素的不对称聚合酶链反应-单链构象多态性技术(aPCR-SSCP):通过不对称PCR(aPCR)获得单链,普通PAGE电泳分离,经银染快速准确检出突变;应用这种方法,研究了4株鼻咽癌细胞株CNE1,CNE2,HK1和SUNE1中肿瘤抑制基因P53基因突变,证实CNE1,CNE2在第8外显子,HK1在第5外显子有突变,并发现新建立的细胞株SUNE1存在第8外显子的突变。
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【目的】探讨美蓝法示踪和定位行乳腺癌前哨淋巴结活检(SLNB)的可行性及其临床意义,并探索常规病理检查(HE染色)、免疫组化染色(IHC染色)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对判断前哨淋巴结(SLN)微转移灶的价值。【方法】66例乳腺癌患者,用美蓝示踪行SLNB,对SLN及腋窝淋巴结(ALN)进行HE染色;随机选取40例SLN进一步行细胞角蛋白19(CK19)的IHC染色及RT-PCR检测;比较3种方法对SLN微转移灶检出的敏感性、准确率及假阴性率的差异。【结果】66例中,美蓝示踪成功检出63例,
任占平 +3 more
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目的探讨分析疑难ABO血型标本与其等位基因的检测,为临床遇到的疑难ABO血型标本提供可靠的血型鉴定方法。方法选取2013年8月到2014年8月期间在笔者就职医院各科室送检的临床病人血液样本9例,首先按照常规血型检测技术进行ABO血型血清学试验,确定ABO正反定型,再采用盐酸胍/蛋白酶K裂解提取法对ETDA抗凝处理后的静脉外周血进行DNA提取,再使用聚合酶链反应-序列特异性引物法(PCR-SSP)对9例血样进行ABO血型基因分型检测。结果 9例临床病人血清学表型为:AxB 2例、AB亚1例、A亚B亚1例 ...
王莹
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BAF57 regulates hepatoma cell proliferation and apoptosis via the Wnt pathways [PDF]
背景和目的肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)是全球最常见、高发的恶性肿瘤之一,增长快、高转移性高复发已成为影响HCC预后的最重要因素。随着技术的发展,研究的深入,很多实验报道肝癌细胞内存在很多的异常蛋白表达或者基因突变,而这些异常点往往可以作为靶向治疗的目标点。随着基因靶向治疗的发展,人们发现一部分癌症确实可以得到良好的治疗,生存期明显延长。我们将继续探所肝癌细胞内存在的可能作为靶向治疗的目标点,同时结合靶向治疗,以突破目前肝细胞癌治疗的极限。以往研究发现BAF57 ...
许剑锋
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小儿常见感染菌16S-23S rRNA基因区间的分子生物学研究
目的 探讨聚合酶链反应 (PCR)加限制性内切酶片段长度多态性 (RFLP)分析在细菌rDNA区间检测中的应用。方法 以 16S 2 3SrRNA基因区间为靶序列 ,设计引物 ,选择合适的内切酶 ,采用PCR法加RFLP法检测标准菌株及临床菌株的rDNA区间。结果 2 6株不同的标准菌株经PCR扩增后 ,分别出现一条带 ,两条带 ,三条带及多条带的不同DNA图谱 ,敏感性试验可检出 2 .5CFU的细菌 ,与人类基因组DNA、真菌及病毒无交叉反应。其中 14种菌经一步PCR扩增即可区分。另 ...
傅君芬 +5 more
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Study on Ensemble Algorithm for Multi-class Gene Microarray Datasets [PDF]
集成学习是当前机器学习领域的一个研究热点,具体到多分类问题,旨在通过一组差异的分类器共同解决起初的多分类问题,然后经过大多数投票等策略将各个分类器的输出结果进行融合。集成多分类算法相比于单个的优秀分类器往往性能上更准确、更稳定,同时还具有更强的泛化能力。在解决多分类问题时,基于纠错输出编码算法(ECOC)。这是解决多分类问题的一种灵活、高效的算法框架,关键要点是将多分类转变为多个二分类问题。此外,遗传规划算法可用于解决二分类问题,通过进化计算得到准确的分类规则。本文在已有的研究基础上 ...
曾志浩
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目的研究核蛋白(Nupr)1调控软骨细胞铁死亡在骨关节炎进展中的作用及机制。方法将小鼠膝关节软骨细胞分为小干扰RNA(siRNA)对照组、靶向Nupr1的siRNA(siNupr1)组、siRNA对照+IL-1β组(siRNA对照干扰24 h后再加入10 ng/mL IL-1β)和siNupr1+IL-1β组(siNupr1干扰24 h后再加入10 ng/mL IL-1β)。采用蛋白质印迹法和定量逆转录聚合酶链反应法分别检测Nupr1蛋白及其信使RNA(mRNA)表达。采用细胞计数试剂盒(CCK ...
廖 太阳 +6 more
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A study about the impact of overpression of Oct4 and Sox2 gene on gastric cancer cell biology and oncology characteristics [PDF]
目的:通过构建过表达干细胞因子Oct4和Sox2的胃癌SGC7901细胞株,研究过表达干细胞因子Oct4和Sox2对SGC7901胃癌细胞干细胞特性、肿瘤学特性、及生物学特性的影响,并探讨Oct4及Sox2在肿瘤细胞中的作用机制。 方法:1.构建携带Sox2基因的重组质粒,慢病毒载体感染SGC7901-OCT4细胞株得到SGC7901-OCT4-SOX2稳转细胞株。2.利用荧光定量PCR、western–bloting检测过表达Oct4及Sox2的胃癌SGC7901细胞中胃癌干细胞标志基因表达情况。3 ...
李文鹏
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