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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的利用小鼠盐诱导基因（Salt induced kinase2,SIK2）的重组腺病毒载体,研究脂肪细胞中SIK2的表达。方法重组小鼠SIK2基因腺病毒载体经脂质体转染293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3-L1脂肪细胞,通过real-time PCR及免疫印迹法检测鼠SIK2在3T3-L1脂肪细胞中的表达。结果纯化后的病毒滴度达0.5×1012病毒颗粒/ml。重组腺病毒载体能在成熟3T3-L1脂肪细胞中高表达鼠SIK2 ...
杜静 +5 more
doaj
人中期胚胎、新生儿脐血及成人骨髓间质干细胞基本生物学特性的比较 [PDF]
, 2004 【目的】比较人中期胚胎脐血、新生儿脐血以及成人骨髓3种来源的间质干细胞(MSC)生物学特性,为临床治疗选择细胞来源提供实验依据。【方法】采用L-DMEM培养液分离培养3种来源MSC,流式细胞仪进行细胞表型、细胞周期、细胞凋亡分析,成骨、成脂诱导液分别诱导细胞分化,携带绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒转染MSC,荧光显微镜和流式细胞仪检测3种细胞表达外源基因特性。【结果】3种来源标本中均可分离培养出MSC,但新生儿脐血中阳性获得率最低,为29.17%(7/24);3者细胞形态、表面抗原表达 ...
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N-cadherin对视网膜色素上皮细胞增殖及迁移侵袭的影响 [PDF]
, 2019 【目的】为了明确神经钙黏蛋白（N-cadherin）在糖尿病视网膜病变上皮-间质转化中的作用，探讨N-cadherin对视网膜色素上皮细胞增殖、迁移及侵袭力的影响及作用机制。【方法】分别采用Ad-N-cadherin（Ad-N-cad）、Ad-si N-cadherin（si N-cad）及Ad-GFP、Ad-si Control（si Con）对照腺病毒处理细胞以过表达或沉默N-cadherin，采取葡萄糖（25mmol/L）处理视网膜色素上皮细胞以模拟高糖状态，使用CCK8试剂检测细胞增殖情况 ...
李艳梅
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2012 目的研究重组腺病毒载体感染小鼠神经瘤细胞（N2a）的感染效率及重组腺病毒介导的人鞘氨醇激酶-1（sphingosine kinase-1,SPK1）基因在N2a细胞表达特性。方法用流式细胞仪检测感染效率,用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白的表达;用Western blot方法检测SPK1蛋白的表达。结果 N2a细胞的感染效率和绿色荧光蛋白表达量在一定范围内随着病毒感染复数（Multiplicity of infection,MOI）的增加而增高,MOI为100时感染效率达峰值为（99.57±0.133）%
杨阳 +6 more
doaj
, 2016 2009-2010 > Academic research: refereed > Publication in refereed journalVersion of ...
Qian, ZM, 李艳伟, 赵晋英
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环状RNA circ_0120051通过miR-144-3p/IDH2轴抑制心肌成纤维细胞的纤维化表型研究 [PDF]
目的研究环形 RNA circ_0120051对心肌成纤维细胞的纤维化表型的调控作用和机制。方法通过实时萤光定量PCR（RT-qPCR）检测健康器官捐献者（n=24）与心力衰竭（HF）病人（n=21）心肌标本中 circ_0120051及其宿主基因溶质载体家族8成员A1（SLC8A1）的表达水平。核糖核酸外切酶（RNase R）消化实验鉴定circ_0120051的RNA稳定性。RT-qPCR检测circ_0120051在人心肌细胞AC16中的核质分布情况。利用腺病毒在C57BL/6乳小鼠心肌成纤维细胞（
伍华燕 +7 more
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Small interfering RNA mediated multi-target therapy of cancer [PDF]
, 2009 : It has been reviewed that as many as hundreds genes are dysregulated in various kinds of cancers, yet most therapies are targeted toward a single gene.
Rong-Guang Shao
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SIK2 shRNA重组腺病毒载体构建及其在3T3-L1脂肪细胞的表达
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2011 目的构建特异性小鼠盐诱导基因（Salt induced kinase2,SIK2）的shRNA腺病毒载体,干扰脂肪细胞中SIK2的表达。方法设计3对靶向SIK2的shRNA,插入穿梭质粒pENTR/U6载体,转染3T3-L1脂肪细胞,通过Real-timePCR方法筛选最佳沉默SIK2效果的穿梭质粒,经腺病毒同源重组后,重组小鼠SIK2shRNA腺病毒载体经脂质体转染HEK293A细胞,在细胞内包装获得腺病毒颗粒AdV-SIK2-shRNA,并进行大量扩增和纯化。纯化的腺病毒感染成熟的3T3 ...
杜静 +5 more
doaj
携带人可溶性TRAIL基因的重组腺病毒在肺癌细胞中的转染效率及表达特性研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的研究重组腺病毒感染肺腺癌细胞A549的转染效率及重组腺病毒介导的人可溶性肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体（hTRAIL95-281）基因的体外表达。方法用不同感染滴度（MOI）（0-10 000 VP/cell）的重组腺病毒Ad-CMV-EGFP转染A549细胞后48 h收集细胞,经流式细胞仪检测其转染效率,并在共聚焦荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用MOI为5 000 VP/cell的Ad-CMV-EGFP感染肿瘤细胞后不同时间（24 h、48 h、72 h和96 h）收集细胞 ...
朴春姬, 田梅, 杨巍, 李修义
doaj
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 构建人VEGF16 5腺病毒表达载体 ,探讨应用血管内皮生长因子 （VEGF）基因治疗脑梗死的可行性。方法 采用分子克隆技术 ,以质粒hVEGF16 5·SR为模板 ,扩增hVEGF16 5成熟cDNA。经穿梭质粒PShuttle克隆到腺病毒质粒上 ,构成Adeno VEGF16 5腺病毒重组质粒 ,经酶切及测序鉴定正确后 ,包装成为重组Adeno VEGF16 5腺病毒 ,并进行电镜观察及滴度测定。用免疫印迹及免疫组化方法检测VEGF蛋白的表达。结果 ...
张海鸥, 吴军, 林凯华, 易黎
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