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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的构建携带人肝癌细胞CDK2基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体;方法设计能表达CDK2特异性的小干扰RNA(siRNA),构建pAKD-shRNA-CDK2重组质粒,采用磷酸钙共转染法将重组质粒pAKD-shRNACDK2、包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共转染AAV-293细胞,采用定量PCR方法对病毒进行滴度测定;结果三质粒共转染AAV-293细胞48h后,荧光显微镜下检测到GFP绿色荧光,表明共转染成功,测定病毒平均滴度为3.56×1012v.g/ml ...
于水澜, 姜颖, 于英君, 宋高臣
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的包装携带人T细胞转录因子T-bet基因的重组腺病毒,为研究T-bet在人鼻黏膜中作用的分子机制奠定基础。方法采用RT-PCR方法从健康人PBMC中扩增出转录因子T-bet的cDNA序列,构建重组穿梭载体pDC316-T-bet;采用阳离子脂质体介导将重组穿梭载体pDC316 T-bet与pBHGloxΔE1,3C re质粒共转染293细胞,包装出携带T-bet基因的重组腺病毒rAdT-bet,空斑纯化,PCR鉴定阳性rAdT-bet。结果以空斑纯化后的rAdT-bet为模板 ...
孙克巍 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建含鼠LINGO-1短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA）的复制缺陷型腺病毒载体。方法通过PCR法将带有LINGO-1 shRNA序列构建至U6启动子（U6sh LINGO-1）下游,与T载体连接,将质粒转化入大肠杆菌。将U6sh LINGO-1连到穿梭质粒pDC316上,与腺病毒基因组质粒pBHGlox△E1、3Cre共转染293T细胞,得到重组腺病毒载体（rAd LINGO-1）。经PCR鉴定正确后,进行扩增、纯化、滴度测定及感染性鉴定。结果PCR法得到U6sh ...
高峰, 孙红辉, 杨有庚
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携带AFP的rAAV感染树突状细胞对肝癌细胞杀伤作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的探讨携带甲胎蛋白(AFP)的重组腺相关病毒(rAAV)感染树突状细胞(DCs)对肝癌细胞株SMMC-7721的体外杀伤作用,为肝癌非手术治疗提供方法。方法首先确定AFP基因序列并合成AFP基因,将其转染至重组腺相关病毒rAAV,之后将转染AFP的rAAV感染树突状细胞,并将感染rAAV的DC与SMMC-7721共同培养,同时设未感染rAAV的DC作为对照组,用MTT法检测rAAV-DC及DC对SMMC-7721的杀伤活性。结果感染rAAV的DC对SMMC-7721的杀伤活性为89.00 ...
王斌 +5 more
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, 2012 《水生病毒及病毒病图鉴》是为相关学科的学生和研究者所著，水生病毒学研究的对象是感染水生生物或存在于水环境中的病毒，可供从事病毒学、水生生物学和环境科学等相关学科教学与研究的大专院校及科研单位图书馆收藏。本书源自著者相关研究的积累，兼具专著与图籍属性，从逾万幅图中遴选了约800幅（图或图版），其中彩图约200幅。本书分为6个部分：水生病毒病症及水生病毒学技术、水生哺乳动物病毒、爬行动物病毒、两栖动物病毒、鱼虾类动物病毒及淡水浮游病毒，共分23章，以图示和简洁的中英文图注直观展示了水生生物病毒病症状 ...
张奇亚, 桂建芳
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以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的研究人甲胎蛋白（AFP）启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP（+）肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP（+）的肝癌细胞BEL-7402和AFP（-）的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡。结果与对照病毒rvAd ...
魏强 +5 more
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, 1999 在患暴发性流行病的鳜鱼组织中观察到 3种不同形态的病毒 ,它们分别是直径约为2 80nm的球形病毒、大小约为 2 5 0nm× 1 2 0nm的弹状病毒和大小约为 2 0 0nm× 1 0 0nm的杆状病毒 .这种现象表明 ,单一病毒疫苗难以达到预防鳜鱼暴发性流行病的原因可能是由于鳜鱼受到多种病毒病原的侵染 ,提示鳜鱼病毒病的防治不要忽视病毒病原的复杂性
张奇亚,李正秋
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 探讨小儿病毒感染与微卫星DNA的关系。方法 取经咽拭子病毒分离证实为呼吸道合胞病毒或腺病毒感染的患儿血提取DNA ,用聚合酶连反应对基因座D5S818进行扩增 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离DNA片段 ,成象系统分析D5S818基因片段长度多态性 ;并分析D5S818基因片段长度多态性与病毒感染临床表现的相关性。结果 发现病毒感染后D5S818基因座等位基因频率与正常对照组有明显差异 ,平均AGAT重复数 ,观察组较对照组略高 ,A GAT重复数
孙利炜 +6 more
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, 2006 嚴重急性呼吸道症候群 (Severe Acute Respiratory Syndrome, SARS)為一具有高度傳染 性和高致死率的新興疾病，致病原目前已知為一新型變種冠狀病毒，命名為SARS 冠狀病 毒(SARS-CoV)。由於目前對於SARS 並無有效的治療方法，為免SARS 再次爆發流行，因 此疫苗的研發成為十分重要的工作。在以病毒當做載體設計的試驗性疫苗中，重組腺病毒 能夠高量的表達蛋白質，並在許多病毒性疾病模式中，誘發中和性抗體及細胞免疫反應； 而其感染人類後不引起嚴重疾病 ...
楊雅倩
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, 2003 草鱼呼肠孤病毒是引起草鱼出血病的主要病原，隶属于呼肠孤病毒科水生呼肠孤病毒属。序列分析表明，GCRVS2片段长为3877核苷酸，编码一个分子量为138kDa的蛋白VP2，具有RNA聚合酶性质。为进一步了解该病毒RNA聚合酶特性，本研究在对GCRV RNA聚合酶基因(GCRV—RdRp)保守区(约1．5kb)重组质粒pR／RRp高效表达的基础上，分别构建了编码GCRV RNA聚合酶保守区N端与C端部分基因的pR／RRpN及pR／RRpC重组表达载体，并在原核细胞中获得成功表达 ...
汪亚平, 方勤, 丁清泉, 朱作言
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