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表达大熊猫源犬瘟热病毒H蛋白复制缺陷型重组腺病毒的构建及鉴定
为构建能够表达大熊猫源犬瘟热病毒(CDV)分离株giant panda/SX/2014 H蛋白的复制缺陷型重组腺病毒,利用反转录聚合酶链反应(RTPCR)扩增株giant panda/SX/2014 H基因,通过TOPO连接克隆至入门载体pENTR/DTOPO,得到重组入门质粒pENTR/DTOPOCDVH,然后与腺病毒骨架载体pAd/CMV/V5DEST进行LR重组,获得重组质粒pAdCDVH;重组质粒用PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞,获得重组腺病毒rAdCDVH ...
陈廷炜 1 +4 more
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【目的】构建小鼠T-bet基因重组腺病毒载体,为T-bet基因在支气管哮喘治疗中的作用研究提供有效的T-bet生物表达系统。【方法】采用内切酶从质粒T-bet/GFP-RV中切获约1.7kb的小鼠T-betcDNA片段,与穿梭质粒pShuttle连接,再通过稀有酶切位点将含T-betcDNA的表达盒与Adeno-X腺病毒载体骨架连接,构建重组载体pAdeno-T-bet,测序鉴定无错配及插入移位等DNA顺序改变,并转染HEK293细胞,出现CPE后取含病毒上清的细胞培养液抽提病毒DNA行PCR鉴定 ...
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【目的】构建小鼠端粒酶蛋白亚单位(mouse telomerase reverse transcriptase,mTERT)基因重组腺病毒载体,为下一步研究其体外表达和动物实验研究提供基础。【方法】从肝癌细胞中提取总RNA。采用RT-PER技术扩增mTERT的基因编码区序列,将序列定向克隆至真核表达载体pAC,将此表达质粒与腺病毒重组质粒pJM17共同转染293细胞,经同源重组产生重组腺病毒载体Ad-mTERT,纯化后的重组腺病毒载体Ad-mTERT在293细胞大量扩增并通过氯化铯密度梯度离心法纯化 ...
姜楠 +7 more
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大鼠BDNF基因复制缺陷型重组腺病毒的构建与鉴定 [PDF]
【目的】构建携带大鼠脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)目的基因的复制缺陷型重组腺病毒,并初步检测其体外表达目的基因的能力。【方法】提取大鼠脑组织总RNA,使用RT—PCR方法扩增BDNF目的基因并将其克隆入pMD18-T Simple载体测序,将测序完全正确的BDNF目的基因克隆入pShuttle2中,然后利用体外连接法将BDNF目的基因克隆入Adeno—X^TM腺病毒骨架中。Lipofectamine^TM ...
王鹏 +6 more
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Confidence in public institutions is critical in containing the COVID‐19 pandemic
Abstract This paper investigates the relative importance of confidence in public institutions to explain cross‐country differences in the severity of the coronavirus disease 2019 (COVID‐19) pandemic. We find that a 1 SD increase (e.g., the actual difference between the United States and Finland) in confidence is associated with 56.3% fewer predicted ...
Anna Adamecz, Ágnes Szabó‐Morvai
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Highlights This prospective study compares 15 patients with immune‐checkpoint induced diabetes mellitus (CPI‐DM) with a propensity score matched cohort of patients with other diabetes types. Diabetic ketoacidosis at onset and autoimmune comorbidity is more frequent in CPI‐DM patients. This can be avoided by regular glucose measurements and education on
Sascha R. Tittel +10 more
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目的 监测2018-2021年长春市儿童下呼吸感染中腺病毒感染情况、流行病学特征及基因进化特点。方法采用Real time PCR方法对2018年6月至2021年6月份采集的172例儿童支气管肺泡灌洗液标本进行呼吸道病原检测。对检测腺病毒阳性的标本进行病毒分离、对分离到的病毒进行Hexon基因测序测定、BLAST比对后确定腺病毒型别,分析腺病毒进化特点。结果 172份标本中共检出腺病毒阳性标本32份,阳性率为18.6%,分离得到腺病毒毒株13株,分离率为40.63%,基因特性分析显示腺病毒7型11株 ...
柳鸿敏 +4 more
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目的 本国际临床指南由欧洲残疾儿童学会(the European Academy of Childhood Disability,EACD)牵头制定,旨在解决发育性协调障碍(developmental coordination disorder,DCD)的定义、诊断、评估、干预以及与社会心理方面的临床应用关键问题。 方法 本指南针对五个领域的关键问题,通过文献综述和专家团队的正式讨论达成共识。为保证指南的循证基础,以“机制”、“评估”和“干预”为检索词, 对2012年更新以来提出的最新建议以及新增的“社会心理问题”和“青少年/成人”为检索词进行检索。根据牛津大学循证医学中心证据等级 (证据水平 [level of evidence, LOE]1–4) 将结果进行分类,最终转化为指南建议。并由国际 ...
Jing Hua +6 more
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Salivary gland hypofunction in KK‐Ay type 2 diabetic mice
Abstract Background Hypofunction of different organs in the body is associated with diabetes, including in the oral cavity. Diabetes is often associated with xerostomia, but the underlying mechanism is not well characterized. Thus, the mechanisms underlying diabetes‐induced xerostomia were investigated in this study in KK‐A y mice as an experimental ...
Takashi Munemasa +8 more
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水生呼肠孤病毒为感染水生动物的一类病原体,隶属于呼肠孤病毒科新建水生呼肠孤病毒属。草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus,GCRV)是引起中国南方淡水养殖草鱼暴发性出血病病原,鲅鱼呼肠孤病毒(Threadfin reovirus,TFV)是引起海水养殖鲅鱼病毒病病原。本研究将GCRV与新加坡TFV分离株进行了部分特性比较研究。结果表明,GCRV与TFV均能感染CIK细胞,但对其它鱼类细胞系的敏感性有所差异。此外,凝胶电泳与逆转录聚合酶链式扩增显示,GCRV与TFV核酸属不同的基因型 ...
汪亚平, 方勤, 丁清泉, 朱作言
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