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Effects of bone marrow-derived mesenchymal stem cell layer on expansion and differentiation of hematopoietic stem cells from cord blood(骨髓间充质干细胞与造血干细胞共培养对脐血造血干细胞扩增的作用)

open access: yesZhejiang Daxue xuebao. Lixue ban, 2003
脐带血造血干细胞的异体移植对高剂量化疗的患者恢复造血功能是一种有效的细胞学疗法.脐带血造血干细胞的体外扩增能提高有效植入的造血干/祖细胞的数量.将扩增10 d的造血干/祖细胞移植给高剂量化疗的成人患者,患者平均约在移植后的第26天(第15~45天)达到了嗜中性粒细胞的植入.为了加快有核细胞数量的扩增和嗜中性粒细胞的成熟,在以骨髓间充质干细胞为培养基质细胞层,采取阶段扩增方法培养单个核细胞和分选的CD34+细胞,并与无骨髓间充质干细胞的培养体系进行对照.从冻存的脐带血中分离的单个核细胞和CD34 ...
WANGJin-fu(王金福)   +3 more
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麝香酮对人源骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2016
目的分析麝香酮对人源骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用,明确骨髓间充质干细胞联合麝香酮在骨损伤治疗方面的应用优势。方法通过密度梯度离心法,从健康志愿者骨髓中分离间充质干细胞,并采用CCK-8检测法以及流式细胞术对骨髓间充质干细胞的增殖能力和表面特异标记进行鉴定,进一步通过实时定量PCR,检测麝香酮处理后的细胞中成骨基因的表达变化,通过碱性磷酸酶染色,评价麝香酮对人源骨髓间充质干细胞成骨分化的促进作用。结果人源骨髓间充质干细胞可在体外正常增殖,同时,骨髓间充质干细胞表面CD44、CD73 ...
刘敏婕, 刘朋飞, 赵雷
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麝香酮对大鼠骨髓间充质干细胞成骨能力的影响分析

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2015
目的探索麝香酮对大鼠骨髓间充质干细胞成骨能力的影响,为骨髓间充质干细胞在骨损伤修复方面的应用开发新的方法。方法采用密度梯度离心法,从大鼠骨髓中分离骨髓间充质干细胞,通过CCK-8方法对细胞的增殖能力进行评价,并进一步通过流式细胞术鉴定细胞表面的特异标记;用麝香酮(1.0mg/L)对细胞进行处理,分析处理后的骨髓间充质干细胞在成骨基因表达以及碱性磷酸酶活性方面的变化。结果从大鼠骨髓中分离间充质干细胞可在体外条件下正常生长增殖,细胞CD29、CD44、CD90均呈阳性表达,CD45呈阴性表达 ...
刘敏婕, 刘朋飞, 赵雷
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兔骨髓间充质干细胞的分离、培养及鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2013
目的探讨兔骨髓间充质干细胞分离、培养和鉴定的方法。方法全骨髓贴壁法提取兔骨髓中的间充质干细胞,流式细胞术检测细胞表面分子CD14、CD29、CD34、CD44、CD45和CD90等标志的表达以及不同代次兔BM-SCsDNA含量。通过定向分化检测兔BMSCs的多向分化潜能。结果兔骨髓间充质干细胞呈形态较为均一的小梭形、克隆样生长。流式细胞术检测结果显示,传代至第12代和20代的兔骨髓间充质干细胞检测对数生长期细胞的DNA含量结果显示细胞为正常二倍体细胞,无明显变异。细胞表面表达CD29(61.71 ...
刘伟, 陈剑, 宋佳, 宋滇文
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BMSCs移植后脊髓损伤大鼠VEGF表达的变化

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的观察骨髓间充质干细胞移植对大鼠脊髓损伤后血管内皮生长因子基因和蛋白表达的影响。方法以贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质千细胞。压迫法制作大鼠脊髓压迫损伤模型。假手术组仅咬除T8-10棘突和椎板,不损伤脊髓。模型制作后DMEM组、骨髓间充质干细胞组分别进行DMEM与骨髓间充质干细胞损伤区周围局部4点注射。结果假手术组脊髓组织中仅见微量血管内皮生长因子表达。骨髓间充质干细胞组在细胞移植后1,3,5 d,血管内皮生长因子mRNA表达趋势与DMEM组相同,但表达水平均明显高于相应时间点的DMEM ...
景元海   +9 more
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LIF真核表达载体的构建及其在MSCs中的稳定表达

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的在人骨髓间充质干细胞内大量稳定的表达人白血病抑制因子(human Leukemia Inhibitory Factor,hLIF)。方法应用RT-PCR方法从人蜕膜组织中扩增出白血病抑制因子,并将其构建于pcDNA3.1真核表达载体上。利用脂质体进行基因骨髓间充质干细胞的转染。利用G418进行基因的稳定表达筛选。通过RT-PCR和Western blot方法进行基因表达的检测。结果成功扩增出人白血病抑制因子基因,成功构建hLIF-pcDNA3.1真核表达载体。转染LIF-pcDNA3 ...
杨春辉, 杜珍武, 杨光, 尹维田
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加压运动对羊骨髓间充质干细胞增殖、分化的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2016
目的探索加压运动对羊骨髓间充质干细胞增值、分化的影响。方法将60只波尔山羊随机分成实验组和对照组,实验组每周进行2次加压运动,对照组非加压下运动,6个月后获取羊骨髓,然后采用percoll密度梯度离心法分离并吸取上中层界面间以单个核细胞为主的白色云雾层进行培养,观察细胞形态和增殖速率;两组细胞均用5-氮杂胞苷诱导其定向分化为心肌样细胞,对诱导后的细胞进行免疫荧光检测细胞上心肌特异性抗原a-actin表达情况。结果从骨髓中分离出的白色云雾层中的细胞能贴壁、能传代且生长状态良好。此外,经过5 ...
杨玉辉   +5 more
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肝衰竭大鼠血清诱导间充质干细胞向肝细胞分化的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的观察肝衰竭大鼠血清诱导骨髓间充质干细胞向肝细胞分化的作用,探讨大鼠骨髓间充质干细胞分离培养、体外扩增及其向肝细胞分化的体外培养条件和方法。方法从股骨胫骨分离培养大鼠骨髓间充质干细胞,体外扩增培养、鉴定,并采用肝衰竭大鼠血清血清诱导培养,分别在诱导培养0、7、14、24、28天时留取细胞,观察细胞形态的变化,并采用免疫细胞化学方法检测肝特异性标记物(AFP、Alb、CK-18)、用PAS进行糖原染色实验,以验证诱导分化结果。结果诱导后5天间充质干细胞表现为肝细胞样,随着诱导培养时间的延长 ...
孙庆国   +3 more
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IGF-1通过ERK-MNK信号通路诱导骨髓间充质干细胞VEGF表达的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2014
目的探讨ERK-MNK信号通路是否参与IGF-1对骨髓间充质干细胞VEGF表达的诱导。方法免疫印迹方法检测IGF诱导的骨髓间充质干细胞内HIF-1α、p-MNK等信号蛋白的表达变化和VEGF表达的变化,给予MNK抑制剂CGP 57380和HIF-1α抑制剂YC-1后再检测含外源性IGF-1的骨髓质间充质细胞中VEGF的表达水平。结果外源性IGF诱导后,HIF-1α、p-MNK等相关信号蛋白表达上调,分别阻断MNK和HIF后,VEGF的表达趋于正常。结论 IGF-1通过调节ERK ...
刘柏含   +4 more
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骨髓间充质干细胞对慢性特发性血小板减少性紫癜患者T细胞T-bet和GATA-3表达的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2014
目的探讨正常人骨髓间充质干细胞体外对慢性免疫性血小板减少症患者T细胞T-bet、GATA-3以及下游细胞因子IFN-Y和IL-4表达的影响。方法采用Ficoll分离和直接贴壁、传代培养扩增骨髓间充质干细胞,用Ficoll法和尼龙棉柱法获取慢性免疫性血小板减少症患者外周血的T淋巴细胞;以5×104个/孔的MSCs作为基底层细胞,经植物血凝素(PHA)刺激后,与正常人骨髓间充质细胞共培养4天,收集T淋巴细胞和培养上清,采用RTPCR法检测T细胞中T-bet和GATA mRNA的表达水平,用酶联免疫吸附法 ...
姜铧   +5 more
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