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贴壁法培养不同龄小鼠骨髓间充质干细胞的生物学特点

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的观察不同龄小鼠骨髓间充质干细胞在体外分离、培养、扩增的过程,并对其生物学特性进行初步比较分析,为下一步实验提供依据。方法选取出生1周、8周、16周的健康昆明小鼠,分成新生、青年、成年三组,采用贴壁法分离培养骨髓间充质干细胞,进行细胞形态学和贴壁率观察,绘制生长曲线。结果各组细胞约在9-12天80%-90%长满培养瓶底,融合成单层,传代后的骨髓间充质干细胞形态更加单一,为排列更加有序的成纤维细胞样细胞。贴壁率的观察和生长曲线显示,在相同的培养条件下,新生小鼠细胞增殖最快,细胞可扩增能力最强 ...
杨光   +4 more
doaj  

Experimental study of ex vivo expanded hematopoietic stem/progenitor in the two step culture from human umbilical cord blood transplanted into NOD/SCID mice(体外分阶段共培养法扩增的脐血造血干/祖细胞移植于NOD/SCID小鼠的实验研究)

open access: yesZhejiang Daxue xuebao. Lixue ban, 2005
研究用分阶段共培养法进行体外扩增的脐血造血干/祖细胞对NOD/SCID小鼠重建造血功能的作用,探讨新扩增技术体系对将来临床移植的可行性.分离脐血单个核细胞,分别用rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF组合(非共培养组合)和rhSCF+rhG-CSF+rhMDGF+人骨髓间充质干细胞组合(共培养组合)进行脐血造血干/祖细胞的体外扩增,并对扩增细胞进行流式细胞术和细胞集落形成能力分析.在移植实验中,将经致死剂量射线照射后的NOD/SCID小鼠随机分为3组,每组10只.A组:每只移植8.5 ...
WANGJin-fu(王金福)   +3 more
doaj   +1 more source

大鼠骨髓间充质干细胞向神经元样细胞定向诱导分化及免疫组化鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2010
目的建立体外分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)的方法,体外诱导其向神经元样细胞方向分化。方法应用细胞培养技术从大鼠股骨、胫骨中分离、纯化骨髓间充质干细胞并在体外进行培养,以形态学方法鉴定间充质干细胞,在倒置显微镜下观察细胞的形态特征,利用含10 ng/ml bFGF的LG-DMEM及含200μmol/L BHA、2%DMSO的无血清DMEM诱导其向神经元样细胞分化,并通过免疫组化方法鉴定。结果经原代及传代培养的骨髓间充质干细胞呈梭形,类似于成纤维细胞;成神经元诱导24 h后 ...
于音   +7 more
doaj  

亚急性期静脉注射人骨髓间充质干细胞对脑梗死大鼠神经功能的影响

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2018
目的观察亚急性期静脉注射人骨髓间充质干细胞对脑梗死大鼠神经功能以及梗死体积的影响。方法制备大鼠大脑中动脉闭塞模型,在造模后第14天经尾静脉注射2×106个人骨髓间充质干细胞,在造模第1、14、21、35、42天进行行为功能测试,第42天后处死大鼠,通过Nissl染色测定大鼠的脑梗死体积。结果与模型组相比,干细胞治疗组的3种行为功能测试以及梗死体积均没有显著差异(P>0.05)。结论亚急性期静脉注射人骨髓间充质干细胞并不能改善脑梗死大鼠的神经功能。
迟鲁梅   +5 more
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骨髓间充质干细胞对大鼠生精上皮不同照射剂量放射性损伤的修复作用

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2007
目的研究大鼠骨髓间充质干细胞的分离培养方法,建立大鼠生精上皮放射性损伤动物模型,观察骨髓间充质干细胞对大鼠生精上皮放射性损伤的修复作用。方法体外培养大鼠骨髓间充质干细胞,建立大鼠放射性损伤动物模型。高剂量(2Gy)放射线照射组Wister大鼠20只,低剂量(0.5Gy)放射线照射组Wister大鼠20只,各组中随机取10只移植骨髓间充质干细胞作为实验组,剩余未移植大鼠10只作为对照组。取10只为经放射线照射大鼠作为正常对照组。照射2周和4周后取大鼠睾丸,切片染色镜下观察 ...
孙晓艳, 陈强, 范东艳, 范洪学
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大鼠仔鼠骨髓间充质干细胞体外分离培养与鉴定

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2004
目的分离培养骨髓间充质干细胞(mesenchymalstemcells,MSCs)并进行鉴定。方法取周龄大鼠骨髓用percoll分离液分离,DMEM(含20%胎牛血清)培养、传代,碱性磷酸酶和苏丹Ⅳ染色,流式细胞仪测MSCs表面标志CD44和CD45。结果碱性磷酸酶染色和苏丹Ⅳ染色阴性,CD44、CD45表达甚微。结论所分离培养的细胞为未分化的具有较强增殖能力的细胞,可认为是间充质干细胞。
杨柏梁   +5 more
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体外定向诱导大鼠骨髓间充质干细胞分化为心肌样细胞的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2012
骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cell,MSCs)是骨髓中一类具有多分化潜能的干细胞,在一定诱导条件下不仅可分化为中胚层的骨细胞、软骨细胞、脂肪细胞、心肌细胞,而且能分化成外胚层的神经元、神经胶质细胞及内胚层的肝细胞[1-4]。MSCs向心肌细胞的分化为扩张性心肌病、心肌梗死等的治疗带来了新的希望[5]。
孙庆国, 赵文静, 王日中, 陈锋
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人骨髓MSC分离培养及诱导分化为脂肪细胞的实验研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2009
目的建立一种分离纯化,培养扩增人骨髓MSCs的方法,并探讨体外诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞。方法密度梯度离心,贴壁培养和消化时间控制相结合,分离纯化人骨髓间充质干细胞,并用马血清诱导分化为脂肪细胞。结果MSCs原代培养呈均匀分布的集落样生长,呈梭形,细胞传代稳定,在体外连续传代培养9代,未发生形态学改变,无衰老征象;传代培养MSCs(P3)在20%马血清的L-DMEM培养液中分化为脂肪细胞。结论骨髓MSCs体外增殖和传代能力强,通过离体培养可使体内环境下低丰度的MSCs实现数量扩增 ...
王莹, 罗速
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绿色荧光蛋白标记SOX9基因慢病毒载体的构建及在兔骨髓间充质干细胞中的表达

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2017
目的构建绿色荧光蛋白标记的SOX9基因慢病毒载体,转染兔骨髓间充质干细胞,观察SOX9基因的表达情况。方法双酶切从GeneArt提供的含SOX9基因序列的质粒13ABIV6C1366933并克隆到pLenti6.3MCSIRES2-EGFP载体,获得含SOX9基因的质粒pLMIG-13GS0345-1,通过293T细胞包装后获得绿色荧光蛋白标记的SOX9基因慢病毒载体(Lenti-SOX9-GFP),将Lenti-SOX9-GFP转染兔骨髓间充质干细胞后观察SOX9基因的表达情况 ...
刘伟   +4 more
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长链非编码RNA UCA1促进人骨髓间充质干细胞成骨分化研究

open access: yesZhongguo shiyan zhenduanxue, 2023
目的 探讨lncRNA UCA1对人骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法 构建过表达lncRNA UCA1的慢病毒载体(UCA1a和UCA1b)和空载体分别感染人骨髓间充质干细胞。实验分为4组:对照组1为干细胞对照组;对照组2为空载体对照组;UCA1a为高表达UCA1a的实验组;UCA1b为高表达UCA1b的实验组。在成骨诱导分化7 d、14 d、21 d时,进行茜素红染色。采用Real-Time RT-PCR检测成骨相关基因Col1、ALP、OPN和SP7的mRNA表达水平。结果 ...
卢倩倩, 张泽兵, 王景云
doaj  

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