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重组腺病毒载体携带反义微小RNA-21对膀胱癌细胞生长的作用
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2010 目的探讨重组腺病毒载体介导的微小RNA-21（miRNA-21）反义寡核苷酸（ASOND）对人膀胱癌细胞株T24生长的影响。方法构建反向插入miRNA-21基因的重组腺病毒载体（rAV-miRNA-21）,并用反义rAV-miRNA-21转染T24,即病毒载体用药组。采用噻唑蓝（MTT）法和原位末端标记（TUNEL）法检测T24细胞的增殖和凋亡情况。同时设对照组和空病毒组作为对比。结果 rAV-miRNA-21用药组、对照组和空病毒组T24细胞的增殖率分别为（37.1±6.8）%（、95.7±5.8）%（
朱德淳 +4 more
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Curcumin-induced Apoptosis Affects the Expression and Localization of hnRNP A2/B1 in Human Osteosarcoma MG-63 Cells [PDF]
, 2010 姜黄素(CurCuMIn)诱导处理的人成骨肉瘤Mg-63细胞,在光镜和电镜观察细胞凋亡的基础上,对HnrnP A2/b1在核基质中存在、分布及其与凋亡相关基因产物在Mg-63细胞中的共定位关系进行了研究.经姜黄素处理后,细胞出现染色质凝聚、细胞核固缩、凋亡小体等典型的细胞凋亡形态特征;双向凝胶电泳和质谱鉴定结果显示,HnrnP A2/b1存在于Mg-63细胞核基质蛋白组分中,在姜黄素处理后细胞核基质蛋白中表达下调.蛋白质印迹杂交结果,证实HnrnP A2/b1在姜黄素处理前后的Mg ...
孔海燕 +7 more
core
两种不同AFP启动子控制下表达HIV vpr基因的重组非复制型腺病毒获得及鉴定
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2004 目的 构建及包装由全长 5 1kbAFP启动子和低氧反应元件 （HRE）与 0 3kbAFP启动子两者组合的杂合0 3kbAFP启动子控制下表达HIVvpr基因的两种重组非复制型腺病毒。方法 采用细菌内同源重组腺病毒载体制备方法和PacI酶切、PCR、SouthernBlot鉴定方法。结果 构建及包装出由这两种AFP启动子控制下表达HIVvpr基因的重组非复制型腺病毒 ,经PacI酶切、PCR和SouthernBlot基因整合分析证明构建成功。结论 我们成功构建了的全长5 ...
魏强 +4 more
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重组腺病毒介导RECK基因在大肠癌细胞中的表达及抑制癌细胞浸润能力的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 研究重组腺病毒介导RECK基因转染大肠癌细胞后基因的表达情况,并观察转染细胞浸润能力变化。方法 构建了RECK基因的复制缺陷型重组腺病毒载体adRECK ,以adRECK转染大肠癌癌细胞株后,用RT PCR法检测RECK基因在大肠癌中的表达。并用Boyden小室测试转染细胞的侵袭性。结果 RECK基因在转染细胞中有效的表达。被转染细胞浸润能力明显下降。结论 重组腺病毒介导RECK基因能够在大肠癌细胞中有效的表达,转染病毒的大肠癌浸润能力明显下降。
杨德君 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2019 目的构建携带人肝癌细胞CDK2基因的重组腺相关病毒(rAAV)载体;方法设计能表达CDK2特异性的小干扰RNA(siRNA),构建pAKD-shRNA-CDK2重组质粒,采用磷酸钙共转染法将重组质粒pAKD-shRNACDK2、包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共转染AAV-293细胞,采用定量PCR方法对病毒进行滴度测定;结果三质粒共转染AAV-293细胞48h后,荧光显微镜下检测到GFP绿色荧光,表明共转染成功,测定病毒平均滴度为3.56×1012v.g/ml ...
于水澜, 姜颖, 于英君, 宋高臣
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2008 目的包装携带人T细胞转录因子T-bet基因的重组腺病毒,为研究T-bet在人鼻黏膜中作用的分子机制奠定基础。方法采用RT-PCR方法从健康人PBMC中扩增出转录因子T-bet的cDNA序列,构建重组穿梭载体pDC316-T-bet;采用阳离子脂质体介导将重组穿梭载体pDC316 T-bet与pBHGloxΔE1,3C re质粒共转染293细胞,包装出携带T-bet基因的重组腺病毒rAdT-bet,空斑纯化,PCR鉴定阳性rAdT-bet。结果以空斑纯化后的rAdT-bet为模板 ...
孙克巍 +4 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2009 目的构建含鼠LINGO-1短发夹RNA（short hairpin RNA,shRNA）的复制缺陷型腺病毒载体。方法通过PCR法将带有LINGO-1 shRNA序列构建至U6启动子（U6sh LINGO-1）下游,与T载体连接,将质粒转化入大肠杆菌。将U6sh LINGO-1连到穿梭质粒pDC316上,与腺病毒基因组质粒pBHGlox△E1、3Cre共转染293T细胞,得到重组腺病毒载体（rAd LINGO-1）。经PCR鉴定正确后,进行扩增、纯化、滴度测定及感染性鉴定。结果PCR法得到U6sh ...
高峰, 孙红辉, 杨有庚
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携带AFP的rAAV感染树突状细胞对肝癌细胞杀伤作用的实验研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2020 目的探讨携带甲胎蛋白(AFP)的重组腺相关病毒(rAAV)感染树突状细胞(DCs)对肝癌细胞株SMMC-7721的体外杀伤作用,为肝癌非手术治疗提供方法。方法首先确定AFP基因序列并合成AFP基因,将其转染至重组腺相关病毒rAAV,之后将转染AFP的rAAV感染树突状细胞,并将感染rAAV的DC与SMMC-7721共同培养,同时设未感染rAAV的DC作为对照组,用MTT法检测rAAV-DC及DC对SMMC-7721的杀伤活性。结果感染rAAV的DC对SMMC-7721的杀伤活性为89.00 ...
王斌 +5 more
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以人甲胎蛋白启动子控制表达HIV-1vpr基因的重组腺病毒诱导肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡作用的研究
Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2006 目的研究人甲胎蛋白（AFP）启动子控制表达HIV-1 vpr基因的重组腺病毒对AFP（+）肝癌细胞G2期阻滞和细胞凋亡的作用,评估以该策略利用vpr进行肿瘤特异性基因治疗的可行性。方法将以AFP启动子控制HIV-1vpr表达的重组腺病毒rvAdAFP-vpr和空白载体rvAd-null分别感染AFP（+）的肝癌细胞BEL-7402和AFP（-）的肝癌细胞SMMC-7721,利用流式细胞仪检测Vpr的特异性表达和细胞周期分布,用细胞荧光染色和线粒体膜电位检测等方法观察细胞凋亡。结果与对照病毒rvAd ...
魏强 +5 more
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Zhongguo shiyan zhenduanxue, 2005 目的 探讨小儿病毒感染与微卫星DNA的关系。方法 取经咽拭子病毒分离证实为呼吸道合胞病毒或腺病毒感染的患儿血提取DNA ,用聚合酶连反应对基因座D5S818进行扩增 ,聚丙烯酰胺凝胶电泳分离DNA片段 ,成象系统分析D5S818基因片段长度多态性 ;并分析D5S818基因片段长度多态性与病毒感染临床表现的相关性。结果 发现病毒感染后D5S818基因座等位基因频率与正常对照组有明显差异 ,平均AGAT重复数 ,观察组较对照组略高 ,A GAT重复数
孙利炜 +6 more
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